时间：2023-05-29 17:41:24
开篇：写作不仅是一种记录，更是一种创造，它让我们能够捕捉那些稍纵即逝的灵感，将它们永久地定格在纸上。下面是小编精心整理的12篇氨基酸的作用，希望这些内容能成为您创作过程中的良师益友，陪伴您不断探索和进步。
氨基酸是构成蛋白质的基本单位。人体共有22种氨基酸，其中属于必需氨基酸的有8种，它们是亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、蛋氨酸和色氨酸。在日常饮食中补充不同的氨基酸，可治疗或预防不同疾病。现将8种必需氨基酸的功效、主治和富含这些氨基酸的食物介绍如下，供大家参考。
亮氨酸：可促进睡眠，降低身体对疼痛的敏感性(如缓解偏头痛)，缓和紧张和焦躁情绪，减轻因饮酒过多而引起的生化失调症状，并有助于预防中毒。富含亮氨酸的食物有脱脂奶酪、牛奶、羊肉、兔肉、鱼肉、火鸡肉、香蕉、花生、玉米以及大豆等。
赖氨酸：能减轻或防止单纯性疱疹感染(如热病疱疹、口唇疱疹)的发生。能使注意力高度集中，对儿童生长、发育、增加体重和身高均有明显作用。患疱疹、多动症、体重不增、身高增长缓慢者，可多吃富含赖氨酸的食物，有预防和治疗作用。富含赖氨酸的食物有鱼肉、牛奶、豆类及豆制品、酸奶酪、啤酒酵母、蛋类等。
苯丙氨酸：是传达大脑和神经细胞之间往来信息的化学物质，在人体内转变为去甲肾上腺素和多巴胺，可提高身体的灵敏度与活力。富含苯丙氨酸的食物有面包、豆制品、脱脂牛奶、杏仁、花生、南瓜子、芝麻等。
异亮氨酸：为血红蛋白形成所必需的氨基酸，能调节血糖和能量水平，帮助提高体能。帮助修复肌肉组织，促进伤口愈合。富含异亮氨酸的食物有动物肝脏、鸡蛋、鸭蛋、黄豆、黑豆、玉米、黑米、糙米、杏仁、花生、全麦、鱼肉以及各种奶制品等。 缬氨酸：可加快创伤愈合，治疗肝功能衰竭，提高血糖水平，增加生长素。富含缬氨酸的食物有大豆、黑米、蛋类、花生、肉类等。
苏氨酸：可协助其他蛋白质被人体吸收、利用，防止脂肪在肝脏中累积导致脂肪肝，促进人体抗体生成，增强机体免疫系统功能，预防感冒。患有脂肪肝、免疫力低下、易患感冒、对多种蛋白质吸收不良者，可多吃富含苏氨酸的食物。富含苏氨酸的食物有动物肝脏、脑髓、肉类、蛋类、蘑菇以及灵芝等。
蛋氨酸：有很强的抗氧化作用，能促进脂肪分解，预防脂肪肝、动脉硬化、心血管疾病和肾脏疾病发生，并有助于清除人体内的有害物质如铅、汞、锡等重金属，防止肌肉软弱无力，防治风湿热，治疗妊娠尿毒症等。患有脂肪肝、动脉硬化、冠心病、肾炎、风湿病、妊娠尿毒症者可多吃蛋氨酸。富含蛋氨酸的食物有黄豆、黑豆、青豆、鸡蛋、鸭蛋、鱼肉、牛肉、大蒜、番茄、洋葱以及酸奶等。
色氨酸：可促进睡眠，减轻人体对疼痛的敏感性，缓解女性偏头痛，缓解紧张和焦虑情绪。神经衰弱、失眠症、女性偏头痛、情绪欠佳、心情抑郁及考试前紧张者等，可多吃富含色氨酸的食物。富含色氨酸的食物有糙米、大米、玉米，小米、肉类、鱼类、牛奶、羊奶、香蕉以及苹果等。
一、知识目标
1.说明氨基酸的结构特点，以及氨基酸形成蛋白质的过程。
2.概述蛋白质结构的多样性。
3.概述蛋白质的功能。
二、能力目标
通过引导学生对相关资料的分析、比较和讨论，培养学生对资料的加工和处理能力，并使学生学会归纳，进行总结得出结论。
三、情感态度与价值观
认同蛋白质是生命活动的主要承担者。
【教学重点】
1.氨基酸的结构特点，以及氨基酸形成蛋白质的过程。
2.蛋白质的结构和功能。
【教学难点】
1.氨基酸形成蛋白质的过程。
2.蛋白质结构多样性的原因。
【教学过程】
教师：多媒体演示烤肉、鸡蛋、牛奶、鱼、大豆制品等图片。提出问题：这些食物都是日常生活中我们经常吃的东西，它们都富含什么呢？
学生：观看图片，根据生活常识，回答：都富含蛋白质。
教师：肯定学生的回答，引入课题：我们每天都要补充适量的蛋白质，以满足身体的需要，那么蛋白质在人体内到底有什么作用？
教师：多媒体演示羽毛、肌肉、头发、蜘蛛丝的图片。提出问题：这些物质中的蛋白质有什么作用？
学生：观察图片，联系已有的生活经验，思考回答：组成生物体的结构物质
教师：出示资料：细胞内的化学反应都离不开酶的催化，而绝大多数酶都是蛋白质。提出问题：由此可见，蛋白质在生物体内还发挥什么作用？
学生：对资料进行分析，回答：催化作用。
教师：出示资料：生物体内的激素能够传递相关的信息，从而对生命活动进行调节，如胰岛素能够降低血糖。而其中的一些激素是蛋白质。这样的蛋白质有什么作用？
学生：分析资料，联系生活常识，思考回答：调节作用。
教师：多媒体演示抗原、抗体的图片。提出问题：当人体被某些病原体感染时，机体会产生抗体将其消灭，而抗体都是蛋白质。因此蛋白质在体内还承担什么作用呢？
学生：思考回答：免疫作用。
教师：对学生的回答进行点评和更正，总结蛋白质的功能具有多样性的特点，几乎生物体的各项生命活动都有蛋白质的参与，所以我们说蛋白质是生命活动的主要承担者。补充完善本节课题，生命活动的主要承担者――蛋白质。
教师：结构决定功能，那么蛋白质具有怎样的结构而使它具有如此重要的功能？出示几种蛋白质的分子式，提出问题：组成蛋白质的元素有哪些？蛋白质的分子量如何？
学生：观察蛋白质的分子式，计算分子量。回答问题：蛋白质的组成元素主要有C、H、O、N；分子量很大，是生物大分子。
教师：在某些食品中往往要添加氨基酸，以提高其营养价值，而氨基酸和蛋白质之间又是什么关系？
学生：根据生活常识，思考回答：氨基酸是蛋白质的基本单位。
教师：讲述氨基酸的种类和分类。出示几种氨基的结构式，提出问题：这些氨基酸分子在结构上有什么共同点？不同点？让学生写出这些氨基酸在结构上的共同点，引导学生写出氨基酸的结构通式。
学生：找出不同氨基酸分子在结构上的共同点和不同点。写出氨基酸的分子结构通式。
教师：对学生的书写情况进行巡查、纠正。强调氨基和羧基的写法，并变换各个基团的位置，告诉学生各个基团的位置可以互换。给出几种有机物的结构式，其中有的是氨基酸，有的不是。提出问题：哪些是氨基酸？以一个氨基酸分子为例，改变氨基、羧基与中心碳原子的连接方式，继续提出问题：是否还为氨基酸？
学生：配合老师的问题，积极主动地构建知识。
教师：引导学生通过问题，总结氨基酸的结构特点。
学生：总结氨基酸的结构特点。
教师：问题过渡：氨基酸是怎样形成蛋白质分子的呢？20种氨基酸又能形成多少种蛋白质呢？出示以下资料：（1）如果一个蛋白质分子仅是由氨基酸构成的，那么该蛋白质的分子量总是小于构成该蛋白质的所有氨基酸的分子量之和；（2）如果该蛋白质分子中没有其他的共价键生成，那么该蛋白质分子减少的质量始终是18的整数倍；（3）在蛋白质分子中完整的氨基和羧基的数目要远远
的少于构成该蛋白质的氨基酸的数目。
学生：分析资料，小组讨论、交流，总结氨基酸之间的结合方式――脱水缩合。
教师：结合动画演示，阐明脱水缩合的过程。
学生：观看动画，明确脱水缩合的过程。
教师：引导学生观察由氨基酸形成蛋白质的示意图，阅读课文，讨论交流：（1）氨基酸是怎样形性蛋白质的？（2）如果用20种不同的字母分别代表20种氨基酸，写出由10个氨基酸组成的长链，可以写出多少条互不相同的长链？（3）根据问题2，尝试说出蛋白质种类众多的原因？
学生：看图思考，回答问题，形成对蛋白质多样性的认识。
教师：引导学生总结蛋白质功能多样性的原因：蛋白质功能的多样性。
学生：理解结构与功能的关系。
教师：讨论：（1）2个氨基酸相互结合时，脱掉几分子的水？形成几个肽键3个氨基酸呢？（2）如果是n个氨基酸脱水缩合，形成一条肽链，脱掉几分子的水？（3）如果n个氨基酸形成m条肽链呢？
学生：回顾氨基酸脱水缩合的过程，思考、尝试作出回答
教师：请出两名学生，其中每个人都代表一个氨基酸。那么氨基酸的氨基、羧基、H、R基可以分别用身体的哪些部分来表示？
学生：头代表R基，双腿代表H，左右手分别代表氨基和羧基。
教师：怎样来表示氨基酸之间的脱水缩合？
学生：两名学生思考后，手拉手。
教师：大家请看，2个氨基酸之间形成了几个肽键？脱掉了几个水呢？
学生：思考回答。
教师：增加学生的个数，即增加氨基酸的个数，让学生自己得出n个氨基酸形成一条肽链时脱掉水的个数和形成的肽键数。让学生拉手形成2排、3排，得出n个氨基酸形成m条肽链时脱掉水的个数。
学生：配合老师的要求，完成相关活动，同时思考问题，总结结论。
教师：设计练习题，让学生在规定的时间内完成。
学生：根据已学知识，完成练习。
小结：
本节要求学生掌握的内容有氨基酸的种类、结构通式、结构特点、结合方式，蛋白质分子的结构及其多样性的原因，蛋白质的功能及其能够成为生命活动主要承担者的原因，并能够利用所学的知识解决相关的问题。
本教材一般是高一学生使用，高一学生在初中已经学习了有关食物中蛋白质消化吸收的内容，对蛋白质和氨基酸的关系有一定认识，这对本节内容的教学来说，学生有一定的知识基础，对于高一的学生来说，思维方式开始由形象思维能力为主向抽象思维能力为主转化，这为学生学习微观的生物学知识奠定了基础。
二、教材分析
《生命活动的主要承担者蛋白质》是高中生物学（必修1）中第二章第2节的内容。本节重点为：①氨基酸结构特点以及氨基酸形成蛋白质的过程，②蛋白质的结构和功能；难点为：氨基酸形成蛋白质的过程以及蛋白质结构多样性的原因。这部分内容不仅是第二章的重点内容，也是整本书重点内容之一。它是本章第1节细胞中的元素和化合物知识的继续和具体化。是学生学习必修1中第三、五章《细胞的基本结构》和《细胞的能量供应和利用》、必修3第二章《动物和人生命活动的调节》等内容的重要基础。例如讲述细胞膜的结构和功能、细胞代谢、动物激素的调节作用等内容时，要用到与蛋白质有关的知识。
三、教学目标
1.知识目标
（1）描述氨基酸的结构特点，写出氨基酸的结构通式。说明氨基酸形成蛋白质的方式。
（2）举例说明蛋白质的结构、解释蛋白质结构的多样性。
（3）举例说明蛋白质的各种功能，解释蛋白质是生命活动的主要承担者。
2 .情感态度和价值观
（1）认同蛋白质是生命活动的主要承担者
（2）关注蛋白质的发展
3.能力目标
分析问题处理问题的能力，学会总结规律
四、教学重难点
1.氨基酸的结构通式，脱水缩合的过程。
2.蛋白质的结构和功能。
3.脱水缩合的过程
4.蛋白质结构多样性的原因
五、教学思路
问题情境引出蛋白质及氨基酸的关系氨基酸种类的学习给出几种氨基酸的结构学生总结氨基酸的结构通式氨基酸脱水缩合的过程蛋白质的结构和功能总结蛋白质多样性的原因习题巩固
六.教学方法
1.自主――合作――探究。
2.新授课教学基本环节：预习检查、总结疑惑情境导入、展示目标合作探究、精讲点拨反思总结。
七、教学过程
导入新课
（多媒体演示婴儿的发育）婴儿要以奶为主要食物，因为奶是一种含蛋白质丰富的食物，蛋白质对人体的生长发育为什么这么重要呢？安利蛋白粉实际上是水解植物蛋白，里面含有多种氨基酸，那么氨基酸与蛋白质之间是什么关系呢？
学生回答：把蛋白质水解后，可以得到一类有着共同结构的物质，叫做氨基酸。所以氨基酸是蛋白质的基本单位。
一、氨基酸及其种类
教师给出几种氨基酸的结构，让学生学生归纳总结氨基酸的组成元素、结构通式及结构特点。
由于学生缺乏有机化学的相关知识，补充两个概念作为铺垫：
①化学键是指分子或晶体内相邻原子（或离子）间强烈的相互吸引作用。有机物中通常为共价键（共用电子对），常用“―”来表示。
②用短线表示一对共用电子对（共价键），用以表示分子中所含原子的结合方式和排列顺序（不表示空间结构）。叫作结构式，一般用来表示有机物
（1）氨基酸的组成元素是什么？（C、H、O、N，有的有P、S等）
（2）氨基酸的结构有什么共同点？教师引导学生用纸遮住四种氨基酸的下半部分，观察剩余部分。（总结出氨基酸的通式，学生试着写，教师巡查，帮助学生校正。）
进一步探究：
①.甘氨酸的侧链基团是什么？ 丙氨酸的侧链基团是什么？
②.R基的不同如何决定氨基酸种类的不同？
③.R基上能不能含有-NH2 或-COOH？【说明有些氨基酸如：赖氨酸（含-NH2）天冬氨酸（含-COOH）】
（简要实录：R基上可以含有-NH2 或-COOH，使学生进一步理解 “每个氨基酸分子至少都含有一个-NH2 和-COOH”）
总结出氨基酸特点：
每种氨基酸都至少有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上。各种氨基酸之间的区别在于R基的不同，如甘氨酸的R基是一个氢原子（─H），丙氨酸的R基是一个甲基（─CH3）。
（3）氨基酸的种类：生物体中组成蛋白质的氨基酸约有20种，可分为必需氨基酸和非必需氨基酸（教师解释什么是必需氨基酸）。
（过渡）氨基酸是怎样形成蛋白质的呢？
二、蛋白质的结构
学生：是通过一种叫做脱水缩合的化学反应来完成连接的。
教师继续追问：
（1）什么叫脱水缩合？什么叫肽键？什么叫多肽？什么叫肽链？
（2）氨基酸怎样形成多肽？多肽又怎样形成蛋白质？
（3）n个氨基酸形成一条肽链时，脱掉几个水分子？形成几个肽键？如果n个氨基酸形成m条肽链呢？
课件演示：氨基酸分子脱水缩合形成两条链的过程。
观察“氨基酸脱水缩合示意图”，阅读氨基酸脱水缩合过程的文字、图解，以小组为单位，讨论交流，师生共同总结。
（1）两个氨基酸分子之间失去一个水分子形成肽键的过程叫脱水缩合。
（2）二肽化合物中，连接两个氨基酸分子的那个键（―CO―NH―）叫肽键。
（3）多肽由多个氨基酸分子缩合而成的含有多个肽键的化合物，因其呈链状，也称肽链。
注意区分肽、肽键和肽链：肽键是肽的连接结构，而肽链是多肽的空间结构。
氨基酸间脱水缩合时，原来的氨基和羧基已不存在，形成的化合物即多肽的一端只有一个氨基，另一端只有一个羧基（不计R基上的氨基和羧基数）。所以对于一条多肽来说，至少应有的氨基和羧基数都是一个。
（4）形成肽键数（脱去的水分子数）=n-m。其中n表示氨基酸分子数；m表示肽链条数
肽链按照一定的方式折叠盘旋形成具有一定空间结构的蛋白质分子。那么自然界多种多样的蛋白质有是怎产生的呢？
三、蛋白质分子结构多样性的原因
教师展示胰岛素分子结构和血红蛋白分子结构分析比蛋白质结构多样性。
师生共同归纳：蛋白质结构多样性的原因：
（1）氨基酸数目不同。 （2）氨基酸排列顺序不同。
（3）多肽链盘曲、折叠方式不同。 （4）形成的空间结构不同。
结构决定功能，因为结构多样性，所以蛋白质的功能叶具有多样性
四、蛋白质的功能（以学生自主探究为主）
指导学生阅读教材，归纳蛋白质的各种功能。
（1）构成细胞和生物体的重要物质（结构蛋白）；
（2）催化作用（酶）；
（3）调节作用（激素蛋白）；
（4）运输作用（载体蛋白）；
（5）免疫作用（抗体）。
进而回归主题，阐明蛋白质是生命活动的主要承担者。
五、板书设计
第2节 生命活动的主要承担者──蛋白质
（一）氨基酸的结构特点
（二）氨基酸是怎样形成蛋白质的
（三）蛋白质的多样性
（四）蛋白质的功能
六 习题巩固
1.组成蛋白质的氨基酸约有20种，人们区别不同种类氨基酸的依据是（ ）
A.肽键位置的不同
B.所含氨基的多少不同
C.所含羧基的数目不同
D.R基团的不同
答案：D
解析：组成蛋白质的氨基酸都有共同的结构特点，即都有 ，种类的不同决定于与碳原子相连的R基团。
2.下面是关于蛋白质的论述，正确的是（ ）
A.每种蛋白质都含有C、H、O、N、P、Fe元素
B.每种蛋白质的分子结构中都含有肽键
C.蛋白质都是酶
D.蛋白质是调节细胞和生物体新陈代谢的唯一物质
答案：B
解析：每种蛋白质都含有C、H、O、N不一定都有P、Fe，有些酶是蛋白质，有些酶是RNA，调节细胞和生物体新陈代谢的物质有的是蛋白质如生长激素，有的是脂质、胆固醇如性激素等。
3.下列哪项不是蛋白质在人体内的生理功能（ ）
A.细胞成分的更新物质 B.酶的主要成分
C.组织修复的原料 D.能量的主要来源
答案：D
解析：人体内的蛋白质具有下列生理功能：细胞内的组成成分；时刻更新代谢的物质；催化作用；运输物质；调节生命活动；免疫作用等。虽然蛋白质中含有能量，但不是主要的供能物质。
4.据图回答下列问题：
氨基酸口服液的出现并也不是什么新鲜事。十多年前，一些健美运动员为了使肌肉显得更发达，在训练时服食用过氨基酸；也有些肥胖病人在节食减肥时，为了在减去体内脂肪的同时保存体内的蛋白质，也曾经服用过氨基酸制剂。近年来，一些销售商为了牟取暴利，媒体也过分渲染氨基酸的功效，使得许多普通消费者也不知不觉地加入到服用氨基酸补充剂的行列中。在使用过程中，不断产生了严重副作用，甚至导致死亡，由此引起了有关部门的高度重视。针对这一情况，美国食品与药品管理局召集了研究机构对氨基酸补充剂进行了专题研究。这项研究表明，如果不是特别的医疗需要，普通人根本没有必要服用氨基酸补充剂！相反，却会发现了氨基酸对健康的副作用和不安全性。
一．造成某些氨基酸缺乏
当食物中的蛋白质进入体内后，消化道、消化腺、还有内分泌激素，甚至大脑，都会产生相应的反应，分泌消化蛋白质酶，并逐步进行消化：先分解为二肽、三肽，再进入小肠细胞内分解为氨基酸，最终转运到血液。这种逐步缓慢消化吸收的方式是一种最理想的方式，决定了哪些氨基酸先进入血液，哪些氨基酸后进入血液，避免了化学结构相似的氨基酸相互竞争进入血液。如果消化道大量出现一种或几种氨基酸，就会造成含量较低的氨基酸无法吸收，结果造成这种氨基酸缺乏。
二．因产生惰性而造成消化道衰老
氨基酸口服液代替食物蛋白质，这看似省事，其实是不能省的事。如果消化道长期不接受蛋白质的刺激，就会渐渐地失去产生和分泌蛋白质酶的功能，造成食物蛋白质消化吸收功能的减退，严重时导致整个消化道的衰老、退化。
三．无形中增加了肝脏和肾脏的负担
一旦人体摄入多余氨基酸，或者被肝脏代谢作为热量燃烧，或者被作为脂肪贮存，造成肥胖。可以说，擅自额外添加某种氨基酸，完全是画蛇添足，造成浪费。更为严重的是，在氨基酸代谢和代谢产物排泄时，还会增加肝脏和肾脏的负担。成年人，身体健康，也许感觉不到。而对肝肾功能发育不全的婴幼儿、儿童和肝肾功能衰退的老年人，就会产生严重后果。
美国食品与药品管理局将下列人群定为易受额外补充氨基酸伤害者：高龄妇女、孕妇、乳母、婴儿、儿童、青少年、老年人、先天性氨基酸代谢障碍患者、吸烟者、低蛋白饮食者等。
赖氨酸事件
在上世纪80年代后期，在某些大城市出现以青少年、儿童为主的肝功能受损患者，调查发现是服用了过多的赖氨酸。原来，当时食物短缺，人们以粮食为主，不能从动物性食物中获得优质蛋白质。一些家长擅自去药店买来了粮食中缺乏的赖氨酸给孩子当补品，因使用剂量过高，远远超出粮食中缺乏的量，反而造成了孩子的肝脏损伤。
人体从食物中获得蛋白质的目的，是将食物蛋白质消化为氨基酸后，吸收进入人体重新进行自身组织蛋白质的合成。人体在合成自身组织的蛋白质时，对氨基酸的种类、含量，特别是各种氨基酸相互的比例或构成比有一定的要求，符合这种要求时，蛋白质的合成才能顺利进行。当某种氨基酸缺乏或过高时，都对蛋白质合成不利。在生活中，如果能做到平衡膳食，选择营养价值高的食物蛋白质，如畜、禽、水产等动物的肌肉、内脏，就足以获得人体所需要的氨基酸。如果消化功能也完全正常，则足以完成食物蛋白质的消化吸收。何必要舍弃享受美味食物的乐趣呢？
友情提醒：
关键词：植物营养剂；柑橘内生枯草芽孢杆菌YS45；必需氨基酸；有机硒
中图分类号：S511.3+1；S145.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）12-2798-02
Influence of Fermented Liquid of Citrus reticulata Endophytic Bacillus subtilis YS45 on Quality of Brown Rice
ZHANG Zhi-yuan1，GUO Qing-quan1，LUO Yong-lan1，YOU Yong2，ZOU Chao-hui3，DENG Fu-liang4，DENG Shi-lin4
（1.Department of Biological Engineering and Environmental Science，Changsha University，Changsha 410022，China； 2.Changsha Jianxibao Biological Technologe Limited Company，Changsha 410022，China； 3.Research Institute of Nuclear Farming and Space Breeding， Changsha 410125，China； 4.Modern Analysis Center of Xiangya Medical School， Central South University， Changsha 410078，China）
Abstract： The influence of fermented liquid of Citrus reticulata Endophytic Bacillus subtilis YS45 on the content of organic selenium and amino acids of brown rice were studied by field experiment and instrumental analysis method. The results showed that 2% of fermented liquid could increase the content of selenium and amino acids of brown rice significantly.
Key words： plant nutrients； Citrus reticulata endophytic Bacillus subtilis YS45； amino acids； organic selenium
硒是一种人体必需的微量元素之一，被科学家称为 “生命火种”、“视力保护神”和“抗癌之王”，具有令人瞩目的防治疾病作用[1]；而补硒最好采用有机硒，因其经生物转换而得，有利于人体吸收利用，且生物活性强，安全无副作用[2]，因此寻找提高农作物有机硒源的营养剂就显得尤为重要。必需氨基酸是人体自身不能合成或合成的速度不能满足机体需要，必须从食物中获得的一类氨基酸，是食物蛋白营养价值的关键成分。必需氨基酸对人的生长发育和养生保健具有不可替代的作用，幼儿期每日需要量714 mg/（kg体重）；儿童期352 mg/（kg体重）；成年人84 mg/（kg体重）[3]。大豆蛋白是一种优质蛋白，必需氨基酸的含量为12 754 mg/（100 g），比稻米的必需氨基酸含量高416%。豆粕是制油工业的副产品，其必需氨基酸的含量为11 962 mg/（100 g），比稻米的必需氨基酸含量高384%[4]。利用豆粕发酵产生氨基酸，成本低廉。而人们摄取必需氨基酸的主要途径是动物蛋白和植物蛋白，但过分依赖肉食品会带来高血压、高血脂、冠心病等伴随性疾病。因此改变植物蛋白的构成成分，提高必需氨基酸的含量，就显得尤为重要。世界人口50%以上以大米为主食，因此，将豆粕必需氨基酸转移入稻米，提高稻米必需氨基酸的含量，对改变人们的膳食结构，强化人体营养与保健具有重要意义。试验所采用的植物营养剂为柑橘内生枯草芽孢杆菌（Bacilluss subtilis）YS45发酵豆粕所得到的发酵浓缩液，用其对水稻进行喷施处理，研究其对糙米中有机硒和必需氨基酸含量的影响，以期改善稻米品质。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验是在湖南省益阳市赫山区南溪金丰水稻种植专业合作社进行。供试水稻品种为湘早籼45。供试肥料为植物营养剂（长沙学院研制，专利号：201110103910.9）、葛林美腐植酸液肥（苏州葛林美农业科技有限公司）、神奇120（山东潍坊鑫亚农化有限公司产品）
1.2 试验设计
试验按随机区组设计，试验共设5个处理，4次重复，共20个试验小区。每小区面积为66.7 m2。
处理1：0.3%葛林美腐植酸液肥；
处理2：0.3%植物营养剂；
处理3：2%植物营养剂；
处理4：0.3%神奇120；
处理5：常规对照（清水）。
前期田间管理同常规管理，剑叶抽出时施第一次肥，待出穗30%～50%时施第二次肥，齐穗时施第三次肥，连施3次肥。施肥采用叶面喷雾法。每次用量为6 kg/（66.7 m2）。
1.3 收获与测定
水稻成熟后人工收割、晒干、除杂，用砻谷机（广州）砻成糙米，送样到中南大学湘雅医学院现代分析检测中心检测。分别采用高效液相色谱（HPLC）和原子吸收光谱法测定氨基酸和硒元素含量。
2 结果与分析
2.1 植物营养剂对糙米中硒元素含量的影响
表1结果表明，2.0%植物营养剂处理有机硒含量显著高于常规对照，比常规对照提高了196.3%。
2.2 植物营养剂对糙米中氨基酸含量的影响
从表2可以看出，2.0%植物营养剂对每种氨基酸的增加程度均最大。2.0%的植物营养剂处理使糙米中蛋氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸7种人体必需氨基酸的含量比对照分别提高4.72%、5.19%、5.66%、5.66%、5.41%、6.16%、5.33%，相应地提高了糙米蛋白质中人体必需氨基酸的比例，更适合人体营养需要。
3 讨论
豆粕是制油工业的副产品，其必需氨基酸含量和比例与动物蛋白相似。通过柑橘内生枯草芽孢杆菌YS45发酵降解豆粕蛋白，产生必需氨基酸，将这些必需氨基酸喷施在水稻上，提高稻米蛋白质的必需氨基酸含量和构成比例，从而提高稻米的营养保健价值。研究的意义在于将大豆的优质蛋白的关键成分——人体必需氨基酸，尤其是赖氨酸转入水稻。
硒被人们称为“生命元素”。硒作为一种人体必需的微量元素。它的存在与含量、吸收与排泄以及其重要的生理生化功能与人体健康有密切关系，大量的研究证实了硒能抑制多种癌症的发生发展，从而体现了硒在防癌方面的重要地位和作用。此外，硒还有促进生长、维护心血管和心肌收缩力、维持正常的视觉功能。近年来的研究还表明，硒在参与机体免疫功能的维持，特别是在维持巨噬细胞和中性粒细胞的功能方面，起了相当重要的作用；还可刺激抗体的产生，增强细胞免疫功能，增强机体对疾病的抵抗力[5]。因此人体适当补充硒是有百益而无害的。但此次试验中，发酵底物中添加的硒粉量稍稍多了一点，致使糙米中的硒含量达324.2 μg/kg，国家卫生限量标准规定谷物中硒元素含量最高为300.00 μg/kg，测试的此批糙米中硒含量略为超标。
植物营养剂处理糙米中含有丰富的必需氨基酸，提高了稻米的营养保健价值。但由于糙米的适口性比较差，因此，可以用糙米煮稀饭，或将其加工成糙米羹食用。
研究结果证明，含豆粕氨基酸的植物营养剂能显著提高糙米蛋白的必需氨基酸含量，同样也能提高精米蛋白质的必需氨基酸含量，关于豆粕氨基酸与精米必需氨基酸的关系有待进一步研究。
参考文献：
[1] 王永辉，崔诼英，苏 焱.喷施有机硒肥对平菇栽培特性的影响研究[J].农业科技与装备，2011（6）：11-13.
[2] 卢 岚，鲁 兵，王春娥.保健食品中有机硒和无机硒的分析探讨[J].中国卫生检验杂志，2010（4）：767-768.
[3] 王光慈.食品营养学[M].北京.中国农业出版社，2001.
关键词 氨基酸 小根蒜
小根蒜，为百合科植物Allium macrostemon Bunge的干燥块茎。是中、蒙、藏医常用药材，具有理气宽胸，通阳散结之功效。主治胸痹心痛彻背，胸腕痞闷，咳嗽痰多，腕腹疼痛，泄痢后重，白带，痈肿［1］。为了更好地综合开发利用小根蒜资源及其药用价值，特对其作了氨基酸成分进行了分析鉴定。
1 材料与方法
1．1 实验材料
生药样品由内蒙古民族大学蒙医药学院提供，经鉴定为百合科植物Allium macrostemon Bunge的干燥块茎。
1．2 仪器及检测条件
仪器: 日立835-50型氨基酸自动分析仪；测定条件：分离柱：4 mmID×150mm，离子交换树脂：2619．# ，除氨柱：4 mmID×50mm，柱温：57℃，茚三酮流速：0．3ml/min，缓冲液（用柠檬酸、柠檬酸钠、氯化钠配成PH为:3．4的缓冲溶液）流速:0．225ml/min，波长:570nm。
1．3 样品的制备
标准称取样品34．0mg,加入6M盐酸15ml,抽真空封口。在±110℃条件下水解22-24小时。过滤,定容50ml。取1ml滤液在小于40℃条件下减压蒸干。用0．02M盐酸定容1ml。得待测液上机分析(仪器自动取50微升分析)。
2 测定结果
取待测液上机测定，鉴定出17种氨基酸，其吸收图谱见图1。7种人体必须氨基酸结果见表1。
3 讨论
小根蒜中含有17种氨基酸。其中天门冬氨酸、丙氨酸、、缬氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸、脯氨酸含量较高，占氨基酸总量的83．52%。可作为小根蒜中全部氨基酸含量特性的代表。谷氨酸可促进人体内消化液的分泌，具有预防贫血及解毒作用；精氨酸可控制体内细胞的退化；胱氨酸是毛发的成分，具有促进毛发生长和防止皮肤老化作用，也可用于抗过敏、肝炎、白血球减少等症；苏氨酸在人体内有转变氨基酸达到平衡的作用。正确地利用这些氨基酸成分及其特性，是充分发挥小根蒜药用价值的重要因素之一。鉴定出的17种氨基酸，有7种人体必须氨基酸，总量为7．444mg/100mg，占总量的34．18%。
本测定结果所得的资料可供开发利用参考。
参考文献
关键词：补钙 鸡蛋壳 复合氨基酸钙 络合物 钙营养强化剂
钙是人体中最丰富的矿物元素，在机体生长发育过程中起着极其重要的作用。人体自身不能合成矿物质，完全依赖外界的补充和供给，充足的钙摄入在人体一生中起着重要作用。但并非是摄入钙越多越好，陈义风和陈学存曾报道过量的钙反而会造成钙、锌、磷更难吸收。这是因为钙、锌、磷同植酸发生了沉淀效应，使这3种元素同时沉淀下来而不能被吸收。由此可知，把钙、锌、镁等多种金属元素混在一起，认为可以同时被补充，这是非常不科学的，甚至是有害的，补钙应以理论做指导为好。
1.钙在人体中的重要作用及补钙的必要性
人体的钙含量约有1.0~1.2kg左右，约占体重的1.5%~2.0%。其中99%的钙是以羟磷石灰形式存在于骨骼和牙齿中，成为人体的钙库。其余1%的钙主要存在于软组织，细胞外液和血液中，两者保持平衡，共同维持机体的正常运转。当微量钙进入细胞时，就会产生一种极强的信号，可控制其新陈代谢、生长发育、心脏跳动、肌肉收缩、大脑思维等细胞活动。如果人体长期处于缺钙状态，就会导致诱发各种疾病：佝偻病是儿童缺钙的主要症状；成年人缺钙造成骨骼钙减少，血液和细胞内的钙含量增加，导致早衰；孕妇缺钙会引起妊娠高血压综合症（妊高症），同时还会影响胎儿的正常发育；老年人缺钙会引起骨质疏松、骨质增生、易骨折、动脉硬化、高血压和老年痴呆症等。由于我国膳食结构的不合理性，单从自然食物中摄取钙不能达到补钙的目的，通过进食钙营养强化剂是一种较理想的补钙途径。
2.合理选择钙营养强化剂
鉴于缺钙的现实和补钙的必要性，各种钙营养强化剂应运而生。一个良好的钙营养强化剂应具备如下特点：一是要求钙含量高；二是钙的吸收率和生物利用率高；三是安全无毒无副作用不含超标重金属，其水溶液应呈中性。
多年来各国研究人员一直在探求副作用小，生物利用率高的钙营养强化剂，国内已有少数单位研究了复合氨基酸微量元素络合物，被用作饲料添加剂，在动物饲料中收到较好的效果。据报道，微量元素与氨基酸形成二肽形式的络合物可通过小肠吸收途径被直接吸收，而不必走主动吸收途径，因而吸收率大大提高。复合氨基酸钙是一种络合物，其配位体是蛋白质水解液中的氨基酸，二肽或其它小肽。由于氨基酸络合物为体内生化的中间产物，因此具有副作用小，吸收率高的特点，容易被人体吸收，并且在补充微量元素的同时又可补充人体必需的氨基酸，是一种较理想的食品营养强化剂。
3.复合氨基酸钙营养强化剂
3.1复合氨基酸钙的作用
复合氨基酸钙是复合氨基酸通过配位键与钙离子形成的螯合物，能在酸性胃液及碱性肠液中稳定溶解而不产生沉淀，以分子形式被动扩散进入血浆，使血钙有充足时间与骨钙等进行新陈代谢，最终达到高生物利用度和好的补钙效果。
螯合型氨基酸钙盐的生成是酸与碱反应的结果。当生成以后螯合物与少量游离钙离子在溶液中处于平衡状态。此时游离钙离子浓度达最小值，而螯合型钙得到了保护，这种作用实质上是一种掩蔽作用。掩蔽作用是使金属离子失去其化学作用，不受外界影响，例如：当螯合型氨基酸钙进入胃，遇到胃酸或其它反应物时，在一定程度上就得到保护。从钙离子而言，如果体内要保持低浓度的钙离子，那么螯合型氨基酸钙可以起到缓冲作用，使钙离子浓度趋于稳定。
3.2利用蛋壳制备氨基酸钙
制备氨基酸钙可以直接利用动物鲜骨作为原料，也可以利用脱脂豆粕经酶水解制备氨基酸，再与钙源进行螯合制备复合氨基酸络合物。
随着人民生活水平的提高和食品工业的发展，鸡蛋的消耗量大幅度增加。初步估计，一个中等城市每月所扔弃的蛋壳总量达到50~80吨。目前，国内对鸡蛋壳资源的利用率还很低，如能充分利用，不仅可变废为宝为社会增加财富，又可减少对环境的污染。对鸡蛋壳组成成份的分析证明：蛋壳中主要成份为CaCO3还有P、Mg、Fe及微量Si、Al、Ba等元素，另外还有少量有机物。我们可以使用鸡蛋壳来制备氨基酸钙。
将蛋壳经壳膜分离处理后，使之与氨基酸反应制备氨基酸钙，同时，分离出的壳膜可被用于各种医用材料及食品工业中。采用两次煅烧蛋壳后中和法制备氨基酸钙，最大限度地去除了蛋壳中的其它成分，使产品不受蛋壳色素及有机成分的影响，提高产品的纯度，且蛋壳是生物组织，无毒，以之制备的氨基酸钙安全无毒，可作为许多食品的钙强化剂。
3.3苹果酸――氨基酸钙（CMA）的优良特性
苹果酸――氨基酸钙（Calcium malic―Amino acid，简写成CMA）是苹果酸、氨基酸和钙按一定比例配合成的有机酸复合物，具有高溶解性、高生物学吸收利用性、减少铁吸收阻碍、风味良好且安全无毒的特点。
将CMA与同类产品进行了溶解性对比实验，其结果表明，CMA在同类产品中钙含量适中，而溶解性明显好于其他产品，其溶解度随PH值减小而增大，且在微碱和接近中性的环境下仍具有良好的溶解性，CMA在较宽的PH值范围的高溶解性是与高吸收相关的重要特征，温度对其溶解性影响很小，室温下的溶解度略高，故CMA作为钙营养强化剂比较适用。
CMA是安全性很高的一般食品原料钙，在美国属安全原料（CRAS），可应用于各类食品中，已进行小鼠急性毒性和大鼠90d喂养实验，实验结果证明CMA无毒。
4.复合氨基酸钙营养强化剂的发展前景
我国现有钙剂市场是以碳酸钙占主导地位。碳酸钙作为补钙制剂和钙强化剂，存在着一些难以克服的缺陷，如溶解度低、干扰铁、锌、镁等无机离子的吸收等。复合氨基酸钙营养独到的性能及良好的补钙效果，其开发利用将适合我国不同人群的补钙需要，尤其适合老年人和儿童等重点补钙人群，其发展前景极其广阔。
参考文献：
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[6]王朝旭，赵丹，王小雯．酶法水解胃蛋白最佳条件的研究．食品科学，2001，22（2）：48－49．
随着对自然奥秘的不断揭示，人类不断接近生命的本质。生物化学技术的进步逐渐将主宰生命历程的权杖交到了人类的手中。如果一切可以重新来过，我们会更加珍视那次新生。现在人类的肌肤有机会了！
1993年业界学者在对促进伤口愈合因素（如烧伤治疗）的研究中提出，氨基酸肽可以在培养液中激发胶原蛋白和纤维原细胞中的纤维蛋白的合成；而另一项为探测氨基酸肽功能机理而进行的DNA排序研究更显示出氨基酸肽可以有效地整修那些参与伤口愈合和外层细胞结构修复的基因。因此可以说存在于胶原蛋白的5分子氨基酸肽链是启动胶原蛋白合成的开关。
氨基酸肽是胶原蛋白中的5个氨基酸肽片段，它是胶原蛋白合成的启动器。数据显示，当这一组肽链加入皮肤细胞时，真皮层与细胞修复有关的蛋白开始合成，胶原蛋白和纤维蛋白均有可观的增加。氨基酸肽启动胶原蛋白产生而更新皮肤的最小的肽链，可以称之为“信使”。皮肤随着肽的介入而产生的自然反应与美容手术后皮肤产生的反应十分类似。对这种类型的肽从细胞开始自然启动皮肤更新的发现和应用是一项重大的科技突破。
随着玉兰油品牌（OLAY）在这一领域的进一步研究，护肤理念再次奇迹般地越升到细胞护理的层面。玉兰油与美国斯坦福大学的专家成功地将 氨基酸肽与多种维他命和抗炎症成分相结合，开发出能够作用于细胞的皮肤新生技术――氨基酸肽复合系统。在2002年世界美容皮肤学大会上，玉兰油有关氨基酸肽功效的临床实验结果获得发表并得到广泛认可。
氨基酸肽堪称当今护肤产品所使用的最昂贵的成分之一，其价值相当于黄金的2倍。氨基酸肽不仅能在皮肤细胞新结构合成过程中起到“开关”的作用，有效起动细胞自身的“修复、新生”功能；而且与脂分子结合的氨基酸肽具有独特的“亲脂性”特质，还能够完整穿透上皮细胞而不至于损伤皮肤的屏障功能。实验证明，氨基酸肽与国际公认最有效的抗老化成分维他命A相比有效性相当，而用量只需维他命A的百分之一。
玉兰油独有的氨基酸肽复合系统含氨基酸肽和多种抗老化成分，包括维他命B3、维他命原B5、维他命E、绿茶萃取精华和尿囊素六大成分。如此强大的抗老化成分组合能够促进皮肤表皮细胞更新并加强皮肤保湿屏障，从而令皮肤外观、感觉和功能都宛如新生。
爱德曼国际公关公司供稿
关键词：桃仁；山桃仁；氨基酸；蛋白质
中图分类号：R284.1
文献标识码：A
文章编号：1007－2349(2010)06－0063－02
桃仁来源于蔷薇科(Rosaceae)植物桃Prunuspersica(L)Batsch，或山桃Prunusdaridiana(Carr，)Franch，的干燥成熟种子。性味苦、甘，平，具有活血化瘀、润肠通便的功效。用于经闭，痛经，瘕痞块，跌扑损伤，肠燥便秘。在血府逐瘀汤(《医林改错》)、生化汤(《傅青主女科》)、桂枝茯苓丸(《金匮要略》)、桃核承气汤(《伤寒论》)等医家名方中均重用桃仁，现代研究亦表明桃仁对心脑血管疾病疗效显著，近年来受到广泛关注。
桃仁药材中主要含油脂和蛋白质。氨基酸的种类和质量分数，决定着蛋白质品质的高低，而且植物蛋白具有一定的生理活性。为了进一步研究桃仁的化学成分，进行了桃仁蛋白质氨基酸分析，明确氨基酸的种类、质量分数。为桃仁的进一步开发研究提供思路和依据。
1 实验材料
1，1 供试材料 桃仁，2007年8月自采于陕西南泥湾和陕西咸阳，经万德光教授鉴定，分别为蔷薇科(Rosaceae)植物桃Prunuspersica(L)Batsch、山桃Prunusdavidiana(Carr，)Franch，的干燥成熟种子。
1，2 试剂 酸解剂：盐酸溶液，C(HCI)=6.0mol／L，优级纯盐酸与去离子水等体积混合；稀释上机用盐酸缓冲液，C(HCI)=0.02mol／L；不同pH值和离子强度的洗脱用缓冲溶液，按仪器说明书配制。茚三酮溶液：按仪器说明书配制；NaOH溶液：C(NaOH)=6.0mol／L。17种氨基酸标准品：除脯氨酸为200μmol／L外，其余均为100μmol／L。
1，3 仪器及设备 实验室用样品粉碎机；分析天平；酒精喷灯；恒温箱；仪器和设备：日立835－50型氨基酸自动分析仪。真空泵。
2 实验方法
2，1 仪器测试条件 离子交换柱：柱长2.5×150mm；树脂2619#；柱温53℃；缓冲液：流速0.25mL・min；柱压80～120kg／cm2；茚三酮：流速0.3mL・min；柱压20～35kg／cm2。
2，2 样品的制备 称样：准确称取一定量的样品，精确到0.0001g，称样量在10～20mg之内，称好的样品放于水解管内。水解：在水解管内加6.0mol・L盐酸15.00mL，再加入巯基乙1.00mL(起保护作用)，盖上胶塞，用真空泵抽至真空，接进Opsi，将此水解管封口并放在110±1℃的恒温干燥箱内保温24h后，取出冷却。打开水解管，将水解液过滤并冲洗定容50.00mL容量瓶。吸取滤液1.00mL于25mL烧杯内，在水浴上蒸干，残留物用1～2mL水溶解再蒸干，反复蒸干3次，最后残留物用0.02mol・L的盐酸1.00mL溶解上机测定。
2，3 测定 用相应的混合氨基酸标准工作液按仪器说明书，调整仪器操作参数和洗脱用缓冲液的pH值，使各氨基酸分辨率≥85％，自动进样20μL制备好的试样水解液分析测定(氨基酸自动分析仪测定流速：缓冲溶液为0.40mL／min，茚三酮溶液0.35mL／min)。
2，4 结果计算 以峰面积测定结果，用外标法计算各氨基酸含量。
2，5 测定标准 氨基酸测定标准：GB／T5009，124－2003。
3 结果与讨论
氨基酸在消化道和组织细胞都有形成，人体从食物摄取氨基酸.蛋白经多种蛋白酶的催化分解成能被人体吸收的小分子氨基酸，然后运往组织合成能够自身所需的蛋白质。
氨基酸是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物。氨基连在α-碳上的为α-氨基酸。组成蛋白质的氨基酸大部分为α-氨基酸。氨基酸在人体内通过代谢可以发挥下列一些作用：①合成组织蛋白质；②变成酸、激素、抗体、肌酸等含氨物质；③转变为碳水化合物和脂肪；④氧化成二氧化碳和水及尿素，产生能量。
（来源：文章屋网 ）
[关键词] 益气活血中药;脑缺血-再灌注;氨基酸含量
[中图分类号] R285.5[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)08(a)-030-03
The effect of Yiqihuoxue Chinese Herbal Medicine on amino acid contents in brain tissue of rats after cerebral ischemia-reperfusion
ZHANG Xinchun1, LU Guangyao1, QIN Xiude2
(1.Department of Neurology, Guangdong Provincial Hospital of TCM, Guangzhou 510120, China; 2.Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405, China)
[Abstract] Objective: To discuss the protective effect and mechanism of Yiqihuoxue Chinese Herbal Medicine (Xiongqi Composition) on amino acid contents in brain tissue of rats after cerebral ischemia-reperfusion. Methods: 30 rats were randomly divided into three groups: sham-operated group, model group and Xiongqi Composition treatment group. The ischemia-reperfusion injury model was established, then the amino acid contents in rat brain tissue of ischemia-reperfusion were determined. Results: Xiongqi Composition treatment group showed significant difference in the contents of excitatory amino acids Glu and Asp in the brain tissues after ischemia-reperfusion compared with the model group, but it showed no significant difference compared with the sham-operated group, suggesting Xiongqi Composition could inhibit the increase of excitatory amino acids Glu and Asp contents of ischemia side brain tissue induced by ischemia-reperfusion in rats, and could cause them tend to normal. Xiongqi Composition treatment group showed significant difference in inhibitory amino acides Gln and GABA in brain tissues after ischemia-reperfusion compared with model group and sham-operated group, suggesting Xiongqi Composition could also increase the contents of inhibitory amino acids Gln and GABA in brain tissues after ischemia-reperfusion. Conclusion: Xiongqi Composition can reduce cerebral ischemia-reperfusion injury by adjusting the contents of excitatory amino acids and inhibitory amino acids.
[Key words] Yiqihuoxue Chinese Herbal Medicine; Cerebral ischemia-reperfusion; Amino acid contents
大量动物实验研究表明,脑缺血及再灌注期间发生着复杂的病理生理变化:一方面,脑缺血后再灌注可挽救濒临梗死的细胞;另一方面则会形成再灌注损伤,从而加重细胞损伤,导致细胞死亡。兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸是参与中枢神经系统兴奋与抑制调节作用的重要神经递质,在脑缺血损伤的病理生理过程中起着重要的作用。祖国医学采用益气活血中药治疗缺血性脑卒中具有肯定的临床疗效,但作用机制尚未完全阐明。本实验应用益气活血中药(芎芪合剂)对脑缺血-再灌注损伤的大鼠模型进行干预,从其对大鼠缺血脑组织中氨基酸含量的影响来探讨该中药对脑缺血-再灌注损伤的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
选用SPF级成年雄性SD大鼠30只,体重250～300 g,由广州中医药大学实验动物中心提供。
1.2 主要实验试剂和仪器
氨基酸对照品、衍生试剂由Sigma公司生产;Na2HPO4为分析纯级,甲醇、乙腈为色谱纯级,由上海化学试剂公司生产。
1.3 芎芪合剂的制备
10 ml/支,呈棕黄色,澄清透明,黄芪总皂苷1.00 g、芍药总苷0.90 g、磷酸川芎嗪0.10 g溶于9 ml注射用水,以1% NaOH调节pH至8,定容至10 ml,作为浓缩药液,相当于生药:蒙古黄芪50 g、赤芍30 g、川芎10 g,由广东省中医院制剂室提供。
1.4 大鼠脑缺血-再灌注模型的制作
参照Koizumi[1]方法制成大鼠大脑中动脉缺血-再灌注模型。取1号尼龙钓鱼线,截取为长约5 cm的小段,用酒精灯将其头端烫成球形,在所需长度处做标记,将此线浸泡消毒,然后将栓线头端浸入0.1%多聚赖氨酸溶液中过夜,60℃烤箱中1 h后取出,浸入1.25万U/ml肝素盐水中备用。将大鼠称重后,以10%水合氯醛400 mg/kg腹腔注射麻醉,仰卧固定于手术台上,常规消毒,取颈前正中切口,钝性分离右侧胸锁乳突肌与胸骨锁骨肌,分离右侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)及颈内动脉(ICA),避免损伤迷走神经。分离颈内动脉至颅底,结扎颈内动脉颅外段的唯一分支翼腭动脉(PPA),再结扎颈总动脉近心端,于颈总动脉分叉处结扎颈外动脉,以微动脉夹夹闭颈内动脉。在右侧颈总动脉接近分叉处剪一小口插入鱼线并用手术线轻度结扎,松开微动脉夹,轻推鱼线,沿颈总动脉入颈内动脉至有阻力时止,系紧结扎线,鱼线尾端露于体外。从颈总动脉分叉处算起进线17～18 mm,此时鱼线头端入大脑前动脉,其体部阻挡住大脑中动脉入口,形成大脑中动脉供血中断。大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)后2 h拔出栓线约10 mm,此时形成再灌注,供血从大脑前、后动脉流入大脑中动脉。术中及清醒前均给予头灯(100 W)照射,保持肛温36.5～37.5℃,室温25℃。假手术除不插入尼龙线外,其余手术步骤均与缺血-再灌注各组相同。
1.5 模型纳入标准
术后2 h观察大鼠的症状和体征,参照Longa等[2]评定神经功能缺损程度的5级4分法标准:0分,无神经功能缺损症状;1分,轻微神经功能缺损,不能完全伸展左侧前爪;2分,中度局灶性神经功能缺损,向左侧转圈;3分,重度局灶性神经功能缺损,向左侧倾倒;4分,不能自发行走,意识水平下降。其中,0分及4分者被剔除。评分1～3分为造模成功,纳入实验。假手术组可出现同侧Horner征,但无左侧肢体瘫痪。
1.6 动物分组及给药方法
选雄性SD大鼠30只,用随机数字表法随机分成3组,每组10只:假手术组,模型组,芎芪合剂治疗组。
栓塞后1.5 h各组给药方法如下:①假手术组、模型组腹腔注射生理盐水2 ml/200 g;②芎芪合剂治疗组腹腔注射中药稀释液2 ml/200 g,为临床用量的10倍(以临床用量200 mg/70 kg计)。栓塞后2 h拔出线栓形成再灌注。芎芪合剂治疗组再灌注12 h后腹腔注射芎芪合剂稀释液2 ml/200 g,假手术组、模型组再灌注12 h后腹腔注射生理盐水2 ml/200 g。
1.7 氨基酸检测
1.7.1 色谱条件Hypersil ODS色谱柱,4.0 mm×125 mm,粒径5 μm;流动相(A):10 mmol/L Na2HPO4 pH 7.2缓冲液(PB);流动相(B):PB-甲醇-乙腈(50∶35∶15)。线性梯度:在0～25 min内,流动相B以线性从0上升到100%。流量:1.0 ml/min。柱温40℃。检测波长:激发波长340 nm,发射波长450 nm。
1.7.2 标准溶液准确称量氨基酸对照品后,用0.1 mol/L HCl溶液溶解并稀释配成含每种氨基酸20、50、100、150、200、250、300 nmol/ml的系列混合标准溶液。
1.7.3 样品处理在缺血2 h再灌注24 h评分后,各组大鼠断头取脑,完整剥取脑组织,用冷生理盐水将表面的血液冲洗干净,去除嗅球、小脑和低位脑干,取右侧(缺血侧)脑组织,精确称取100 mg置匀浆器中,加适量90%乙醇溶液匀浆3 min,倒入离心管,1 000 r/min离心10 min,取上清液,将残留物重复匀浆2次,合并上清液。将上清液在80℃水浴中蒸干,用0.1 mol/L HCl定容至5 ml。1 000 r/min离心10 min,上清液经0.45 μm滤膜过滤,待测。采用HP1050型高效液相色谱仪检测氨基酸:谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酰胺(Gln)、γ-氨基丁酸(GABA),结果以mg/g湿脑组织表示。
1.8 统计学处理
数据用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS 13.0统计软件对各组数据进行单因素方差分析(one-way ANOVA),然后用post hoc检验中的LSD法(方差齐时)或Dunnett's T3(方差不齐时)做多个均数间的两两比较。检验水准α=0.05,双侧检验。
2 结果
2.1 芎芪合剂对脑缺血-再灌注后大鼠脑组织中兴奋性氨基酸(Glu、Asp)含量的影响
见表1。
表1芎芪合剂对模型大鼠缺血2 h再灌注24 h后
Glu、Asp含量的影响(x±s)
与假手术组比较,*P
表1结果提示:①模型组与假手术组比较,差异有统计学意义(P
2.2 芎芪合剂对脑缺血-再灌注后大鼠脑组织中抑制性氨基酸(Gln、GABA)含量的影响
见表2。
表2芎芪合剂对模型大鼠缺血2 h再灌注24 h后
Gln、GABA含量的影响(x±s)
与假手术组比较,*P
表2结果提示:①模型组与假手术组比较,差异有统计学意义(P
3讨论
脑缺血及再灌注时,由于各类氨基酸大量释放,兴奋性氨基酸(excitatory amino acids,EAA)与抑制性氨基酸(inhibitory amino acids,IAA)间的平衡被破坏,是导致神经元急性和迟发性“兴奋毒”损伤的关键因素[3]。
EAA主要包括Glu、Asp、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)等,是中枢神经系统的主要兴奋性神经递质,生理情况下在神经元之间的信息传递中发挥重要作用,脑缺血时则对缺血脑细胞具有兴奋毒性,是缺血-再灌注损伤的重要环节,在神经元缺血性损伤中起重要作用[4-5]。其中Glu、Asp是脑内含量最丰富的EAA,它们造成神经毒性作用主要有2个过程[6]:一是作用于非NMDA受体,引起Na+、Cl-、H2O等的内流,造成以神经元急性水肿为特征的急性损伤过程,此过程在刺激因素去除后可以恢复;二是通过兴奋NMDA受体,直接或间接启动电压依赖性通道,Ca2+大量内流,造成迟发性的神经元变性及坏死的迟发过程,该过程为不可逆。
IAA与脑缺血-再灌注损伤同样密切相关,主要包括GABA、Gln等,其中GABA是哺乳类动物中枢神经系统中的一种抑制性氨基酸递质,与受体结合后使神经元产生突触前或突触后的抑制[7]。GABA的升高可能对缺血性脑损伤具有保护作用。GABA受体激动时,氯离子通道开放,使膜电位稳定在氯离子静息电位水平,起到突触后抑制的作用。另外,GABA受体激动,可引起突触前抑制,减少Glu的释放。动物实验也证明,提高脑内的GABA浓度可增强神经元对缺血的耐受性[7-8]。Gln是体内含量最丰富的非必需氨基酸,是合成体内极其重要的抗氧化剂――还原型谷胱甘肽(GSH)的前体物质[9],而GSH能降低组织中的氧自由基水平,是机体保护酶和其他蛋白质巯基、对抗氧自由基损害的一种重要的抗氧化剂[10]。此外,Gln可降低大鼠细胞间黏附分子(ICAM-1)的表达,从而抑制多形核粒细胞(PMNs)在血管内皮的黏附与聚集。因此,Gln通过以上机制对脑缺血-再灌注损伤可能具有一定的保护作用。
综上所述,在缺血性脑损伤过程中,兴奋性氨基酸(Glu、Asp)的升高可以造成神经毒性作用,是导致再灌注损伤的重要原因之一;而抑制性氨基酸(GABA、Gln)含量增加则可能是机体应激保护性的反应,在一定程度上是机体自我修复能力的表现。
在临床上,益气活血法是治疗缺血性脑卒中的常见方法,本研究选择常用益气活血中药(黄芪、赤芍、川芎)的有效部位组成芎芪合剂对大鼠脑缺血-再灌注损伤进行干预,试图探讨其对于脑缺血-再灌注损伤的保护机制。实验结果显示,大鼠脑缺血2 h再灌注24 h后,芎芪合剂能降低大鼠缺血侧脑组织中兴奋性氨基酸Glu、Asp的含量,并使之趋向于正常;同时,芎芪合剂亦能提高大鼠缺血侧脑组织中抑制性氨基酸Gln、GABA的含量,提示芎芪合剂能够通过调整大鼠缺血脑组织中兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的含量,减轻兴奋毒性,提高组织自我修复能力,从而达到抗缺血-再灌注损伤的作用。
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1、材料和方法
1.1 供试肥料
氨基酸叶面肥，其养分含量为：氨基酸8％，微量元素2％。北京鑫时洋科贸有限公司提供；
磷酸二氢钾和复混肥，化肥公司提供。
1.2 试验基本情况
试验地点在怀柔区杨宋镇四季屯村，土壤类型属于轻壤土，中等肥力，其养分化验的结果见表1。
1.3 试验设计
本试验采用3个处理，3次重复，随机排列，面积为6.6m2。
处理1：常规施肥(每667m2用复混肥20kg)+喷清水；
处理2：常规施肥(每667m2用复混肥20kg)+喷施氨基酸叶面肥；
处理3：常规施肥(每667m2用复混肥20kg)+喷施磷酸二氢钾。
本试验代表作物为西洋参，于2005年安排在怀柔四季屯村。3月18日施底肥，每667m2施复混肥20kg，4月2日移栽，在结果期的6月16日，7月1日，7月16日分别喷施各处理所用肥料，按设计方案进行。除施肥以外，田间管理相同。11月4日收获，按处理小区单打单收，然后折算成667m2产量。
2、结果与分析
2.1 施叶面肥对西洋参产量的影响
从表2得知喷施氨基酸叶面肥的处理比喷清水对照667m2增产18.8kg，增产率11.3％，经方差分析达到显著水平，但未达极显著水平。磷酸二氢钾处理比对照667m2增产8.1kg，增产率4.9％，经方差分析未达到显著水平。
2.2 不同处理对西洋参产值的影响
从表3可看出，每667m2喷施氨基酸叶面肥比对照多增加产值443.4元，喷施磷酸二氢钾肥比对照每66m2增加产值213.8元，喷施以上肥料的处理比对照均有增加产值的效果。
3、结论
3.1 喷施氨基酸叶面肥和喷施磷酸二氢钾对西洋参都有一定增产效果，氨基酸叶面肥比对照增产11.3％，经方差分析达到显著水平，磷酸二氢钾比对照增产4.9％，方差分析未达到显著水平，喷氨基酸叶面肥和喷磷酸二氢钾差异显著，本试验可知喷氨基酸叶面肥比喷磷酸二氢钾效果好。
