时间：2023-05-29 18:25:18
开篇：写作不仅是一种记录，更是一种创造，它让我们能够捕捉那些稍纵即逝的灵感，将它们永久地定格在纸上。下面是小编精心整理的12篇蜂胶的作用，希望这些内容能成为您创作过程中的良师益友，陪伴您不断探索和进步。
1、蜂胶与普通牙膏相比更具有保健牙齿的功效。里面含有的蜂胶成分含有一定的药理作用。还能够滋养牙龈，预防牙龈炎症的发生。
2、蜂胶牙膏具有很强的过敏杀菌和清洁牙齿的作用。如果平时刷牙出血可以防治牙龈出血以及牙齿敏感酸痛的情况。
3、对于平时口腔肿痛，以及经常有口腔溃疡的人群也特别适用。可以有效的清洁牙齿使口腔变清新。达到消肿除痛以及预防口腔溃疡的发生。
（来源：文章屋网 ）
【摘要】 目的 探讨蜂胶黄酮对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组及蜂胶黄酮高、中、低三个剂量组，大脑中动脉栓塞(MCAO)制作模型，检测各组大鼠脑组织含水量和脑梗死体积，脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果 与模型组比较，蜂胶黄酮三个剂量组脑含水量明显降低(P
【关键词】 蜂胶黄酮;脑缺血再灌注;自由基
蜂胶乙醇提取物(EEP)可以改善血管的弹性和渗透性，舒张血管、清除血管内壁积存物〔1〕，具有抗氧化、清除自由基和对缺血再灌注损伤保护等作用〔2〕。然而蜂胶黄酮对缺血性脑损伤是否具有保护作用报道极少，本研究复制大鼠缺血再灌注损伤模型，通过脑组织含水量、脑梗死体积和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)和丙二醛(MDA)的测定来探讨蜂胶黄酮防治脑缺血再灌注损伤的机制，为脑缺血防治提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料 SOD、CTA、MDA剂盒均购自南京建成生物制剂研究所，其余试剂均系国产分析纯;蜂胶黄酮由黑龙江中医药大学生物化学教研室提供。SD大鼠，雌雄各半，体重250～300 g，由哈尔滨医科大学动物中心提供。
1.2 实验仪器 紫外可见分光光度计(WF2800D3A，北京第二光学仪器厂)，超声波细胞粉碎机(JY98Ⅲ，宁波科生仪器厂)，高速冷冻离心机(D37520型，德国HERAEUS公司)。
1.3 动物分组 150只大鼠随机分为5组，即假手术组、模型组、蜂胶黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg)，每组30只。除假手术组不插线外，其余4组造模。蜂胶黄酮各剂量组每天灌胃1次，连续10 d。术前1 d再给药1次。
1.4 动物模型 根据Longa等〔3〕的方法制备大鼠缺血再灌注损伤模型。大鼠称重，6%水合氯醛(350 mg/kg)腹腔麻醉，颈部正中切开，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉。结扎颈总动脉近心端、颈外动脉起始端后，在颈总动脉处剪 “V”形口，沿颈总动脉插入直径为0.235 mm的标记鱼线。经颈内动脉向颅内插至大脑中动脉分叉处，插入深度为18～20 mm，将线与颈内动脉一起结扎。术中维持体温。再灌注时外拉线使标记端回至颈外动脉，拔除插线，结扎颈外动脉。假手术组不插线外，其余同前。大脑中动脉栓塞后2 h恢复血供，神经行为学评分参照ZeaLonga 5分制标准〔3〕，术后出现左前肢屈曲，行走时向左侧转圈即视为造模成功，然后保温常规饲养，至24 h断头处死取材。
1.5 脑组织含水量的测定 大鼠造模24 h后断头取脑，称量两侧半脑湿重。再置于烘箱中，100℃烘烤24 h至恒重，称量干重，计算含水量。脑组织含水量=(湿重-干重)/湿重×100%。
1.6 脑梗死体积测定 断头取脑，将大脑作连续2 mm冠状切片，共5片，然后将脑片放入2%TTC磷酸盐缓冲液中37℃恒温孵育30 min，正常脑组织染为红色，梗死灶呈白色。用电子天平称重着色和未着色部分，计算脑片中梗死部分的质量百分比，以此反映梗死体积比。
1.7 脑组织匀浆SOD、CAT活性、MDA含量检测 将大鼠立即断头取脑，切取缺血侧MCA区脑组织0.1 g，用0℃生理盐水制成10%的脑组织匀浆，按SOD、CAT、MDA试剂盒说明书检测脑组织中SOD、CAT、MDA含量。
1.8 统计学处理 所有数据均以x±s表示，应用SPSS11.5版统计学软件进行处理。各组间比较采用单因素方差分析，成组数据比较采用t检验。
2 结 果
2.1 脑组织含水量 左脑组织含水量各组间比较无差异，模型组右脑组织含水量明显高于假手术组(P
2.2 脑梗死体积 模型组脑组织梗死体积大于假手术组(P
2.3 脑组织SOD、CAT活力及MDA含量检测 与假手术组相比，脑缺血再灌注模型组脑组织MDA含量增加(P
3 讨 论
脑组织一定时间缺血后恢复血流供应，功能不但未见改善相反出现缺血性损伤进一步加重的现象称为脑缺血再灌注损伤。脑缺血再灌注后，引起神经细胞的死亡和凋亡，导致脑组织的损伤和功能障碍。脑缺血早期，内皮细胞间隙紧密连接疏松开放，通透性增高，血脑屏障损害，引起脑组织的潴留和脑水肿。本研究结果表明蜂胶黄酮有维护血脑屏障的功能，减轻脑水肿程度，保护脑缺血损伤。局部脑血流降低的程度和缺血持续的时间决定脑缺血损伤的程度。本研究结果发现蜂胶黄酮治疗组梗死区明显小于模型组。
再灌注使损伤加重的主要机制之一是自由基的产生〔4〕。研究表明，在缺血性脑损伤中可产生大量氧自由基(OFR)，而再灌注期间OFR生成加剧〔5〕。OFR损伤细胞内最敏感的靶位就是磷脂膜多价不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化反应，使神经细胞损伤甚至坏死。寻找有效的自由基清除剂，保护缺血半暗带内神经元免受进一步损害及促进病变恢复是实施脑保护治疗、改善缺血性脑损伤预后的重要措施之一〔6〕。脂质过氧化代谢产物MDA的含量可以反应机体受自由基攻击的程度。 SOD是体内主要自由基清除酶，能够有效地清除并终止超氧阴离子引发的连锁反应。CAT 末端氧化酶，其功能是催化细胞内过氧化氢分解，防止膜脂过氧化。MDA显著升高，说明脑组织缺血后氧自由基脂质过氧化反应增强;SOD、CAT下降可能是增强的脂质过氧化反应消耗了过多的抗氧化酶，氧化抗氧化平衡被打破。大量生成的OFR首先破坏脂质生物膜，使细胞膜对钠离子及大分子物质的通透性增加，神经元发生细胞毒性水肿和兴奋性递质的释放;线粒体膜受损，能量代谢障碍，并使其内部的钙离子溢出，同时DNA链断裂，引起染色体的畸变和断裂，以上共同作用最终使神经元死亡。尤其重要的是它可使初始缺血损伤不严重的神经元发生不可逆的坏死，诱导凋亡的发生。本研究表明蜂胶黄酮可以减轻自由基对脑组织的损伤，机制可能与其分子中含有酚羟基有关，该结构可能是清除自由基的结构基础。
总之，蜂胶黄酮可减少脑缺血后脑组织水肿，缩小梗死体积，增加SOD、CAT活性，降低MDA含量，增强对自由基的清除，减轻脂质过氧化反应，保护神经细胞膜的完整性和稳定性。
参考文献
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3 Longa EZ，Weinstein PR，Carlson S，et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats〔J〕.Stroke，1989;20(1)：84.
4 Lewen A，Matz P，Chan PH.Free radical pathways in CNS injury〔J〕.J Neurotrauma，2000;17(10):871.
新闻回顾
近日，有“免疫软黄金”之称的蜂胶被舆论推到了风口浪尖。据中国蜂产品协会公布的数字显示，我国蜂胶每年的产量约300吨，但实际销量却达到了1000吨，这也就是说，市场上售卖的蜂胶有近七成涉嫌造假。
蜂胶小知识
蜂胶是蜜蜂为了修补蜂巢而分泌的黄褐色或黑褐色的粘性物质。
性味归经：性平，味酸、甘，归肝、脾经。
功效：散结止痛、生肌敛疮。内服可补虚弱、化浊脂、止消渴，治疗体虚早衰、高脂血症、糖尿病等；外用能解毒消肿，治疗皮肤皲裂、烧烫伤、鸡眼、胼胝、寻常疣等。
用法用量：内服时，每次取1~2克，制成片剂、胶囊或用酒浸液；外用时，每次取适量，制成酊剂或软膏涂敷。
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修补蜂巢的胶水
蜂胶，其实是蜜蜂从植物芽孢、树皮或者树干上采集的树脂，再在其中混入其上腭分泌物以及部分蜂蜡加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物质。蜜蜂将它当作胶水，用来修补蜂巢的缝隙或孔洞。蜂巢是蜂群生活和繁殖后代的场所，一个小小的蜂巢里可能会住着数万只蜜蜂，而且里面还储藏有大量蜂蜜、蜂王浆等营养丰富、容易滋生细菌的蜂产品，所以蜂巢内必须保持无菌的环境，否则不仅幼虫、幼蜂及蜂后的生存会受到影响，而且还有可能导致蜂产品失去活性或者变质。其次，用来封盖容易腐烂的物质，比如被蜜蜂蜇死的敌害尸体等，以防病菌传染，从而保持蜂巢的清洁无菌。
奇效佳品
蜂胶集植物分泌物与动物分泌物于一体，成分相当复杂。现代研究发现，其主要成分是黄酮类化合物，此外还含有多种酚类、醇类、酸类、脂类化合物，少量的铁、钙、铬、硅、锰、铅、锡、镍、铝、铜、钼、钛、钾、锌等微量元素和维生素A、维生素B、多种氨基酸、酶、阿魏酸等，具有很强的抗菌消炎、增强免疫功效、抗衰老以及降血糖、抗肿瘤、促进组织再生、防止血管系统疾病、治疗胃肠疾病等功效。
1、抗菌消炎 蜂胶中含有大量的黄酮类、萜烯类物质，它们对各种细菌、真菌、病毒等具有显著的抑制和杀灭作用，能够用来治疗脚气、湿疹、各种溃疡、牙周炎、鼻炎、胃炎、泌尿系统感染、痔疮、腹泻等疾病。同时还不会不破坏体内的有益菌落。
2、增强免疫力 蜂胶能够显著提高机体的免疫功能和抗病能力，对预防感冒、衰老以及消除老年斑、色素沉积有很好的疗效。
3、抗衰老 机体的衰老实质是一个“氧化”的过程，机体在进行新陈代谢的同时，会不断产生自由基，而过剩的自由基会作用于血液等脂类物质，或者细胞内的遗传物质DNA，使细胞衰老，甚至癌变或死亡等。而蜂胶中的黄酮类、萜烯类物质具有很强的抗氧化性能，不但能防止细胞氧化，还能显著提高机体内具有清除自由基作用的超氧化物――歧化酶（SOD）的活性。另外，蜂胶中的肉桂酸衍生物和维生素E、C、A以及微量元素硒、锌等也都有一定的抗氧化作用。这些物质相辅相成，共同发挥抗氧化功能，使蜂胶能有效防止细胞老化、减少色素形成、排除体内毒素等，使人身体强健、容颜焕发、青春常驻。
4、降低血糖 首先，蜂胶中的黄酮、萜烯类物质以及微量元素具有明显的降低血糖的作用；其次，蜂胶中的黄酮类物质、多糖物质能够调节机体代谢；再次，在注射胰岛素或服用降糖药后，蜂胶还可以提高药效，从而明显地降低血糖；最后，蜂胶可以减少自由基对细胞的伤害，防止多种并发症。
5、抗肿瘤 蜂胶能够直接抑制、杀灭癌细胞，对肿瘤和息有很好的预防和治疗效果。
6、促进组织再生 蜂胶可以快速止血，加速伤口的愈合，对创伤、烧伤、烫伤等具有明显的治疗作用。
7、防治血管系统疾病 蜂胶中的黄酮类物质，可以活血化瘀、软化血管、阻止血小板凝聚、改善微循环，对血管硬化、梗塞、血栓、高血脂等都有很好的预防和治疗效果。
8、治疗胃肠疾病 蜂胶能够在胃肠粘膜上形成一层酸不能渗透的薄膜。这层薄膜作用于十二肠溃疡，既能杀菌抗炎，又能保护和促进受损组织更新，同时还能促使溃疡部份愈合。
此外，蜂胶还具有明显的安神、消炎、止痛、止痒、麻醉、抗辐射等作用。
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来源不同，功效各异
蜂胶、蜂蜜与蜂王浆的来源各不相同，功效也不大相同。蜂胶的原料是胶源植物的分泌物――树脂类物质，所以蜂胶的主要成分是黄酮类化合物，具有抗菌、消炎、抗氧化、增强免疫力等功效。
蜂蜜的原料源于花源植物的蜜汁或者昆虫分泌的蜜露，所以蜂蜜的主要成分是葡萄糖和果糖。李时珍在《本草纲目》中说：“蜂蜜益气补中，止痛解毒，除百病，和百药，久服强志轻身，不老延年。”
而蜂王浆则是工蜂咽下腺分泌的一种以氨基酸、蛋白质、王浆酸为主要成分的超级营养物质，它主要是由负责抚育幼蜂、照顾蜂王的工蜂通过食用蜂花粉、蜂蜜而进行分泌转换而成。蜂王由于长期食用蜂王浆，寿命可达到5~6年，而蜜蜂的一般寿命只有1~2个月。蜂王浆延年益寿的功效可见一斑。
因此，蜂胶是蜜蜂的药品，而蜂蜜、蜂王浆则是蜜蜂的食物，其中蜂王浆更是蜂王赖以形成和终生的食物。
两招辨真假
真品蜂胶是不透明的胶状固体，呈黄褐色或黑褐色，具有芳香气味，吃起来味道略苦，还带有少许辛辣味；它不溶于水，却能溶于酒精中。真假蜂胶可以用以下几个方法来鉴别：
一尝味道：如果蜂胶味道苦且略带辛辣味，那表明这是真品。如果味道发咸，则可能是加了酱油；如果发甜，则可能是加了蜜或糖，这两种味道的蜂胶都是伪品。
二滴水试真假：在杯子里倒上少许温白开水，把蜂胶液滴在水里。如果蜂胶马上沉到杯底，且不散开，同时水面浮起一层薄薄的白色乳状物，搅动后变成白色混浊状的，说明这是真品；如果搅动后不变色的，那表明是伪品。把水倒掉，如果杯底有蜂胶残留物，用水不易洗掉，用酒一擦就掉的，表明是真品；如果杯底没有残留物的，则为伪品。
服食有计较
蜂胶是一种天然的抗生素，它是保健品不是药品，所以大家可以放心食用。平时，我们常见的吃法有这么几种：
1、对于湿性的蜂胶，比如蜂胶液，可以滴在馒头等主食上，与主食一起吃。
2、对于胶囊的蜂胶，比如蜂胶软胶囊，最好早晚空腹各吃一粒（或两粒），用温水送下。这是因为早餐前半个小时空腹服用蜂胶，可以迅速调动免疫系统功能，清除昨晚积蓄的毒素；晚上睡觉之前服用蜂胶，可以清除白天身体受到的污染。
3、如果想要改善蜂胶的口味，可以把蜂胶加在牛奶、咖啡、蜂蜜等饮品中一同服用。这样既能改善口味，又能避免蜂胶的粘壁现象。
4、服用蜂胶如果想要达到最佳效果，最好在服食前先在嘴里含一口水，再将蜂胶直接滴入口中和口里的水充分混合。
5、空腹服用蜂胶的效果最佳。但是糖尿病患者在服用蜂胶时，最好同服用降糖药一样，在饭前半小时服用。
五大禁忌记心中
1、未满周岁的孩子不可食用。婴儿的抵抗力较差，如果给婴儿食用蜂胶可能会影响婴儿免疫系统正常发育。
2、对蜂胶有过敏反应的人不能食用。研究发现，蜂胶中含有的原有桂皮酸、桂皮醇、桂皮醛、苯乙烯基桂皮酸盐和杨芽黄素等都具有致敏性。但是蜂胶的过敏反应属于迟发型变态反应，不像青霉素那样会有生命危险，所以人们不必过于担心。但是，在服用蜂胶前，最好先做过敏反应实验：在手腕处滴上一滴蜂胶，如果过一天后没有出现红肿、不起水泡或无瘙痒感，才能服用蜂胶。
3、孕妇慎服。蜂胶中的某些生物活性物质会刺激子宫，如果食用蜂胶不当会引起宫缩，干扰胎儿正常的生长发育。所以不懂得蜂胶食用方法的孕妇最好不要食用蜂胶。
4、不宜与西药同服。蜂胶与中药同服，可以帮助中药发挥更好的治疗作用。但是蜂胶不宜与西药一起服用，这是因为蜂胶有加强药效的作用，如果与毒副作用大的西药一起服用，会同时加大西药的毒副作用。蜂胶最好与西药分开服用，二者间隔半小时即可。
5、不宜长期食用。蜂胶的成分十分复杂，受到加工工艺的限制，蜂胶中普遍存在的重金属可能难以根除。如果常年服用，同样可能会对身体造成损害。
药用小验方
鼻子不通：用棉花棒蘸上蜂胶，涂抹在鼻子里。
牙周病：直接把蜂胶点在患有牙周病的牙龈上，严重时，可以每2~4小时点一次。
【关键词】蜂胶；醇法提取；总黄酮；含量测定
【中图分类号】R313 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）13-0062-02
蜂胶（propolis）是蜜蜂从植物幼芽与树干上采集的树胶与其上颚腺分泌物和蜂蜡等混合加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物。它主要由蜂胶香脂、蜂蜡、树脂、花粉等组成[1]。蜂胶的化学成份极为复杂，黄酮类化合物是蜂胶主要的功效成份。蜂胶的化学成分由蜜蜂采集的胶源植物决定，植物的种类繁多，不同地区蜂胶中分离出的化学成分不尽相同[2]，但黄酮类化合物始终是主要成分；目前仍以总黄酮的高低来确定蜂胶的质量，药典中也以两个特征性黄酮：白杨素、高良姜素的含量来确定蜂胶的质量[3]，黄酮类化合物是蜂胶中发挥保健营养功能的重要物质基础。本研究对湖北省神家架林区产蜂胶的化学成分进行了深入的研究，分离并鉴定了15个黄酮类化合物，主要为黄酮（醇）和二氢黄酮（醇）类化合物。
1 材料和仪器
蜂胶于2012年5月采自湖北省神家架林区， 由神农架玉泉绿色产品有限公司提供，经武汉工业学院生物及制药工程学院陈平教授鉴定为蜂胶。
XRC-1型显微熔点测定仪；ZAB-2F型质谱仪（英国VG公司）质谱仪；Varian Inova 500 MHz核磁共振仪； KQ-500DE型超声波清洗器（江苏昆山超声仪器公司）； RE- 52AA旋转蒸发仪（上海亚荣公司）。薄层层析硅胶板和柱层析硅胶均为青岛海洋化工厂产品；柱层析用凝胶Sephadex LH-20为Pharmacia（美国） 产品；反相C18色谱填料为Mitsubishi（日本）产品；提取分离时所用有机试剂均为分析纯，北京北化精细化学品公司生产。
2 提取分离及测定
2.1 蜂胶总黄酮的提取【4】 将蜂胶冷冻 5 h后进行粉碎，过20目筛，称取86.51g，加入1升甲醇，润湿浸泡24小时，超声提取30分钟，抽滤；滤渣再加入1升甲醇，浸泡24小时，超声提取30分钟，抽滤。合并甲醇液，减压回收甲醇至干；干浸膏粉碎，加入氯仿悬浮浸泡，冷藏24小时，抽滤去除溶液层，滤渣干燥得红褐色粉状（如图1）提取物30.36g。提限率为35.09%。
2.2 黄酮类化合物的测定 将上述提取物加入少许甲醇完全溶解后，加入硅胶拌样，进行硅胶柱层析分离，以氯仿-甲醇系统梯度洗脱，经薄层色谱分析，合并相似流分，再经反复硅胶柱层析（氯仿-甲醇及石油醚-乙酸乙酯系统）以及sephadex LH-20、反相C18柱等进行纯化，得到15个黄酮类化合物。分类见表1：
3 讨论
蜂胶是由蜜蜂将采自植物的枝条、叶芽及愈伤组织等的分泌物与上腭腺、蜡腺等的分泌物同少量花粉混合后所形成的黏性物质。蜂胶是一种天然活性物质，具有十分广泛的生物学作用，成为近年来国内保健食品领域研究的一个热点。现代研究表明[5]，蜂胶具有抗菌消炎、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力、软化血管、调节血脂、降血糖、改善微循环等广泛的生物学作用。含有大量的黄酮类、萜烯类化合物是蜂胶的重要特征，蜂胶的大部分生理及药理功能都与此类化合物有密切关系。
在2010版药典对蜂胶的含量测定控制方法为高效液相法控制白杨素及高良姜素的含量；但蜂胶的黄酮化合物类型及含量差异较大，如仅以白杨素及高良姜素等2个黄酮来控制质量，不能代表蜂胶中黄酮的整体组成及保健作用。本次课题以蜂胶的湖北神农架林区产蜂胶为实验对象，研究其主要黄酮类化合物的组成，并准备在后续的试验中测定相应黄酮的含量及其降血糖、调节血脂、抗衰老等功能作用，为深入研究和合理开发鄂产蜂胶的功能产品提供质量标准、技术路径和质量标准。
参考文献
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[4]刘晓琳，缪晓青.蜂胶提取技术与应用研究进展[J]. 中国蜂业，2010，61（10）：34-37.
[5]郦金龙，赵文婷，王盼，等. 蜂胶的研究应用进展[J].中国食物与营养.2011，17（6）：20-24.
作者简介：
周威（1973-），男，湖北武汉人，副教授，主要从事天然药物化学成分研究。
基金项目：
武汉市科技攻关项目（编号：201220822276）
目的 研究蜂胶提取物对不同龋敏感者口腔变形链球菌临床分离株的产酸能力的影响。方法 以BHI液体培养基为溶剂，分别配制pH=7.0的5 g/L 和1.25g/L水溶性蜂胶溶液，1.5625 g/L醇溶性蜂胶溶液，并以空白液体培养基作为对照，加入高龋组，无龋组，国际标准株变形链球菌，厌氧培养48 h 后离心，用精密酸度仪测定上清的pH值，计算出pH，并进行比较。结果 高龋组和国际标准株产酸能力明显高于无龋组；醇溶性蜂胶溶液和水溶性蜂胶溶液皆可使变链菌产酸能力降低，蜂胶各组与对照组相比差异均有统计学意义(P< 0.05) 。醇溶性蜂胶溶液和5 g/L 水溶性蜂胶溶液降低产酸能力的作用比较差异无统计学意义(P> 0.05)，但是均明显高于1.25g/L水溶性蜂胶溶液；蜂胶对高龋组和无龋组细菌的影响没有显著性差异。结论 蜂胶提取物影响变形链球菌的代谢，使变形链球菌产酸能力降低。
【关键词】 蜂胶; 变形链球菌; 龋敏感；产酸
ABSTRACT
Objective To study the effect of propolis on acid producing ability of clinical isolates from strptococcus mutans of the patients with difference caries susceptibility. Methodss Strptococcus mutans from caries-active group，caries-free group and international standard strain group were put into BHI culture medium with 5g/L and 1.25g/L proplis extract in water，into BHI with 1.5625g/L proplis extract in ethanol and into BHI culture medium which was taken as the control; after anaerobic culture for 48 hours，centrifugation was made，the pH value of supermatant in each solution was detected with acurate acidity tester and pH was calculated; the results were compared. Results Acidogenencity of caires-active group and of international standard strain group was much higher than that of caries-free group; proplis extract in water or in ethanol decreased the acidogenecity of streptococcus mutans; the comparison of each group with proplis to the control was of statistical significance (P＜0.05); the effect comparison between the solution with proplis extract in ethanol and the solution with 5g/L proplis extract in water in decreasing acidogenecity was of no statstical significance while their effects in decreasing acidogenecity were obiously stronger than that of the solution with 1.25g/L proplis extrat in water; the effect of proplis in caries-active group was without significant difference from that in caries-free group. Conclusions Proplis extract can affect the metabolism of streptococcus mutans and decrease its acidogenecity.
KEYWORDS proplis streptococcus mutans caries susceptibility
acidogenecity
龋病是世界范围内的常见病和多发病，其发病率高，危害性大，被世界卫生组织列为要重点防治的三大疾病之一［1］。变形链球菌（变链菌）是公认的主要致龋菌之一。近年来对蜂胶的研究比较多，本实验通过观察蜂胶对不同龋敏感患者口腔变形链球菌临床分离株产酸的影响，从而探讨蜂胶作为一种生物防龋制剂的可行性，为其临床使用提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 材料 蜂胶：乐山锡诚集团提供。细菌: 自行分离、鉴定自不同龋敏感患者口腔中的变形链球菌63株，其中高龋组34株，无龋组29株（高龋者dmft≥6，无龋者dmft＝0）。
国际参考菌株变形链球菌（S．mutans）ATCC 25175（血清型C），由四川大学华西医学院口腔生物工程重点实验室提供。
1.2 菌液的制备 将甘油保种变形链球菌临床分离株与国际标准株分别接种于MS固体培养基，37℃，微需氧复苏48h，检查生长状况，镜检鉴定无污染后，挑取单个菌落转种于BHI 液体培养基增菌，厌氧（80%N2、10%H2、10%CO2）培养24h，涂片检查为纯培养后，将菌液在4℃下以3000r／min离心15min，弃上清，收集细菌，无菌生理盐水洗菌两次，用无菌生理盐水调整为于紫外分光光度计540 nm处吸光度A=1.0的菌悬液，备用。
1. 3 试剂的制备 以pH为7.0的BHI 培养基为溶剂，配制醇溶性蜂胶溶液(1.5625g/L)，水溶性蜂胶溶液(5g/L 和1.25g/L)，调定各培养基的pH值为7.0 。
1. 4 实验方法 实验为4组：5 g/L蜂胶水溶液组，1.25 g/L蜂胶水溶液组，1.5625 g/L蜂胶醇溶液组，BHI培养液组做为对照。取各菌株的菌悬液，按菌液与液体培养基1∶10 (v/v) 比例接种细菌，37℃厌氧培养（80%N2、10%H2、10%CO2）48 h， 3000rpm，离心15 min，收集上清，采用 pHS - 3C精密酸度计，测定培养物上清的终末pH 值，并计算pH的变化值pH值（初始pH 值－终末pH 值）。
1. 5 统计学方法
采用SPSS 11.0统计软件中的two-way ANVOA对不同细菌的产酸能力即pH值，进行统计分析(а=0.05)；并采用kendall相关分析法检测蜂胶与细菌产酸能力之间的相关性。
2 结果
蜂胶对变链菌产酸能力的影响结果见表1。
细菌F=65.832，P＜0.05，培养基F=98.01，P＜0.05，细菌与培养基的交互性F=1.192，P＞0.05。
表1 在各组培养基中不同龋敏感患者变形链球菌的产酸能力（略）
统计分析得出：无论添加蜂胶与否，国际标准株和高龋组变链菌的产酸能力没有显著性差异，但是它们的产酸能力均高于无龋组变链菌的产酸能力(P
采用kendall相关分析法得出：kendall等级相关系数为-1.0，P值为0.042＜0.05，说明蜂胶与变链菌的产酸能力成负相关。因此可以可以得出蜂胶可以抑制变链菌的产酸能力。
3 讨论
蜂胶是一种天然活性物质，具有十分广泛的生物学作用，成为近年来国内药理学领域研究的一个热点。蜂胶中含有大量黄酮类、芳香酸、脂肪酸及萜烯类化合物，具有广谱抗菌作用。实验表明，蜂胶对革兰阳性细菌的抗菌作用较革兰阴性细菌为强［2］。
变形链球菌是一种革兰氏阳性兼性厌氧菌，它能产生有机酸，使牙体硬组织发生无机物的酸蚀脱矿，有机物崩解，最终导致龋病的发生［3］。对于蜂胶的防龋作用已有一些报道。Koo 等［4］报道蜂胶醇溶液对口腔中10种细菌皆有抑菌作用，特别提出蜂胶醇溶液对变形链球菌和远缘链球菌的抑菌作用很强；王晶等［5］研究得出醇溶性蜂胶溶液和水溶性蜂胶溶液都可以使变形链球菌产生的乳酸量显著减少。
本实验得出蜂胶醇溶液和水溶液均可以使变形链球菌的产酸能力降低，这与参考文献中的结果一致。高龋组细菌产酸能力高于无龋组的细菌，可能是因为高龋组存在着产酸能力强的菌株。但是蜂胶对于高龋组和无龋组的细菌的影响没有显著性差异，这说明蜂胶对不同菌株产酸作用的抑制机制可能都是一致的。蜂胶做为一种生物防龋材料，是具有可行性的，但是蜂胶的化学成分随产地和蜜蜂种类不同而异，具有高度的复杂性和多样性，对于蜂胶抑制变链菌产酸的具体机制、蜂胶的其他防龋性能以及不同蜂胶之间防龋能力的差异性，还需要进一步研究。
参考文献
［1］ Balakrishnan M，Simmonds RS，Tagg JR. Dental caries is a preventable infectious disease. ［J］Aust Dent，2000; 45(4):235～245.
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［3］ 岳松龄主编 现代龋病学［M］．北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1993.63～88.
近些年，在世界各国掀起回归自然的热潮中，蜂产品备受人们的推崇。在欧洲、美国、日本等经济发达国家和地区，对蜂产品的需求量日益增加，因为科学使用蜂产品在保健养生、防病治病方面的作用日渐突出。例如在日本，蜂产品的消费量增加了3倍以上，被认为是日本人均寿命延长的六大原因之一。我国利用蜂产品健身、治病的历史可追溯到两千年之前。明代李时珍在《本草纲目》中记述：“蜂蜜其入药之功有五：清热也、补中也、解毒也、止痛也、润燥也……与甘草同功。”传统的中成药“炼蜜为丸”，用的就是优质的蜂蜜。古往今来，蜂蜜和中医、中药结下了不解之缘。
目前使用较多的蜂产品一般可分为四大类：蜂蜜类、蜂王浆类、蜂花粉类和蜂胶类。另外，蜂产品还包括蜂蜡、蜂毒、蜂蛹、蜂幼虫等。本刊曾介绍了蜂王浆的有关知识，下面再谈谈蜂胶和蜂花粉的保健功效。
蜂胶是蜜蜂采集树芽、树干上的树胶与其上颚腺分泌物和蜡腺分泌的蜡质调制而成的具有芳香性、不透明的胶状固体。蜜蜂把蜂胶涂抹在蜂箱的所有角落和表面部位，使蜜蜂幼虫能在蜂箱里正常生长发育。另外，蜂胶可使营养极为丰富的蜂王浆、蜂花粉、蜂蜜等在蜂箱内保存较长时间而不腐败变质。由于有了蜂胶，使得蜜蜂在漫长的岁月和严酷的生存环境中得以生息繁衍，所以人们称蜂胶是蜜蜂王国的保护神。
蜂胶的防腐作用引起了科学家的兴趣。研究发现，蜂胶的成分十分复杂，目前已知的有300多种有效物质，包括黄酮类、萜（音“贴”）类、芳香类等化合物以及多种酶和氨基酸、维生素等等。科学家们发现，蜂胶对细菌、真菌、霉菌和病毒有较强的杀灭作用，是一种不可多得的天然广谱抗菌物质，又是一种理想的抗氧化剂和免疫增强剂，具有很高的药用保健价值。
蜂胶中的黄酮类化合物具有很强的抗氧化作用，能软化血管，防治动脉硬化，还有降血脂、降胆固醇等作用，对心脑血管疾病患者有明显的保健功效。蜂胶中的多种活性酶和萜类物质可增强正常细胞膜活性，预防细胞癌变或癌细胞转移。接受手术或放、化疗的患者服用蜂胶后，可增强机体抵抗力，还可有效防止放射性粘膜炎的发生与发展，减少放、化疗的副作用。人们无意中发现，世界各地的养蜂人很少患癌症，这也从一个侧面证明了蜂胶等蜂产品的抗癌作用。
在现代文明社会，糖尿病成为威胁中老年人健康的常见病、多发病。研究发现，蜂胶含有的多种生物活性物质有促进胰腺功能、增强分解利用葡萄糖而达到降低血糖的效果。有报道认为，糖尿病患者在治疗过程中坚持服用蜂胶，可有效延缓糖尿病的进程及并发症的发生。还有研究发现，蜂胶对慢性肠胃炎患者有疗效。蜂胶具有良好的成膜性，能够在粘膜上形成一层保护膜，从而对胃及十二指肠溃疡有治疗作用。蜂胶还对多种皮肤病有疗效，具有抗菌消炎、局部止血止痛等作用，能促使上皮组织增生和肉芽生长,改善皮下组织血液循环，限制疤痕形成。蜂胶还可营养皮肤，保护皮肤不受酸碱等化学物质伤害，具有护肤美容的效果。
与其他类型的蜂产品比较，蜂胶的作用侧重于药效方面。蜂胶的剂型可分为胶囊类（有软胶囊和硬胶囊两种）、蜂胶液（分酒溶和水溶两种）、片剂以及外用剂型，请按照说明书标明的剂量和方法服用。需要注意的是，某些人对蜂胶会发生过敏反应，一般在服用3～5天内发生，停用后1～2周症状会消失。
蜂花粉是蜜蜂从植物花朵中采集的花粉粒，是工蜂的食物，故又称为“蜂粮”。蜂花粉中除含有优质蛋白质等丰富的营养素外，还含有丰富的生物活性酶等多种有效成分，包括了孕育生命所需的营养物质，被营养学家和医学家誉为“纯天然的浓缩营养库”。
蜂花粉又是一种“可以吃的化妆品”，内服、外用均有利于美容。长期服用蜂花粉可调节人体营养平衡，使细胞的生理代谢处于良好状态。也可通过皮肤直接吸收蜂花粉中的营养成分，达到营养肌肤的美容效果。
现代研究认为，蜂花粉中含有的多种生物活性物质能够增强人体中枢神经系统的功能，使大脑保持旺盛的活力，能够增强体力、抗疲劳、抗衰老。还有报道认为，蜂花粉能够辅助治疗前列腺疾病。
蜂花粉可在早饭、晚饭后半小时用温开水送服，每次5克。对花粉过敏者不可服用蜂花粉。
【关键词】蜂胶；西洋参；调节免疫；抗肿瘤
蜂胶在我国市场出现只有40多年历史，这是由于中华蜂不产蜂胶，所以从意大利蜂引进我国才产蜂胶。蜂胶在2005年作为中药材收录中国药典，目前国内产品多以单纯蜂胶制成的保健品为主，将蜂胶与西洋参配伍进行产品研发报导很少，本文将蜂胶、蜂胶西洋参组合物灌胃肝癌移植瘤小鼠，并采用血清溶血素测定、NK细胞活性测定、ConA诱导的脾淋巴细胞转化功能测定和肿瘤抑制率测定，观察其对免疫功能的影响及抗肿瘤作用，期望为蜂胶配伍西洋参的产品研发提供实验依据，现将结果报告如下：
1实验动物和检测条件
实验动物用ICR种小鼠由浙江省实验动物中心提供，清洁级，雌性，体重20±2g。饲料由浙江省实验动物中心提供，执行标准GB14924-1994。检测环境条件：温度91-93℃，相对湿度60-65%。动物于试验前在动物房环境中适应3天
2实验药物和剂量设计
2.1 蜂胶:采自养蜂场的原蜂，由杭州天厨蜜源保健品有限公司提供。将蜂胶经乙醇提纯，经冷冻干燥制成纯蜂胶。纯蜂胶与淀粉按2：1混合，加入粉碎机中打成200目蜂胶粉，冷贮备用。
2.2 西洋参：购自吉林省宏久生物科技股份有限公司的西洋参提取物。
2.3 受试药的配制：将蜂胶粉与西洋参提取物以3：1的比例混合均匀，临用时用蒸馏水配制成5g/ml、2.5g/ml、1.25g/ml浓度。蜂胶对照组采用蜂胶粉，临用时用蒸馏水配制成5g/ml浓度。
2.4 实验设三个蜂胶西洋参剂量组、一个蜂胶对照组和一个蒸馏水对照组。低、中、高三个蜂胶西洋参组剂量分别为0.5、1.0、2.0g/kg体重(相当于人体临床拟用量的7.5、15和30倍)，蜂胶对照组剂量为蜂胶粉2.0g/kg体重，蒸馏水对照组每日灌胃蒸馏水20ml/kg体重。给药前24小时以上各组动物均皮下接种HepA细胞(2×107/ml)0.2ml/只。
3实验方法
3.1小鼠血清溶血素测定(血凝法)：各组灌胃给样品，每天1次，连续10天。在试验第6天，每鼠腹腔注射0.2ml2%(V/V)压积绵羊红细胞(SRBC)悬液，进行免疫。4天后，取血离心，收集血清，用生理盐水将血清倍比稀释，37℃温箱孵育3小时，观察血球凝集程度，计算抗体积数。
3.2 NK细胞活性测定（LDH测定法)：各组灌胃给样品，每天1次，连续10天。在试验第11天，每鼠无菌取脾，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，在200目尼龙网袋内轻轻捻压，过滤，制成单细胞悬液，计数，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为5×±1O6个/ml。试验前24小时将YAC-l细胞(靶细胞)传代培养，应用前用Hanks液洗3次，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为l×lO5个/ml。取靶细胞和脾细胞悬液(效应细胞)各1OOul(效靶比50：1)，加入U型96孔培养板中，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各10Oul，靶细胞最大释放孔加靶细胞和l%NP40各1Ooul。上述各项均设三个复孔，于37℃、5%CO2培养箱中培养4小时，离心，每孔吸取上清1OOul置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μl，反应3分钟，每孔加入1mol/L的HCI30ul，测光密度(OD)值，计算NK细胞活性。
3.3 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的测定：各组灌胃给样品，每天1次，连续10天。动物颈椎脱臼处死，取脾脏，在200目尼龙网袋内轻轻捻压，过滤，制成脾细胞悬液，用无菌Hanks液洗2次，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为1×107个/ml，将细胞悬液加入96孔培养板中，每一份脾细胞悬液3孔，每孔0.1ml，每孔再加入含ConA（浓度10ug/ml）的RPMI1640完全培养液0.1ml。培养板置5%CO2，37℃培养72h。培养结束前16h，每孔加入3H-TdR20μl，使其终浓度为3.7×104Bq/ml。用多头细胞收集器收集细胞于玻璃纤维滤纸上。滤纸片置闪烁液中，用液闪仪测定每分钟脉冲数（cpm)。结果用三个复孔的平均cpm表示。
3.4 剥离各动物实体瘤，称重，计算抑瘤率%。
抑瘤率=( 1-给药组平均瘤重/对照组平均瘤重)×100%
3.5数据处理：采用方差分析。
4实验结果
4.1 对小鼠血清溶血素影响：结果见表1。与阴性对照组(蒸馏水)比较，蜂胶西洋参中、高二个剂量组能提高小鼠血清溶血素抗体积数水平，差异均有显著性(P
表1 对荷瘤小鼠血清溶血素影响
注：* P
4.2对小鼠NK细胞活性的影响：结果见表2。与阴性对照组(蒸馏水)比较，蜂胶西洋参中、高二个剂量组均能提高小鼠NK细胞活性，差异均有显著性(P
表2 对小鼠NK细胞活性的影响
注：* P
4.3 对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响：结果见表7。蜂胶西洋参中、高剂量组及蜂胶对照组的ConA诱导的脾淋巴细胞转化值，与阴性对照组(蒸馏水)比较，差异均有显著性(P
表3对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化的影响
注：* P
4.4 对肝癌移植瘤(HepA)的抑制作用：结果见表7。蜂胶及蜂胶西洋参各组对HepA肿瘤的抑制率在10%～18%，但与阴性对照组比较无明显差异（P＞O.05）。
表4 对HepA荷瘤小鼠瘤体生长的影响
注：与阴性对照组比较无明显差异（P＞O.05）
5讨论
蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂，混入自身分泌物形成的一种胶状物质，具有多种保健功能，目前社会上也有人与西洋参一起配伍用来滋补身体。文献报导蜂胶能够增强免疫功能低下小鼠的抗体生成细胞功能，提高溶血素含量，增强单核吞噬细胞功能，提示蜂胶有促进和调节机体体液免疫功能的作用，并增加机体吞噬细胞的吞噬作用[1]。也有作者用MTT法、耳肿胀法、Jerne改良玻片法、血凝法、半体内法、乳酸脱氢酶测定法等多种方法，观察蜂胶提取物对小鼠脾淋巴细胞转化、迟发型变态反应、血清溶血素、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、NK细胞活性状况，结果蜂胶提取物具有增强小鼠细胞免疫功能和体液免疫功能的作用[2]。西洋参主要具补气养阴，清热生津功能[4]。现代药理研究表明具有抗应激，抗休克和改善心血管系径统作用有抗应激[5]。蜂胶与西洋参配伍进行免疫功能观察报导甚少。本文将蜂胶与西洋参配伍成混合粉进行对荷瘤小鼠免疫功能影响的观察，结果表明蜂胶西洋参以1.0g/kg和2.0g/kg 灌胃荷瘤小鼠可明显提高小鼠的血清溶血素水平（P
参考文献
[1]于晓红,李淑华,李树伟,等.蜂胶对小鼠免疫功能影响的实验研究[J].中医药信息,2001,18（4）:53-54。
[2]邵艳,浦锦宝.蜂胶调节小鼠免疫功能实验研究[J].浙江中西医结合杂志,2005,15（2）:90-92。
[3]王艳宏,刘中申,关枫,等.西洋参及其制剂的免疫调节作用研究[J].中医药学刊,2004,22(3):566-567。
本实验采用1,1-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH)分光光度法[3,4]测定蜂胶、BHT、蜂胶抗氧化美容霜和市售抗氧化霜的抗氧化活性。进一步证实了蜂胶的抗氧化活性,为蜂胶添加入化妆品中的可行性和优越性奠定基础。
1材料与仪器
材料:蜂胶1,由湖北荆门蜂农提供;蜂胶2,由福建省神蜂科技开发有限公司提供;市售抗氧化霜;BHT(化学纯)由国药集团化学试剂有限公司;DPPH自由基,购于光纯药工业株式会社;其它试剂皆为国产AR级,试验用水皆为二次重蒸水。
仪器:WFJ 7200型分光光度计,尤尼柯(上海)仪器有限公司;电子天平BS223S,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;自动双蒸纯水器、水浴锅、电热鼓风干燥箱等。
2实验方法
2.1 两种蜂胶清除DPPH・自由基能力的比较
蜂胶1、蜂胶2用无水乙醇配置成浓度为0.008g/mL的溶液(参照2009年蜂胶国家标准GB/T 24283-2009);
DPPH溶液:称取0.0128g加无水乙醇溶解于50mL容量瓶中,定容,摇匀 ,作为储备液 ( 6. 5×10- 4 mol/ L ) 保存于冰箱中,用时稀释10倍;
样品在40℃,75%RH下放置0~4周后,按表1加样并充分混匀,测定30min后其在517nm波长处的吸光值。取3次测试的平均值计算清除率。
空白A0为4.0mL DPPH溶液加0.2mL样品溶剂,样品Ai为4.0mL DPPH溶液加0.2mL样品溶液,测吸光值。
自由基清除率(%)=[(A空白-A末)/A空白]×100%
2.2 两种蜂胶与BHT清除DPPH・自由基能力的比较
BHT(2,6-二叔丁基对甲酚)用无水乙醇配置成浓度为0.008g/mL的溶液;
蜂胶1、蜂胶2用无水乙醇配置成浓度为0.008g/mL、0.0008g/mL、0.0004g/mL的溶液。样品在40℃,75%RH下放置0~4周后,同上一步加样反应。
2.3 蜂胶抗氧化美容霜与市售抗氧化产品清除DPPH・自由基能力的比较
在40℃,75%RH下放置0~4周后,直接取蜂胶抗氧化美容霜(添加蜂胶1的终浓度为0.008g/mL)和市售抗氧化霜各0.2mL,按表1,分别加入体系中反应,并计算结果。
2.4 数据统计与分析
实验数据均采用spss软件进行统计与分析。
3结果与分析
3.1 蜂胶1与蜂胶2清除DPPH・自由基能力的比较
两种蜂胶对DPPH・自由基的清除作用见图1。结果表明两种蜂胶对DPPH・自由基皆有明显的清除作用,其中蜂胶1的自由基清除活性略大于蜂胶2。随着在40℃,75%RH下放置时间的延长,两种蜂胶的清除活性无明显改变,并都明显大于BHT。
图1两种蜂胶的清除率比较
3.2 不同浓度蜂胶与BHT清除DPPH・自由基能力的比较
如图2、图3所示,两种对DPPH・自由基有明显的清除作用,且清除率与蜂胶的浓度呈正相关。当稀释20倍后,蜂胶2的自由基清除活性才略低于BHT,而蜂胶1的自由基清除活性与BHT的自由基清除活性差异不明显。
图2蜂胶2与BHT的清除率比较
注:蜂胶2*10为蜂胶2溶液稀释10倍;蜂胶2*20为蜂胶2溶液稀释20倍。
图3蜂胶1与BHT的清除率比较
注:蜂胶1*10为蜂胶1溶液稀释10倍;蜂胶1*20为蜂胶1溶液稀释20倍。
3.3 蜂胶抗氧化美容霜与市售抗氧化霜清除DPPH・自由基能力的比较
从图4可以看出,蜂胶抗氧美容霜清除自由基活性强,达到63.71%;在40℃,75%RH下放置1周后,清除率降低到59.90%,而当储存2周后,清除率提升到82.59 %,并保持在该水平;市售抗氧化霜的自由基清除活性为4.84 %,当在40℃,75%RH下放置1周后,清除率为3.01 %,放置2周后就不具有自由基清除活性了。
图4自制蜂胶抗氧化美容霜与市售抗氧化霜的清除率比较
4讨论
两种化妆品的抗氧化活性在40℃,75%RH下放置2周后都有明显的变化,蜂胶抗氧化美容霜的清除率明显上升,并保持在较高水平,而市售抗氧化霜的清除自由基能力则完全消失,这可能与它们的乳化状态发生变化有关。市售抗氧化霜的抗氧化活性很低,可能是因为该产品价格低,抗氧化成分含量少,不代表整个化妆品界,但可以反映出某种社会现象,即化妆品市场的规范性和真实性有待进一步改善。
本实验中还存在一些问题:市售霜和蜂胶抗氧化美容霜在DPPH反应液中的溶解性不好,一定程度影响结果。但该问题两产品同时存在,也在一定程度上具有可比性。蜂胶还处于初步研究阶段,它成分复杂、药理活性多样,各地不同产区差异性大,其化学成分的组成和药理活性的特点常常有很大差别,因此需要更深入的研究。用DPPH法评价天然抗氧化剂的抗氧化活性,在操作时,一定要注意避光和通风,因为 DPPH溶液为剧毒、易挥发的液体[5]。
随着市场需求的日益加大,蜂胶的神奇妙效不断被发现和证实,我们相信,通过科学、严格的管理和规划,是能够生产出合格、标准、统一的优质蜂胶化妆品的。
参考文献:
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[3] Fukumoto L R, Mazza G. Assessing Antioxidant and Prooxidant Activities of Phenolic Compounds.Agric Food Chem. 2000, 48:3597-3604.
蜂胶，是蜜蜂采集胶源性植物的树脂，掺和其上腭腺及蜡腺分泌物，经蜜蜂反复加工而成的胶状物质。蜜蜂将之涂到蜂巢入口和内壁上，以保持巢内相对无菌状态。蜂胶由于产量低且保健功能显著，被誉为“紫色黄金”。
“世界蜂胶看巴西。”巴西蜂胶因其产自原始、天然生态环境而备受各国消费者追捧，中国人也经常会托当地工作的朋友购买蜂胶。
绿蜂胶除了蜂胶普遍具有的保健功能外，在抗菌性和提高免疫力方面均优于其他品种。因此，出产绿蜂胶的季节是吉列尔梅和太太妮维雅最忙碌的时间。他们拉亚集团的“蜜蜂家族”系列产品是巴西绿蜂胶知名品牌，多项指标居于行业前列。
记者跟随吉列尔梅来到米纳斯吉拉斯州福米加市附近的丛林中，看到每个蜂箱里大约有2万至3万只蜜蜂。这些蜂箱相当于自然界的蜂巢，蜜蜂们在蜂箱中生活、酿蜜。如此多的蜜蜂在如此狭小的空间内生活，却能够不感染任何病毒，秘密就在于蜂箱与外部相通的地方被一层蜂胶封住，而这层蜂胶具有超强的抗菌性。
吉列尔梅告诉记者，蜂胶从颜色看，绿色比棕色好，棕色比黑色好。虽然巴西全国各地都有可能出产蜂胶，但出产绿蜂胶的地区少之又少。这是因为绿蜂胶必须到生长着具有超强抗氧化作用的迷迭香和酒神菊的地区采集，并且这一地区没有污染。这就是为什么人们一定要到海拔700至1500米的深山中采集蜂胶的原因。
除了植被没有被污染外，蜂种也非常重要。从事蜂胶生产25年的妮维雅强调，“非常重要的一点是巴西蜜蜂的品种”，它们是欧洲蜂和非洲杀人蜂的杂交后代。与体格较弱的欧洲蜂相比，杂交产物巴西杀人蜂不仅产胶多，而且体格壮，具有很强的免疫力，是世界上唯一不感染疾病的蜂种。因此蜂农不需要给蜜蜂施用抗菌素来预防蜂疫。而且产胶的是工蜂，因此蜂胶里也没有任何激素。
即使是产胶能力强的巴西杀人蜂，每个月一个2万至3万只蜜蜂的蜂箱出产蜂胶也仅一公斤左右。“蜜蜂家族”采集蜂胶的这个养蜂基地共有5000个蜂箱，年产约1.5吨蜂胶。整个米纳斯吉拉斯州约有4万个蜂箱。
气候对蜂胶的产量也有影响，如果连续下雨，蜂胶就会非常软，无法收割。基地负责人马特乌斯说，2016年有一个月连续下雨，造成产量大幅下降。
在养蜂基地，人们在上下蜂箱间设立间隙，诱使蜜蜂采集加工蜂胶，来封堵蜂箱间的缝隙。记者看到，有些蜂箱的缝隙已被蜂胶填满。这时候，蜂农可以用刀小心地将蜂胶割下来。大概一周时间，勤劳的小蜜蜂们再次将缝隙用蜂胶封起来。然后，蜂农再割一次。当然，这样的重复操作最多只能持续3个多月。在一年中剩余的9个月中，这些蜜蜂的任务就是生产蜂蜜了。
妮维雅介绍，割下来的蜂胶会被送到工厂进行分拣和清洁。人们剔除蜂胶在被采集过程中沾上的木屑，然后将之冷藏。在提纯过程中，需要严格控制氧化时间，采用超临界萃取工艺，使蜂胶中的有效成分最大限度析出，溶解液达到最大程度饱和。
拉亚集团的蜂胶很多都出口到日本、韩国、马来西亚等亚洲国家，近年来开始开拓欧洲和北美市场。
优势一、经典配方:中科蜂胶养生宝是按照人体保健的需求针对当代严重威胁人体健康的病痛,采用现代生物工程的离析组合技术,在分子水平上对具有综合调理作用的蜂胶和有延缓衰老效用的蜂王浆冻干粉以及被称作营养宝库的蜂花粉做了优化提取和重新配伍而研制出来的新一代蜂胶制品――每100克中含总黄酮4300毫克,10-羟基-α-癸烯酸1100毫克,是蜂产品所有优势成分的完美结合,其比例增之一分嫌多,减之一分不及,是科学家专为中老年人开出的一剂健康处方,能充分激发各种蜂产品成分的潜在效用,起到立体式全方位的护卫人体健康的作用。
优势二、效果卓著:中科蜂胶养生宝集蜂产品的优势成分于一身,浓缩了蜂产品的所有生物活性成分,使其作用更强、见效更快、效果更好。中科蜂胶养生宝的神奇效果引起了海内外科学家的关注,许多专家还纷纷订购进行研究,希望能破解中科蜂胶养生宝的经典配方。更有外国富商要重金购买这一经典配方,都被婉言谢绝了,因为中科蜂胶养生宝是极有价值的民族品牌。
优势三、科技结晶:中科蜂胶养生宝是国家九五重点科技攻关项目的科研成果,是中科院两位院士、六位教授、三十九位高级工程师多年刻苦专研的结晶,是当今最新科技的完美杰作。
优势四、原料纯净:中科蜂胶养生宝的胶原一直采用的是最优质的蜜蜂种群,其胶源位于高纬度无污染的黄山深山区,这就从源头上保证了中科蜂胶养生宝的原生态和优质性。
优势五、工艺超凡:中科蜂胶养生宝采用领先国际的脱铅工艺,使其无杂质残留,食用起来更安全。
优势六、专利保护:中科蜂胶养生宝其独有的配方不仅通过国家卫生部的认证,而且获得国家专利,受法律保护。
中科蜂胶养生宝上市11年来,以其独有的六大优势和实实在在的效果得到了广大消费者的推崇和信赖,尤其是这十种人对它更是情有独钟:第一种心脑血管有问题的人:第二种血糖有问题的人:第三种免疫力低下的人;第三种长期胃肠不适的人;第四种有肝病的人;第五种有支气管哮喘的人:第七种有更年期障碍的人:第八种自我保健意识强的人;第九种需要送礼的人;第十种追求实惠的人。
【摘要】 目的 观察蜂胶总黄酮对D半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆的影响，并对其作用机制进行了探讨。方法 小鼠颈背部皮下注射D半乳糖42 d，制备衰老模型。通过小鼠学习记忆能力、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、丙二醛(MDA)、脂褐素(LF)水平的测定，评价蜂胶总黄酮的抗衰老作用。结果 与空白对照组相比，D半乳糖（150 g/kg，sc，42 d）使小鼠学习记忆能力降低，脑组织中SOD、GSHPx活性下降，MDA、LF含量增加，而蜂胶总黄酮30 mg/kg、60 mg/kg和90 mg/kg三个剂量组对上述病理变化具有不同程度改善作用。结论 蜂胶总黄酮能改善D半乳糖诱导衰老小鼠学习记忆功能障碍，其机制可能是抗氧化调节自由基代谢。
【关键词】 蜂胶；黄酮；学习记忆；脂褐素；衰老
蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干采集的蜂蜜，混入蜜蜂上颌腺分泌物和蜂蜡后加工制成的芳香味的胶状固体物质。蜂胶富含多种具有药用价值的活性成分，其中主要是黄酮类化合物，研究发现蜂胶黄酮具有抗菌、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤、免疫调节、清除自由基等生物学活性〔1，2〕 。 而蜂胶黄酮对学习记忆的影响少见报道。本课题组前期研究发现蜂胶醇提物对各种学习记忆障碍模型小鼠具有明显保护作用〔3〕 。本文在此基础上，采用超声法提取蜂胶总黄酮，观察了其对D半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆功能的影响，并从抗氧化角度对其作用机制进行了初步探讨，以期为蜂胶的抗衰老作用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 蜂胶原胶 由山东省实验种蜂厂提供。参照文献〔4〕，超生法提取蜂胶总黄酮，临用前0.15%吐温80溶解，配成所需浓度备用。参照文献〔5〕，以芦丁为标准品，用比色法测定总黄酮含量。
1.1.2 昆明种小鼠 体重18～22 g，由泰山医学院实验动物中心提供，合格证号：鲁动质字020103。
1.1.3 材料及仪器 D半乳糖，Amresco生产，上海贝基生物技术有限公司分装，临用前用生理盐水配制合适浓度； 超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）试剂盒、 丙二醛（MDA）试剂盒、脂褐素(LF)试剂盒、考马斯亮蓝测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所；芦丁标准品，购自中国药品生物制品检定所。KQ600DB型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司生产；Y型迷宫刺激器，安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司生产；紫外分光光度计，上海棱光技术有限公司生产；RF5301PC荧光分光光度计，日本岛津生产。
1.2 方法
1.2.1 动物筛选、分组、给药及模型的制备〔6〕
取2月龄昆明种小鼠放入Y型迷宫箱中适应1～2 min，给予适当电击，至其对3臂均探索进入为止，选择活跃，对电击反应较敏感的小鼠，过于敏感和迟钝小鼠被淘汰。筛选80只小鼠随机分为5组，每组16只(雌雄各半)，对照组，D半乳糖衰老模型组，均灌胃等体积生理盐水，蜂胶总黄酮低、中、高浓度组，分别以30、60、90 mg/kg 3个剂量进行灌胃，给药6 w。灌胃同时除生理盐水对照组外，其余各组小鼠每只每日颈背部皮下注射D半乳糖150 mg/kg 1次，连续6 w，制备小鼠衰老模型。末次给药后，进行Y型迷宫试验。
1.2.2 Y型迷宫试验〔7〕
采用Y型迷宫法，迷宫共分为三个互通的臂。实验测试时，以A为起步区，B为安全区，C为危险区。工作电压20～30 V。小鼠在起步区受到电击后，一次性跑入安全区为正确，否则为错误，即为一次训练。下一次训练以B为起步区，C为安全区，A为危险区，依次往复。共训练33次，其中前3次作为小鼠适应环境不进入统计，记录后30次的错误次数，为学习成绩。24 h后，用同样的方法测试，为记忆成绩。
1.2.3 脑组织生化指标的测定 测试后的小鼠快速断头处死，随机每组选取8只，取其脑组织制成10%水相脑匀浆，测定脂褐素含量；另外8只取其脑组织用生理盐水制成10%匀浆，3 000 r/min低温离心10 min，取上清液测定SOD、GSHPx活性及MDA含量。考马斯亮蓝作蛋白定量。
1.3 统计学处理 数据用x±s表示，使用SPSS14.0软件进行统计分析，组间显著性检验采用单因素方差分析。
2 结果
2.1 蜂胶总黄酮对衰老模型小鼠学习记忆功能的影响 与对照组相比，模型组小鼠学习记忆功能明显衰退，表现为学习实验和记忆实验的错误次数均明显增多（P＜0.01），说明建模成功。与衰老模型组相比，蜂胶总黄酮三个剂量组能明显降低小鼠的错误次数（P＜0.01，P＜0.05），说明蜂胶总黄酮能改善衰老小鼠的学习记忆。见表1。
2.2 蜂胶总黄酮对衰老模型小鼠脑组织SOD、GSHPx活性及MDA、LF含量的影响 与对照组相比，模型组SOD、GSHPx活性明显降低，MDA、LF含量明显升高（P＜0.01或P＜0.05），符合小鼠衰老规律。与衰老模型组相比，蜂胶总黄酮中、高剂量组SOD、GSHPx活性显著提高（P＜0.01或P＜0.05），而MDA、LF含量蜂胶总黄酮三个剂量组都明显下降（P＜0.01）。说明蜂胶总黄酮能提高衰老小鼠脑组织中SOD、GSHPx活性，降低MDA、LF含量，减轻模型鼠的过氧化损伤。见表2。
表1 蜂胶总黄酮对衰老小鼠学习记忆功能的影响（略）
与模型组比较：1)P＜0.01，2)P＜0.05
表2 蜂胶黄总酮对衰老小鼠脑组织SOD、GSHPx、 MDA、LF水平的影响 （略）
与模型组比较：1)P＜0.01，2)P＜0.05
3 讨论
D半乳糖致衰老模型是基于衰老的代谢学说而复制的一种衰老模型，其衰老反应接近或相当于自然衰老。研究表明〔8〕D半乳糖造成的衰老模型可使实验动物学习记忆能力明显下降，本研究结果也发现，皮下注射D半乳糖6 w后，小鼠学习实验与记忆实验错误次数明显增多，学习记忆能力下降。而在D半乳糖造模的同时给以蜂胶总黄酮，可明显改善小鼠的学习记忆能力。提示蜂胶总黄酮具有益智的功效，这与先前的实验结果一致〔3〕 。
D半乳糖致衰老模型具有与自然衰老相似的自由基代谢紊乱特征〔9〕 。随年龄增长，机体抗氧化系统物质合成、活性均下降，清除氧自由基的能力下降，导致自由基堆积，产生大量代谢产物MDA，对机体产生损害，加速衰老。机体内存在的清除自由基防御系统包括SOD、GSHPX、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶，及维生素A、维生素C 和维生素E 等抗氧化物质〔10〕 。SOD能促使超氧化物阴离子自由基变为过氧化氢和氧离子，防止氧自由基破坏组织和细胞；GSH能特异性催化谷胱甘肽对过氧化氢的还原反应，起到保护细胞膜的作用；MDA是衡量机体内自由基代谢的敏感指标，客观反映体内自由基的水平；自由基作用于多不饱和脂肪酸产生脂质过氧化物，后者产生醛基和羰基，导致大分子交联，最终形成LF，随年龄的增长，LF越积越多，因此机体LF的含量可以反映衰老〔11～13〕 。本研究发现，给予D半乳糖后，小鼠脑组织SOD、GSH活性下降，而过氧化产物MDA、LF含量明显增高，这与文献报道一致〔14〕，说明造模成功。而给予D半乳糖同时给以蜂胶总黄酮可使SOD、GSH活性显著提高，MDA、LF的含量明显下降，这提示，蜂胶总黄酮对抗D半乳糖诱导衰老的作用机制是通过阻断自由基链反应的各个环节，从而对抗自由基对中枢神经系统的损伤，有效改善D半乳糖诱导的学习记忆障碍。
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10 Gardino R，Gavaresi G，Finim M，et al.The role of different chemical modifications of superoxide dismutase in preventing a prolonged muscular ischemia/reperfusion injury〔J〕.Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol，2002；30(3):18998.
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12 Inal ME，Kanbak G，Sunal E.Antioxidant enzyme activities and malondialdehyde levels related to aging〔J〕.Clin Chim Acta，2001；305 (1/2):7580.
我今年82岁，已进入耄耋之年，经过20多年的养生保健，长期“陪伴”我的慢性支气管炎、慢性结肠炎、慢性胆囊炎都已先后痊愈，近几年痔疮也未复发过，20多年来未因重病住院，生活完全自理。我现在精力充沛，耳聪目明，思维清晰，仍能笔耕撰稿。除保持乐观的心态和远离不良嗜好外，主要采取以下方法：
一、素食为主 平衡膳食
我过去患有慢性结肠炎，如吃瘦肉较多便会诱发，更不宜吃油腻食物。1995年我在体检时发现血脂超标，这是心血管疾病的前兆，绝不可掉以轻心，而平衡膳食是配合治疗高血脂的重要环节。于是，我每天定量食蔬菜400～500克，荤食是猪瘦肉、有鳞鱼等120～150克，植物油约20克，食盐适量。长期的清淡饮食，使我保持了旺盛的食欲。而米面等主食控制在350～400克，食勿过量，每顿八成饱，尤其是晚餐要少吃。经常吃豆制品、豆类菜、瓜类、叶菜类、洋葱、胡萝卜、蘑菇、西红柿和紫菜等。尽量不吃那些高胆固醇、高脂肪的食品，如动物内脏、鱼子、皮蛋等。每天吃些水果，适当多饮茶水，保持肠道通畅。
二、常食佳品――黑木耳
经常吃黑木耳会稀释血液，不易患脑血栓、冠心病等。我于2003年起长期坚持食用黑木耳，受益不小。黑木耳以春季的为最好，膨胀率大，朵朵肥厚，杂质少。食法很简单，先加冷水将其发开，弃杂洗净，然后弃水用火蒸熟，冷后放入冰箱冷藏，每天就餐前在菜里或面食中加入一些。日需干黑木耳5～8克。
三、又服珍品――蜂胶
我长期从事养蜂工作，对蜂产品的医疗保健作用有所了解，因而联想到被专家誉为“紫色黄金”和“血管清道夫”的蜂胶。蜂胶的主要成分为黄酮类化合物，有净化血液、软化血管的作用，能降低血脂、血压、血糖和血黏度，是抗癌的重要辅助品，也是天然的抗氧化剂。于是我着手用蜂胶末、食用酒精(比例为1:4，经常摇动促其溶解)自制蜂胶酊。每晚临睡前用注射器计量，加温开水稀释后口服，每天服纯蜂胶约1克。美中不足的是味道不好，口服有些难度，再加上自制蜂胶酊经多次提取上层酊汁后，很难计算含蜂胶的量。2006年起我改服蜂胶片，每天清晨和晚上睡前空腹共服8片，比自制蜂胶酊要好。
四、有氧运动 适度锻炼
生命在于运动。对老年人来说，生命在于适当运动，做到动静结合，劳逸结合。适度锻炼，可以改善老年人的生活质量和自理能力。因此，我每天一般在傍晚散步40分钟以上。在散步同时做深呼吸运动，不断吐故纳新。这种有氧运动对身体十分有利。平时生活环境也注意空气流通，这样可以增加血液中的氧气，清醒头脑，焕发精神。另外，我还饲养了少量蜜蜂，借以陶冶情操，劳动身心，增加户外运动量，使精神有所寄托。此外，还做些力所能及的家务劳动。现在对我来说，健康长寿已经初步获得成效。今后要不断坚持，相信暮年晚景将会更加幸福美满。