时间：2023-05-30 09:25:30
开篇：写作不仅是一种记录，更是一种创造，它让我们能够捕捉那些稍纵即逝的灵感，将它们永久地定格在纸上。下面是小编精心整理的12篇鹿茸的作用，希望这些内容能成为您创作过程中的良师益友，陪伴您不断探索和进步。
【摘要】文章探讨了鹿茸多肽对β淀粉样蛋白诱导脊髓神经元细胞凋亡的保护作用。
【主题词】鹿茸多肽作用分析
脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是外科常见的创伤，其年发病率逐年升高。在脊髓损伤中，除了原发的物理打击因素造成神经细胞损伤外，已发现损伤区及临近部位的神经细胞存在迟发性的死亡现象，这种死亡与常见的坏死不同，表现为一种程序性死亡（细胞凋亡），细胞凋亡可能参与了脊髓损伤的病理生理过程。caspase3是凋亡过程中最重要的蛋白酶，降低其的表达有助于脊髓损伤的修复和再生。鹿茸系鹿科动物梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化密生绒毛的幼角。关于鹿茸多肽混合物，近两年，有学者通过实验证明鹿茸多肽对脊髓损伤后的神经细胞有保护作用，本实验应用鹿茸多肽作用于β淀粉样蛋白诱导的脊髓神经元细胞凋亡的保护作用，以进一步阐述其对脊髓神经细胞保护作用的机理。
一 实验材料
15d孕鼠购自吉林大学实验动物中心；DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶购自invitrogen公司；细胞培养瓶和培养板购自Castar公司；神经生长因子（NGF）购自Sigma公司；鹿茸多肽由长春中医药大学惠赠；β淀粉样蛋白(Aβ25-35)、四甲基偶氮唑盐(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)购自(Sigma公司)；兔多克隆caspase3抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
二 实验方法
1 凝聚态Aβ25-35的制备用超纯水将冻干的Aβ25-35溶解配成100 μmol／L的储存液，于-20℃ 保存，使用前配成所需浓度，于37℃孵育24 h备用。
2 胎鼠脊髓细胞悬液制备及培养取孕15d大鼠，10%水合氯醛腹腔麻醉后，无菌状态下取出胎鼠。用Hank’s液冲洗数遍后，放于培养皿中。在解剖显微镜下从背侧完全暴露脑干以下整条脊髓，从正中沟处用钨丝针切除双侧脊髓的后外侧部。将取下的脊髓腹侧组织，经Hank’s液冲洗后，剥去表面的血管等，用显微剪子细剪切成糜状，越细越好；然后用0.25%胰酶37℃消化20min后，用吸管轻轻吹打数次，经200目滤网过滤，离心弃上清，用含15%胎牛血清培养基以1×106/ml接种于塑料培养瓶中。
将细胞培养在含15%胎牛血清、100U/ml氨苄青霉素及100U/ml链霉素的DMEM培养基中，于37℃、饱和湿度、5 %CO2浓度下培养，2～3d 换液一次。实验均取对数生长期细胞，实验前12 h细胞换用无血清培养液，观察不同浓度Aβ25-35的作用。
3 MTT比色法检测细胞活力观察不同终浓度(0、5、10、20、25、30μmol／L)的Aβ25-35作用24 h后，细胞活力的变化，细胞接种于96孔板24 h后加入不同浓度的Aβ25-35作用24 h，每个浓度设4个复孔L，同时设与实验孔平行的空白对照，最后比色时以对照孔调零。共同孵育24 h后更换培养基，每孔加入180μl的培养基和20μl的MTT(5 mg／ml)，置37℃、5％CO2培养箱培养4 h，弃培养液，每孔加入200μl DMSO，37℃孵育30 min，至结晶物充分溶解。在多功能酶标仪上测定570nm的吸光度(D570)，其与对照吸光度的比值作为相对细胞活力。
4 流式细胞仪检测将细胞接种于24孔板，待达到80％融合时，按下列分组进行实验：A.对照组，B. Aβ25-35（25μmol/L），C. Aβ25-35（25μmol/L）+鹿茸多肽（400mg/ml）［3］，D.照射Aβ25-35（25μmol/l）+NGF（20ng/ml）组。各组均6复孔。将24h以后各组细胞用0.25%胰蛋白酶消化，1000 r/min 离心5min，弃上清；用500μl 5mmol/L EDTA/0.01mol/L PBS洗涤细胞；再加入50μl 10g/L RNaseA，室温下孵育30min；最后加入500μl 100mg/LPI染色液，旋转混匀，置4℃避光孵育30min后，流式细胞仪测定。
5 免疫细胞化学染色将1cm×lcm盖玻片经浸酸及消毒等处理后，放入24孔培养板中，加入10倍稀释的多聚赖氨酸液，置于CO2 孵箱中1h；弃去多聚赖氨酸液，用DMEM培养基洗一次，将各组细胞悬液分别接种于各孔，继续培养24h；弃去原培养液，用37℃预热的0.1mol/L PBS轻洗3次；余按免疫组织化学试剂盒说明操作。
三 统计方法
应用统计分析软件SPSS14.0分析数据，数据以均数±标准差(x±s)表示，两两比较采用t检验，P
四 结果
1 脊髓神经元细胞的培养及鉴定单细胞悬液接种后第2d，细胞聚集成团状，第3d出现大量悬浮的neurosphere(约30～60个细胞)，而且neurosphere越来越多。到第7d细胞胞体十分饱满，轮廓清晰，有的细胞可见明显的鸟眼状细胞核，也有的细胞伸出树枝状突起，突起相互连成网络。用神经元特异烯醇化酶(NSE)标记神经元。镜下观察，可见实验组细胞胞体饱满，突起明显并连成网状。
2 流式细胞仪检测结果以400mg/ml剂量观察鹿茸多肽对Aβ25-35诱导脊髓细胞凋亡的抑制作用，并用NGF作为对照。结果显示，Aβ（25μmol／L）+鹿茸多肽（400mg/ml）组细胞凋亡百分数是19.35±6.74与Aβ组凋亡百分数37.42±12.55比较，有显著性差异，P
3 免疫组化检测caspase3结果caspase3阳性细胞胞质着棕色。结果显示：对照组无caspase3阳性染色的细胞；Aβ（25μmol／L）+鹿茸多肽（400mg/ml）组caspase3阳性细胞数减少，比单纯Aβ（25μmol／L）组少，其作用与NGF阳性对照组比较无差异，鹿茸多肽对脊髓细胞凋亡具有抑制作用。
五 讨论
脊髓损伤的治疗是神经科学领域内一道尚未解决的难题，虽然人们采取了许多种方法促进损伤后的脊髓轴突再生修复，但存在许多限制因素，很难达到理想效果，许多学者进行了深入研究脊髓神经组织损伤后再生不良，其重要原因是伤后继发性损害不断加重所致，而细胞凋亡是继发性损伤的关键，抑制细胞凋亡是阻止或减少继发性损伤，保护神经功能的治疗所在。
在春节期间，李先生接连收到两份亲朋好友送来的鹿茸。他常听人说，鹿茸是一种很好的补药，如果使用得当，可起到温补肾阳、延年益寿的作用。但他在使用鹿茸进补时也感到有些为难：自己的体质是否适合吃鹿茸，怎样吃鹿茸才能取得理想的补养效果呢?
鹿茸是梅花鹿或马鹿还没有骨化的幼角，有“补阳第一药”的盛誉。中医认为，鹿茸是大热滋补之品，具有补气养血、消除疲劳、补精髓、助肾阳、强筋健骨、延年益寿的功效，适合有体质虚弱、未老先衰、畏寒、手足发凉、胃脘冷痛等虚寒症状的人服用，尤其适合肾虚者服用。临床研究发现，鹿茸中含有25种氨基酸和多种维生素，具有增强免疫力、造血功能及促进创伤愈合的作用。有报道称，鹿茸还有很好的提升白细胞和红细胞水平的作用。因此，贫血患者及在进行放疗或化疗后血象较低的癌症患者可吃一些鹿茸进行调治。下面就介绍4种使用鹿茸进补的方法：
将鹿茸、人参和肉类食物一起煲成肉汤食用
这种使用鹿茸进补的方法最为常见，效果很不错。鹿茸肉汤的制作方法是：取鹿茸片5～10克，鸡肉(或鸭肉、鹅肉、鸽肉、羊肉)120克，红参(或高丽参)12克，食盐、味精等调味料各少许。将上述原料一起放入电饭煲或沙锅内加适量的清水炖煮3～5个小时，调入食盐、味精即成，可随意服用。
将鹿茸制成鹿茸茶服用
研究发现，将鹿茸制成鹿茸茶服用，其所含的药物成分能够迅速、完全地被人体吸收。鹿茸茶的制作方法是：将0.5～1克的鹿茸片放入水杯中，用适量的开水冲泡后服用(鹿茸片也应嚼食服下)，可隔日服1次。鹿茸茶具有较好温补肾阳的作用，肾阳偏虚者坚持服用此茶数月必有助益。
将鹿茸和粳米一起煮粥服用
取鹿茸片(或鹿茸粉)0.5～1克，粳米适量。将粳米入锅加适量的清水熬煮至烂熟，调入鹿茸片再煮片刻即成，可每日服1次。
将鹿茸制成鹿茸酒服用
对于喜欢饮酒的人来说，将鹿茸制成药酒服用是非常适宜的。制作鹿茸酒应采用冷浸法，具体的做法是：将30～印克的鹿茸和500～1000毫升的白酒一起放入瓷瓶中，置于阴凉处密封保存，每隔2～3天晃动一下酒瓶，连续浸泡半个月即成，可每次饮用10～20毫升。酒量不大的人，也可将少量的此药酒兑入等量的白开水中稀释后饮用。待此药酒全部饮完后，可在瓷瓶中添加1000毫升的白酒，将剩下的鹿茸渣再浸泡半个月后饮用。
需要注意的是，没有阳虚症状的年轻人若使用鹿茸进补，可能会出现全身燥热、鼻出血、口干唇裂、口舌生疮等不良反应。有五心烦热、口干、口苦、咽喉干燥或干痛、大便干燥、小便黄赤、目赤、易怒、女性月经量多、血色鲜红、舌红、脉细等症状者或患有高血压、糖尿病、感冒、肝肾功能不全、胃炎及消化性溃疡者不宜服用鹿茸进补。
[关键词]鹿茸；活性成分；鹿茸多肽；鹿茸多胺
中图分类号：G154.56 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）25-0397-01
对于鹿茸来说，人们并不是十分陌生，多数的研究人员都对其化学成分以及药理作用等方面进行深入研究，并且取得了一定的成绩。在实际的研究工作中可以看出，其化学成分比较多，除了氨基酸类和脂肪酸之外，还有相应的含氮类化合物等等。所以说，经过提炼之后可以有效的改进人体的心血管疾病，增强身体的免疫力。另外，鹿茸的药理活性也值得研究，在深入研究的过程中给临床诊疗工作提供了重要的数据支撑。
1、鹿茸多肽
1.1从鹿茸多肽的存在形态上看，主要是在体外进行分化，主要是从神经干细胞朝着神经元的趋势发展。相关的学者对鹿茸多肽的结构进行研究，发现其对神经元干细胞的发展起到一定的促进作用，而且其自身的营养成分也比较丰富。在促进神经元干细胞分化的过程中还可以对多因子成分进行调节，这样才能够协调神经系统的运行。
1.2在提升人体皮肤愈合速度的过程中可以采用马鹿茸多肽成分，主要是通过促进人体表皮细胞的增殖来促进伤口的愈合程度。在进行这一研究的过程中，相关的学者主要是应用家兔和乳鼠等动物来进行的实验。在其体外加入相应的天然鹿茸多肽以及合成鹿茸多肽惩罚呢，就可以加速动物表皮的修复程度。可见，鹿茸多肽可以促进人体表皮细胞的愈合，实现表皮细胞的增殖。
1.3鹿茸多肽-PLGA复合膜结构可以提升大鼠周围神经损伤的修复程度。主要是这中鹿茸多肽的成分可以深入到复合膜中，使得其中的成分进行缓慢释放，直接作用到周围的神经系统。由于其生物活性相对较强，所以可以为临床诊疗提供相对比较科学的依据。
1.4鹿茸多肽可以促进神经的再生，促进神经系统的修复功能。在对鹿茸对人体的神经损伤的修复程度进行研究的过程中可知，鹿茸多肽可以促进神经的再生，并且可以加快神经系统的生长，可以在修复的基础上完全恢复功能。
1.5鹿茸多肽可以对软骨细胞的体外凋亡现象进行抑制，为了对这一内容进行研究，主要是通过对兔类的白细胞进行观察和研究，然后深入到兔类的骨髓部位。对凋亡的情况进行检测。然后采用鹿茸多肽成分，就可以提升蛋白酶的活性，进而环境骨髓干细胞的凋亡形式进行环节和控制。提升生命体的成活率。可见，鹿茸多肽的活性成分比较明显，而且对其进行的药理学的研究工作还在继续。
2、鹿茸多胺具有抗氧化作用
我国的多数学者都对鹿茸多胺进行了深入研究，经过研究可以看出，通过进行体外和体内的测定，鹿茸多胺可以对鼠类的过氧化反应产生严重的影响。不仅如此，还可以对体外的NADPH进行高效抑制。在体内还可以对四氯化碳成分的扩散程度进行抑制，形成氧化还原反应。这就是鹿茸的抗氧化作用的发挥。
3、鹿茸精
鹿茸精从其本质上看，可以对小鼠的抗衰老程度进行控制，而且通过实验来对鹿茸精进行实验，可见其活性程度比较强。可见，鹿茸精对MAO活性以及蛋白质合成也产生了一定的促进作用。对于老鼠来说，其作用明显高于青年小鼠。
4、鹿茸的活性物质
4.1 蛋白多肤类化合物
鹿茸的再生、迅速增长是依赖于一系列内在激素和生长因子，近年来已经分离出能够促进骨、上皮、血管及神经组织生长的活性蛋白。如碱性磷酸酶、胰岛素样生长因子、碱性成纤维生长因子。引、促生长释放因子、神经生长因子、表皮生长因子、转化生长因子及多种鹿茸多肽，已建立了一种高效可行的从鹿茸中提取单胺氧化酶抑制剂、胰岛素样生长因子的分离技术路线。
4.2 甾体类化合物
鹿茸的抗炎、强心、补肾及激素样作用都与其所含甾类衍生物密切相关。鹿茸中含有雄性激素、雌激素和孕激素等甾体化合物。相关学者采用超临界二氧化碳和溶剂萃取技术从鹿茸中提取天然性激素的技术路线。
4.3 多胺类化合物
鹿茸中的多胺类化合物也是一类重要活性成分，它们能刺激核酸和蛋白质合成。鹿茸尖部的多胺含量较高，且从上到下递减。
5、鹿茸的药理作用
鹿茸具有广泛的药理作用，其具有促进生殖系统发育、增强免疫功能、促进细胞增殖和伤口愈合、抗炎镇痛的作用，已获现代药理学的多方面验证。近年来的研究热点主要集中在鹿茸对心血管系统、神经系统的作用以及抗关节炎、抗氧化、抗疲劳和抗衰老等方面。
5.1 对心血管系统的作用
鹿茸醇提物对心肌梗死模型大鼠心肌损伤有一定的保护作用。鹿茸醇提物能减小心肌梗死面积，减轻心肌损伤的程度。缩小坏死区范围，减少内皮素释放，减轻缺血区血管收缩，改善冠脉局部血液循环，从而延缓和减轻缺血缺氧对血管内皮细胞和心肌细胞的损伤过程，对血管内皮损伤起良好保护、修复作用。
5.2 对神经系统的作用
鹿茸中存在大量的NGF、IGF。NGF是一个典型的靶源性神经营养因子，是神经元的存活和维持所必需，调节神经元的表型及神经元的连接，参与神经再生。IGF具有多种生理功能，特别是影响细胞的增殖、分化和存活，在个体生长发育中发挥重要作用。IGF能增强神经元的分化。IGF和IGF均可作为肌源性神经营养因子促进神经元突起生长，刺激细胞增殖、分化、成熟和存活。
5.3 抗关节炎的作用
鹿茸的水提物（DAA）富含抗氧化多酚，能够调节骨循环治疗关节炎。药物诱导的关节炎模型路易鼠注射DAA后，其骨无机质含量、强度、骨小梁形成数的减少幅度均小，破骨细胞的增加幅度也明显较小。在关节炎的慢性期和急性期DAA都能够消除关节的肿胀和畸变，并且在急性期结束后立即给药还能够延缓关节炎的发展。进一步的动物实验证明DAA还能够抑制细胞质、溶酶体中的蛋白酶和基质蛋白酶类的产生，同时由自由基引起的对关节液蛋白的损害也下降了20%。因此推断它是通过降低蛋白水解酶和自由基的活性达到治疗关节炎的作用。
5.4 其他
鹿茸神经节甙酯能促进小鼠脑内蛋白质合成，对抗记忆破坏药物的作用，对小鼠记忆获得、记忆再现、记忆巩固均有明显的促进作用。鹿茸提取物对东莨菪碱及亚硝酸钠造成的两种学习记忆障碍小鼠的学习记忆能力均有明显的改善作用。
6、总结
近年来、随着分离纯化技术和分子生物学的不断发展，已经从鹿茸中分离得到了具有不同药理活性的组分，对部分活性物质进行合成或者克隆表达，并初步研究了其结构与功能的关系。少数活性物质已经初步阐明其作用机制，但仍不够深入。鹿茸中还有许多活性成分没有得到有效的分离，因此如何应用系统生物学方法获得新的活性物质、研究其新的功能与作用机制，仍需要进一步的深入探索。
参考文献
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鹿茸为梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角，前者习称“花鹿茸”，后者习称“马鹿茸”。野生梅花鹿为国家一级重点保护动物，马鹿为国家二级重点保护动物。鹿茸，不仅是一味中药，也是贵重的馈赠滋补品。
中医认为，鹿茸性温，味甘、咸。归肾、肝经。有壮肾阳、益精血、强筋骨、调冲任、托疮毒之功效。用于阳痿滑精、宫冷不孕、神疲、畏寒、眩晕耳鸣耳聋、腰脊冷痛、筋骨痿软、崩漏带下、阴疽不敛。现代研究发现，鹿茸含19种以上氨基酸、类脂、糖类、多胺类等化合物以及钙、磷、铁等二十余种元素，具有强壮、抗脂质过氧化、延缓衰老、镇痛镇静、益智、降压、抗心律失常、增强免疫、促进物质代谢、促进创伤愈合、抑制胃溃疡、增强等多方面的作用。
梅花鹿家养于吉林、黑龙江、辽宁、河北、北京、天津、江苏、四川、上海等地，马鹿家养于新疆、青海、黑龙江、内蒙古、四川西部、云南等地。 雄鹿从第三年开始锯茸，“二杠”(具一个分枝者)每年采2次，第一次在清明后45~50天，习称“头茬茸”，第二次约立秋前后，习称“二茬茸”；“三岔”(具二个分枝者)每年采收1次，通常在7月下旬锯取。鹿茸需经加工方可用于治病和保健，一般取鹿茸，燎去茸毛，刮净，以布带缠绕茸体，自锯口向小孔灌入热白酒或黄酒，并不断添酒，至润透或灌酒稍蒸，横切薄片，压平，干燥；鹿茸粉则取鹿茸，燎去茸毛，刮净，劈成碎块，研成细粉。
【药材性状】
一支鹿茸的切片部位不同，其性状、名称和质量也不同。
以梅花鹿为例，其鹿茸顶部细嫩，呈棕黄色，光亮，皮内半透明黄白色，蜡状油润，制成的是“血片”或“蜡片”，为类圆形或椭圆形薄片（厚0.4～0.5毫米），直径2厘米以内，断面淡红棕色，半透明，微显光泽，边缘有一红棕色或棕色环，无骨质，质坚韧。鹿茸的中上部切片称 “头沙片”，接下的部位为“二沙片”，统称“粉片”，为圆形或类圆形略厚片（0.5～1毫米），直径2～3厘米，中间密布蜂窝状细孔，半透明，角质，无骨质或略具骨质，边缘有黄褐色环，宽1～2毫米，周边粗糙，偶可见残留的毛茸。气微腥，味微咸。
马鹿茸血片、蜡片为圆形薄片，表面灰黑色，中央米黄色，半透明，微显光泽，外皮较厚，周边灰黑色，质坚韧。气微腥，味微咸。粉片中央有细蜂窝状小孔，外皮较厚，周边灰黑色，质坚脆。
鹿茸粉为灰白色或黄色粉末。气微腥，味微咸。
【小窍门】
正品鹿茸片入水不变形，加热搅拌不破碎，煮沸不软不糊，一些伪品入水软化变形，加热搅拌则破碎，煮沸会成糊状。
【辨别真伪】
因为鹿茸资源稀少，不法分子为牟利将伪劣品混迹市场，影响大众的健康。
常见鹿茸伪品：
1. 用鹿角片冒充，呈圆形和半月牙形，中部焦黄色，孔大且多破裂，有些孔内有黑褐色填塞物，白色，边缘角质化程度高，甚至会有齿状突起；
2. 将药厂提取过的鹿茸粉晒干，用鸡蛋清调和后用鹿皮包裹，加工成薄片，外观无蜂窝状，口尝粘舌，并能化掉；还有将酒泡或工业提取过的鹿茸片（有效成分被抽提过），除去酒气，冒充鹿茸片。
3. 用动物皮毛（如老鼠皮）包裹其他动物骨，或骨胶、松香经切制而成，有的以猪皮包裹面粉、猪血混合物，还有用小野猫皮包裹淀粉、猪肝、骨胶、琼脂混合物再切片。呈类圆形片状，大小不等，较重，不易折断，断面棕紫色，无蜂窝状的细孔，有的有粗孔，偶有凹点，外皮毛有接缝且可剥离，腥气浓；有的外皮为真品鹿茸片，里面填充其他物质。
4. 以鹿科其他动物的幼角，如驼鹿茸、驯鹿茸、水鹿茸、白鹿茸、狍茸、麂茸、白唇鹿茸、麋鹿茸、海南坡鹿茸混充鹿茸。
5. 保健品市场有种棕褐色冒牌货，片子厚实，却易碎裂，外皮无茸毛，中间没有蜂窝状小孔，色泽区别明显，过渡不自然。遇到碘试剂变蓝紫色，是用淀粉、色素等加工制成的伪品。
劣质品：用化学药水，如漂白水处理鹿茸片，使之特别净白，口尝无味，但有荧光；将正品中掺加一些提取过的茸片，如果仔细检查，会发现有的茸片色淡白，茸灰色，外皮不黑，茸片粉性差，蜂窝状小孔大或破裂，无腥气，味淡，不咸。
最好到正规药房购买，并注意预防鹿茸及其饮片发霉或生虫，将其充分干燥后与适量花椒放置通风干燥处存放。
【如何服用】
在使用前，建议先请中医辨证，切不可盲目用药。
鹿茸作为名贵细料药，一般宜研末，每次1~2克，用温水或温黄酒吞服或单独炖服，避免浪费；或配以其他药粉制丸，而不与其他药味共煎；或取茸片2克、红枣1枚、生姜1片、米酒少许装入有盖的杯中，加半杯水，隔水文火炖蒸2～3小时，服药汁；也可泡酒饮用，一般500毫升酒用5克鹿茸。
鹿茸3～5克与瘦肉、家禽同炖，分次食用后可增强，能治疗腰膝酸软、血虚晕眩、精疲力乏等证。
关键词 鹿茸；加工技术；原理；工艺
中图分类号 R282.74 文献标识码 B 文章编号 1007-5739（2013）05-0309-01
茸鹿是经济价值很高的药用动物，特别是鹿茸具有补中益气、壮阳、生精、调血脉、益智、散瘀、消肿、活血等功效，现代医疗实践中被广泛用于内科、外科、妇科、儿科等多种疾病的治疗中。鹿茸加工就是将鲜鹿茸脱水干燥，加工成干品的商品茸，以便于保存和运输。鹿茸加工技术的好坏直接影响产品的质量和经济效益，是养鹿生产中极为重要的环节。
1 排血锯茸加工技术
1.1 煮炸方法
1.1.1 第1排水煮炸。首先将水煮沸，浸入鹿茸烫5～10 s，注意全茸都要浸入，只露锯口。然后将烫过的鹿茸取出，检查排除暗伤。对于有伤痕或者虎口封闭不严等情况，应当采取措施防止其在煮炸中破裂，增强茸体的抗热能力，需要敷蛋清面处理，并下水达到固着封闭的目的。做好上述处理后进入第1排煮炸。最初1～5次煮炸的时间应当逐次延长。为了促进皮血的排出，在沸水中振荡和推拉茸干上半部以及嘴头部分，带水搅拌，2～3次煮炸后，继续下水，直至茸根部分，切忌使锯口浸入水中。此过程中可以进行静水煮炸或者动水煮炸，即轻轻地做往复推拉和划圆运动。随着下水煮炸次数和时间的增加，茸体内部受热，至4～5次下水时，血液开始从锯口排出，此时应用长针挑锯口周围的皮血管，将血栓拔出，并向茸髓部位深刺数针。为了利于排血，也可以用毛刷蘸温水刷洗锯口。逐渐延长下水煮炸的时间，当锯口排完大血、流出血沫时，第1排水煮炸即可结束[1]。
1.1.2 第2排水煮炸。完成第1排水煮炸后放凉降温，如果茸皮不烫手便可进行第2排水煮炸。第1次与最后一次煮炸的时间相同，其他的煮炸时间逐渐缩短。有的鹿茸，在第1排水时已经基本煮好，因为其皮薄、眉枝细老、抗热力差，因此在第2排煮炸过程中只需煮茸尖和主干上半部，注意在水下、水中间和出水前把眉枝和茸根提出水面，即提根煮头。为了避免眉枝撸皮，可事先在眉枝尖敷蛋清面。当锯口排出的血沫由多变少，颜色也由深红变为淡红，继而出现粉白沫时，说明全茸基本熟透，茸内血液基本排净，即可结束第1次水煮炸加工。将鹿茸全部（连同锯口）入水煮炸10 s左右取出，剥去蛋清面，用毛刷蘸温水刷去茸皮上附着的油脂污物，再用柔软纱布或毛巾彻底擦干，连同茸架一起送至风干室中，放在通风良好的台案上风干。
1.2 经回水烘烤、风干和煮头等工艺后制得成品茸
把鹿茸经过第1水煮炸加工后，第2～4天继续煮炸称为回水。回水又可分为第2水、第3水和第4水。回水烘烤的主要目的是防腐、消毒、加速干燥。每次回水后都要在68～75 ℃烘干箱中烘烤40～60 min，以促进鹿茸的干燥。烘烤以后送风干室冷凉风干。经过回水（4次煮炸、3次烘烤）后的鹿茸，含水量比鲜茸减少50%以上，以后靠自然风干为主，适当的进行煮头和烘烤。最初5～6 d每隔1 d煮1次茸头，烘烤20～30 min后自然风干；以后便可根据茸的干燥程度和气候变化情况不定期地煮头与烘烤，避免空头与瘪头。鹿茸每次水煮和烘烤后都应送入风干室脱水风干。每天应由专人对风干的鹿茸检查1遍，对茸皮发黏、茸头变软的鹿茸及时回水和烘烤。特别是在空气湿度大时，更应注意增加煮炸或烘烤次数，防止糟皮。风干室必须通风干燥，阴雨天及时关好门窗，随时扑灭苍蝇和昆虫[2]。
2 带血锯茸加工技术
带血茸是将茸内血液全部保留在茸内的成品茸，由于茸内流体有效成分不流失或少流失，不仅提高了产品质量，而且鲜茸的干燥率增加2.4%～3.2%，提高了成品率。带血茸加工是一项操作复杂、要求严格的技术，包括封锯口、称重、测尺、编号、登记、洗刷茸皮、煮炸与烘烤和煮头与风干等过程。收茸后的前4 d每天煮炸1次，烘烤2次。从第5天开始，连日或隔日回水、煮头或烘烤1次。到鹿茸8成干时可视情况不定期煮头、烘烤。煮炸时间、烘烤时间与温度视茸的重量、茸形结构、鹿茸种类、茸体分杈处愈合程度、茸皮厚薄及茸质老嫩程度灵活掌握。对分杈处皮薄、封口不严以及其他皮薄处涂蛋清面。破损、外伤应做包扎或涂蛋清面处理。
3 双电子自动控制远红外线烤箱加工鹿茸新技术
该技术采用现代先进电子技术，根据鹿茸结构、加热性质和工艺制作而成，具有充分发挥远红外线加热效率高、节约能源、脱水快等特点[3-4]。应用该技术程序简便，工效高，成品茸质量好，能够达到商品规格要求。其主要工艺流程如下：新鲜鹿茸封锯口洗刷去污烫煮茸皮冷凉双电子远红外线加热烘干冷凉回水双电子远红外线加热烘干煮头造型成品茸。
4 冷藏保鲜、远红外线鹿茸加工技术
该技术应用现代先进技术，改进传统鹿茸加工技术，具有程序简便、工效高、节省能源、成品茸质量好等特点[3]。主要工艺流程为：新鲜鹿茸封锯口（排血茸排血）烫洗茸皮吹风冷凉冷藏保鲜远红外线加热解冻吹风冷凉回水远红外线烘干吹风冷凉煮头造型成品茸。
5 活性鹿茸加工技术
5.1 原理和设备
活性鹿茸加工技术原理是采用现代生物制品冷冻保鲜和干燥原理，对新鲜鹿茸进行冷冻保鲜与真空脱水干燥的一种新型加工方法。与远红外线烘烤沸水煮炸加工鹿茸方法相比，其加工周期仅是传统加工方法的1/20～1/15，节省人力75%，节省能耗68%，减少破损率97%，增加干茸重3.8%～4.2%。冷冻保鲜茸色泽鲜艳，茸形完整，茸质优良。活性冻干茸茸皮松软，色泽鲜艳，茸头饱满，开条含血充足，血色鲜红，不酸败，无异味，无焦化。比传统方法加工的鹿茸氨基酸总含量高27.59%，谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GPT）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、谷氨酰转肽酶（R-CT）、胆碱酯酶（CHE）等7种酶活力高2.5～250.0倍。活性鹿茸加工设备：大规格冰箱、水浴消毒器和真空冻干机。
5.2 活性鹿茸加工工艺
5.2.1 冷冻保鲜。鲜茸称重登记冷冻贮藏去污消毒冷冻贮藏冷冻保鲜。将收取的鲜茸锯口向上迅速送入加工室称重登记，然后放入冰箱内冷冻贮藏。在-18～-15 ℃可冷冻贮藏保鲜1～2个月；在-24～-18 ℃可冷冻贮藏保鲜3～8个月。
5.2.2 冻干加工。新鲜鹿茸或冷冻保鲜茸速冻脱水活性茸。将鹿茸放入预冷的冻干箱内，箱内真空度0.67～1.33 Pa，板温-48～-38 ℃，冷冻脱水72 h，即可获得活性冻干茸。
5.3 活性鹿茸加工新技术的工艺特点
采用冷藏保鲜方法可将零星收取的新鲜鹿茸按照不同规格和种类分别冷冻贮藏，实现有计划地批量加工作业，从而提高了加工效率，节省人力和能源[5-8]。在高真空条件下，使鲜茸内的水分速冻成冰，直接升华脱水干燥成干品活性茸，能够最大限度地保持茸内的有效成分及其生理活性。因此，活性鹿茸质量更佳。
6 参考文献
[1] 马丽娟.特种动物生产[M].北京：中国农业出版社，2006：159-196.
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【关键词】绵毛鹿茸草；次生代谢；抑菌活性
Abstract：［Objective］ToanalysethecontentofsecondarymetabolismsandantibacterialactivityofMonochasmaSavatieriFranch.exMaxim.［Method］Thecontentsof5secondarymetabolitessuchasflavonoid，chlorogenicacid，tannin，phenolandanthraquinonesinthedifferentextractsofMonochasmasavatieriFranch.exMaximweredetermined.［Results］Itshowedthattheantibacterialactivityoftheliquidsextractedwith70%ethanol，60%acetoneonStreptococcuspneuoncae，Staphylococcusaureus，EscherichiacoliandBacillussubtilisweremoderate，whilethatoftheliquidsextractedwithwaterwasweak.Theliquidsextractedwith70ethanolwerethebetterinhibitorofStreptococcuspneuoncaeandStaphylococcusaureus，whiletheliquidsextractedwith60acetonewerethebetterinhibitorofEscherichiacoliandBacillussubtilis.［Conclusion］TherewaspositivecorrelationbetweentheantibacterialactivityoftheliquidsofMonochasmasavatieriFranch.exMaximonEscherichiacoliandthecontentofthechologenicacid.TherewasalsomarkedcorrelationbetweenthatofBaillussubtilisandanthraquinones.
Keywords：monochasmaSavatieriFranch.exMaxim；secondarymetabolism；antibacterialactivity
绵毛鹿茸草(MonochasmasavatieriFranch.exMaxim)为唇形科鹿茸草属植物，别名白头翁、千重塔、白头毛，分布于浙江、福建、江西，常生于山坡向阳处杂草中或马尾松林下［1］。主要功能为清热解毒，祛风行气，凉血止血，祛痰，用于感冒，慢性气管炎，肺炎，咳血，吐血，便血，牙龈炎，牙髓炎，乳痈，痈肿，小儿口疮，风湿关节痛等。本文对绵毛鹿茸草的不同提取液中总黄酮、总绿原酸、总生物碱、总皂甙及其对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌抑菌活性进行研究，并探讨这五类次生代谢产物与抑菌活性之间的相互关系。
1实验与方法
1.1实验材料和仪器绵毛鹿茸草于2007年6月采自浙江千岛湖姥山林场的山坡上。采集时将棉毛鹿茸草全草用湿布包裹，塑料袋封装，立即带回实验室。将材料洗净，防入105℃恒温干燥箱中固定25min，再在80℃条件下干燥24h，研磨后经过0.25mm金属网筛，将烘干样品放入磨口广口瓶，置于干燥器中保存，备用［2］。标准品芦丁、绿原酸、小蘖碱、人参皂甙Rb，1，8二羟基蒽醌购自中国药品生物制品检定所，所用试剂均为分析纯。四种菌种均由浙江台州医院无偿赠送。培养基为牛肉膏培养基。吸光度的测定在T6新世纪紫外-可见分光光度计上完成。
1.2绵毛鹿茸草提取液的制备称取绵毛鹿茸草粉末3份，每份1g，其中2份分别用70%乙醇、60%丙酮在80℃水浴中回流6h，进行提取，离心取上清液，并清洗残渣2次，离心取上清液，将3次上清液合并；另1份用沸水进行提取0.5h，离心取上清液，反复多次，直至提取液色淡，并将几次沸水提取液混合。将乙醇、丙酮、沸水提取液的浓缩，并调节pH至7.0，然后用蒸馏水定容至1ml，放入4℃的冰箱中待用。
1.3次生代谢产物含量的测定
1.3.1总黄酮的提取与测定［3］取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，挥去溶剂后用甲醇定容至25ml，取其中1ml，置10ml离心管中，加入4ml0.1mol/L三氯化铝-甲醇溶液，摇匀，在420nm处测定吸光度。以芦丁为标准品，其回归方程为y=9.6101x+0.0147，R2=0.9991。
1.3.2总绿原酸的提取与测定［4］取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，挥去溶剂后用95%乙醇定容至25ml，取1ml，置25ml容量瓶中，加入0.2mol/LHCl定容至刻度，摇匀，以试剂空白为对照，在324nm处测定吸光度。以绿原酸为标准品，其回归方程为y=66.064x+0.0134，R2=0.9995。
1.3.3总生物碱的抽提与测定［5］取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，挥去溶剂后用90%乙醇定容至25ml。取提取液1.4ml置于精密加入4ml氯仿的分液漏斗中，加入7.2×10-4mol/L溴甲酚绿pH=4.42缓冲溶液0.6ml，振摇1min，静置1h，取澄清的氯仿液，以试剂空白作对照，于417nm处测定吸收度。以小檗碱为标准品，其回归方程为y=6.6x-0.0102，R2=0.9999。
1.3.4总皂甙的提取与测定［6］取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，挥去溶剂后用甲醇定容至25ml，取1ml置25ml容量瓶中，挥去溶剂后，加入0.2ml5%香草醛冰醋酸溶液，再加入0.8ml高氯酸，于70℃水浴加热20min，取出，冷却，加5ml冰醋酸，以试剂空白作对照，于560nm波长处测其吸光度。以人参皂甙Rb为标准品，其回归方程为y=27.763x+0.0901，R2=0.9716。
1.3.5游离蒽醌的提取与测定［7］取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，放入10ml离心管中，水浴蒸干溶剂，加入5%醋酸镁乙醇溶液5ml，以试剂空白为对照，在498nm处测定吸光度。以1，8二羟基蒽醌为标准品，其回归方程为y=47.464x+0.0012，R2=0.9996。
1.4抑菌活性的研究以滤纸琼脂扩散法测定绵毛鹿茸草三种溶剂提取物对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌效果。将经过记数的菌液稀释后，控制100μL含104cfu，涂平板。将灭菌后滤纸片（直径为6mm）浸泡在棉毛鹿茸草提取液中。在已涂菌的平板上放置上述滤纸片，并以蒸馏水为阴性，链霉素为阳性对照，每一样品重复3次。处理后的平板放在30℃培养24h，观察并记录抑菌圈的直径大小［8］。
1.5数据的处理试验处理及数据测定均重复3次，将所得数据输入SPSS11.5forWindows数据分析系统进行统计，并对次生代谢产物的含量与抑菌圈的大小进行相关分析。
2结果与分析
绵毛鹿茸草不同提取液次生代谢产物含量以及它们对四种细菌的抑菌圈大小如表1所示。其中次生代谢产物的含量为百分含量，抑菌活性以抑菌圈的大小（mm）表示，阴性对照抑菌圈直径6mm，阳性对照（链霉素）抑菌圈26mm；抑菌圈直径在6～8mm为微弱抑菌，8～12mm为弱抑菌，12～20mm为中等抑菌，20～24mm为强抑菌。绵毛鹿茸草的的次生代谢产物和抑菌圈直径的相关性如表2所示。
表1绵毛鹿茸草提取液次生代谢产物的含量（g/kg）及其抑菌圈直径（略）
2.1绵毛鹿茸草提取液次生代谢产物含量和抑菌活性分析从表1中可以看出：总黄酮、总绿原酸、游离蒽醌三种次生代谢产物的含量均为70%乙醇提取液>60%丙酮提取液>水提取液，最高含量分别为1.403g/kg、72.752g/kg、0.043g/kg；生物碱和皂甙的含量为60%丙酮提取液>70%乙醇提取液>水提取液，最高含量为1.677g/kg和5.418g/kg。中国
对进肺炎双球菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用均是60%丙酮提取液>70乙醇提取液>水提取液，最大抑菌圈直径为15.47mm和17.40mm，为中等抑菌作用；对大肠杆菌和枯草杆菌的抑制作用是70乙醇提取液>60%丙酮提取液>水提取液，最大抑菌圈直径为19.03mm和14.83mm，为中等抑菌作用。水提取液对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径均在9～12mm之间，具有弱抑菌作用。可以看出绵毛鹿茸草的70%乙醇提取液和60%丙酮提取液是良好的抑菌剂。
2.2不同提取液的次生代谢产物含量与抑菌活性的相关性分析从表2可以看出：黄酮与蒽醌之间存在显著的正相关，推测绵毛鹿茸草中这两种次生代谢产物可能具有相同的合成底物或具有相同代谢途径；大肠杆菌的抑菌活性与绿原酸的含量具有显著的正性关，推测绵毛鹿茸草对大肠杆菌的抑制作用可能是提取液中的绿原酸起的作用；蒽醌与枯草芽孢杆菌之间存在极显著的相关性，说明绵毛鹿茸草对枯草芽孢杆菌的抑制作用主要是蒽醌作用的结果；肺炎双球菌和金黄色葡萄球菌之间具有显著的相关性，而与所测的5种次生代谢产物之间都没有显著相关性，因此推测绵毛鹿茸草中其它某些物质对肺炎双球菌和金黄色葡萄球菌均有一定抑制作用。
表2绵毛鹿茸草不同提取液的次生代谢产物含量与抑菌活性的相关性（略）
水平显著差异：*P<0.05，**P<0.01
3讨论
次生代谢是植物的重要特征，其产物既具有重要的生态学意义又可决定各类植物在进化过程中的兴衰成败、生死存亡等问题［9］，植物中的次生代谢产物还具有抗过敏、降血压、抗炎、抗菌、抗突变、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等多种活性。
绵毛鹿茸草对70%乙醇提取液、60%丙酮提取液、水提取液对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有抑制作用，前两者为中等抑制作用，后者为弱抑制作用；70%乙醇提取液是肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌的良好抑制剂，60%丙酮提取液是大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的良好抑制剂。推测对大肠杆菌和枯草杆菌的抑制作用主要由提取液中的绿原酸和蒽醌引起的。
文献查阅得知：金银花中绿原酸的平均含量为56.92g·kg-1［10］，巴戟天样品的游离蒽醌含量为的范围为0.013～0.049g·kg-1［7］。绵毛鹿茸草70%乙醇提取液中总绿原酸、游离蒽醌的含量72.752g·kg-1、0.043g·kg-1。从中不难看出：70%乙醇提取液是绵毛鹿茸草的良好提取剂。至于绵毛鹿茸草中这些次生代谢产物的分子组成、分子结构等方面内容有待进一步的研究。
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当前,市场上的加有补药的糖果、糕点、酒、饮料等所谓滋补食品,像鹿茸糖、人参糖、鹿茸酒、杜仲酒、当归饮料等,厂家在商标说明和广告上冠之以“青春美容”、“延年益寿”、“养颜回春”、“提神益智”、“抗癌”、“滋补”的美名,吸引了不少人慷慨解囊,竞相食用。
加药物的食品并不是适合每个人吃的,没病的健康人吃了不但无益,反而可能受害。
药品与食品不同,食品是各种供人食用或者饮用的成品和原料,有些食品对某些疾病有一定疗效,例如绿豆、赤小豆、姜、大枣等,但它不是以治疗为目的的。药品是指用于治疗、预防、诊断疾病或用于规定有适应症、用法、用量的医疗用品。无论是中药,还是西药,只能是治疗一定的疾病,对某些患者有治疗作用,而对健康人则是有害无益的。有些药品与之间往往只有服用数量的差别,即药品在一定的剂量下可以治疗疾病,过量就是,会引起中毒,甚至发生更严重的问题。
在一些酒、糖果、饮料中加进了一些人参、党参、黄芪、当归、鹿茸、熟地、黄精、杜仲等,这些“补药”也是药物,有一定的适应症,只能治疗一定的疾病。尤其是其中的人参、鹿茸、党参,药理作用较强,对健康人是无益的,对儿童甚至是有害的,会影响其正常发育。
祖国医学认为,“补药”系为正气补虚而设,凡身体健康,脏腑活动正常者,就不需要使用“补药”,否则可导致阴阳失调,脏腑正常活动受到扰乱;即使是虚症患者,又分气虚、阳虚、血虚、阴虚四种。因此,“补药”也根据其作用和应用范围相应地分为补气药如人参、党参、黄芪等;补阳如鹿茸等;补血如当归熟地、何首乌等;补阴有枸杞等。不同的虚症要用相应的补药,如果用药不对症,或者盲目滥用,对人体不但无益,有时反而引起不良后果。
补药与任何药物都一样,是有毒性的。以鹿茸为例,有的人吃了鹿茸会引起鼻出血、牙龈出血等中毒现象。古人对鹿茸早有记载:“补精填髓之功效虽甚伟,服食不善,往往发生吐血、衄血、尿血、目赤、头晕、中风昏厥等症。”《中华人民共和国药典》明确规定,高血压病、肾炎、肝炎及肝肾功能不正常者忌服鹿茸。现代研究表明,鹿茸中含有雌二醇、雌酮,是鹿茸具有雌激素样作用的主要成分。实验还证明,从鹿茸中抽提的鹿茸精含有雄性内分泌素,只能用于治疗阳痿。可见,如果患有高血压病、肾炎、肝炎的人饮了鹿茸酒,或儿童吃了鹿茸糖是十分有害的。再拿人参来说,有的人吃了少量人参就会引起胃部胀闷、难受,食欲下降;有的儿童吃了就大量流鼻血;如果食用大剂量,更可出现中毒现象,表现为全身玫瑰疹、瘙痒、晕眩、头痛、体温升高及出血。此外,有人服当归,也是不适宜的。古代医书上就有“肠胃薄弱、泄泻溏薄及一切脾胃病、恶食、不思食及食不消,并禁用之”的记载。可见加人参、当归的酒、糖等食品也不是人人都可用来滋补的。加其他补药的食品也同样如此。
除加中药补药外,有些食品还滥加了一些西药。比如,有的糖果中加入了洗必泰,一般人食用过多时可造成肠道菌群紊乱。有的糖果中加入维生素A、维生素D,称为电视糖,宣传说吃了它,看电视可保护眼睛,但食用过多也可造成维生素A、维生素D中毒。还有的婴儿蛋卷或饼干中加入谷维素,宣传说能增加营养,提高大脑功能。其实,谷维素只是治疗植物神经功能失调的药物,主要用于周期性精神病、精神分裂症、脑震荡后遗症等,而无病食用这种加谷维素的饼干则会出现皮疹、皮痒、脱发等许多不良反应。
在食品中加入的上述药物(除维生素A、维生素D外),不是食品的正常成分,也不是人体需要的营养素,对食品本身等于是一种污染。这种在食品中滥加药物并于市场上销售的做法,对人民健康有害,是违反《中华人民共和国食品卫生法》的,也是违反卫生部和国家中医药管理局《禁止食品加药卫生管理办法》的,在购买这类食品时应十分慎重。
祖国医学传统上使用某些食品用于治疗目的,在医学上称为食物疗法,这与食品中滥加药物是不同的。如确为治疗目的而生产的食品,则应视为食物剂型的药品,经药政部门鉴定、审核后,可作为药品在药房出售。按照传统,既是食品又是药品以及作为调料的,如大枣、核桃、薄荷、木耳及姜、葱、蒜、茴香、大料、胡椒、山楂、黑芝麻、桂皮等,加在食品中对人体无害,不属于加药物食品,人人皆可任意购买食用。
1、功效主要就是起到补气血的作用，同时也可以起到增加免疫力的作用，如果就是身体比较虚弱，或者是有气血不足等情况，都可以应用鹿茸红参进行炖骨头服用，同时也注意不要长时间的进行应用，如果有上火的情况下也尽量减少应用，否则也容易导致火大的情况发生。
2、红参鹿茸炖骨头的功效与作用，红参，性温，可以用来补血。
3、鹿茸，可以用来补虚，对于治疗神经衰弱、失眠等有一定的作用。瘦肉，富含蛋白质，可以滋阴润燥。
4、红参鹿茸再加上骨头放在一起炖汤吃，能够强健筋骨，温肾壮阳，补血益气，治疗子宫虚冷，还能美容养颜、抗衰老，具有很好的医疗保健和养生的功效与作用。
（来源：文章屋网 ）
人参+酒补气虚
中医认为，人参性温，味甘、微苦，入脾、肺两经，具有大补元气的功效。现代药理研究表明，人参中含有的主要有效成分人参皂甙和黄酮类物质，具有抗衰老、提高免疫力、调节血脂、防止血管硬化等作用。
推荐——人参酒：将人参切成段或薄片，浸入优质白酒中，加盖密封，置于阴凉处，每日振摇1次，浸泡7天后饮用。具有大补元气、补脾益肺、安神益智的功效，尤适用于久病气虚、脾肺不足者。
阿胶+芝麻补血虚
中医认为，阿胶性平味甘，入肺、肝、肾三经，以滋阴养血著称。历代医家视阿胶为妇科良药，对调治各种妇科病有独特功效，尤得女士们青睐。
推荐——阿胶冰糖煲芝麻：取阿胶500克，浸在1500毫升黄酒内，待胶块呈海绵状时，隔水蒸成液体，趁热加冰糖1000克，当糖与胶融为一体时，加入炒熟的黑芝麻及敲碎的核桃仁各适量，制成黏稠膏滋，每日早晚各取1～2匙，温开水冲服。
鹿茸+小米补阳虚
李时珍在《本草纲目》中称：“鹿茸能生精补髓、养血益阳、强筋健骨，治一切虚损……”现代药理研究表明，鹿茸含多种氨基酸、骨胶原、蛋白质和矿物质，具有滋补、强壮的作用，服用后可使人精力充沛。
推荐——鹿茸小米粥：将鹿茸研为细末，每次取1克，放小米粥内服用。鹿茸性温，味甘、咸，入肝、肾两经，具有补肾壮阳的功效；小米性温，有养胃的功效，两者相配，滋补效果更好。
虫草+老鸭补阴虚
【关键词】 鹿茸多肽；大鼠；软骨细胞；增殖
Abstract Objective: The purpose of the present was to investigate the effect of pilose antler polypeptides(PAP) on the proliferation of rat chondrocyte in vitro.Methods: The rat articular chondrocytes were isolated by enzyme digestion and sub-cultivated in serial.The 4th chondrocyte was interfered with PAP.The chondrocytes of different generations and the 4th medicine intefered generation were detected with the methods of proliferating cell nuclear antigen ， MTT(methyl thiazolyl tetrazolium) assay for proliferation and Flow cytometry for analyses of cell cycle distribution and PI(proliferation index).Results: With chondrocytes passage time increasing， the proliferating ability of chondrocytes descended.MTT assay showed that the proliferating ability of chondrocytes decreased， the expression of PCNA tapered in the experiment of immunohistochemistry， and PI descended in flow cytometry for analyses.PAP can inhibit the tendency and strengthen the proliferating ability of chondrocytes in serial subcultivation.Conclusion: PAP can significantly improve proliferation of chondrocytes in serial subcultivation.
Key words Pilose antler polypeptides(PAP); Rat; Chondrocyte; Proliferation
关节软骨缺损是临床上常见的损伤，它可导致关节面不平整，从而继发骨性关节炎。用组织工程软骨修复关节软骨缺损是目前正在尝试的一种新方法，具有良好的发展潜力。关节软骨细胞是组织工程理想的种子细胞，但如何分离获取数量多、活性高、分化良好的软骨细胞是组织工程培养技术中的重要问题之一。近年来对生长因子在关节软骨形成和退变过程中的作用日益受到重视，并开展了广泛的研究，认为种子细胞需要适应生长因子的调控才能获得良好的生物活性。由于鹿茸生长的特殊性，故人们推测鹿茸中可能存在某种活性物质控制并刺激鹿茸生长。鹿茸多肽（PAP）是从梅花鹿茸中提取的一种多肽类生物活性因子，为鹿茸的主要活性成份。因此，本研究采用体外培养大鼠软骨细胞的方法，观察PAP对其增殖的影响，为优化组织工程的种子细胞提供一定的理论和实验依据。
1 材料
1.1 实验动物 SD大鼠（闽验证字20050001，合格证号2005C03），清洁级，福建医科大学实验动物中心提供，3～4周龄，体重180～200g，皆为雄性，共8只。
1.2 主要试剂 αMEM培养基(Gibco公司)、胎牛血清（FBS，HyClone公司）；胰蛋白酶1∶250(Trypsin，Amersco公司)、Ⅱ型胶原酶(Sigma公司)、PBS(Gibco公司)；噻唑蓝（MTT，上海申能博采公司），二甲基亚砜(DMSO，Amersco公司)；增殖细胞核抗原PCNA(美国NeoMarkers公司)；PAP粉针由长春中医学院赵文海教授惠赠。
2 方法
2.1 大鼠软骨细胞的获取、鉴定与药物干预分组情况 取4周龄体重180～200g的SD大鼠，断颈处死，参考Hu等［1］软骨细胞分离培养方法进行实验，获取软骨细胞置于5%CO2混和气体环境、37℃恒温箱内单层培养，隔3日首次换液，8～10 天达85%融合后进行传代培养。以传代次数（passage，P）分组，P0即原代细胞，P1即第1次传代后细胞，P2即第2次传代培养细胞，余类推。软骨细胞鉴定采用阿力新蓝染色法检测GAG合成、免疫组化法及RT－PCR法检测Ⅱ型胶原表达［2］。实验分组为P2组、P3组、P4组及鹿茸多肽不同剂量组（低、中、高不同药物浓度干预后的P4软骨细胞组），鹿茸多肽干预组分组的方法采用传代分组法：倒置相差显微镜下进行观察，当P3代软骨细胞融合达到85%时，进行传代（1传3），以胰酶消化贴壁细胞，反复吹打，使细胞均匀悬浮，离心（1 500rpm，5分钟），洗涤2次；对αMEM（含5%FBS）进行加药，分别配制含不同浓度的PAP培养基，分别加药使各瓶培养基药物终浓度为PAP 5μg/mL、PAP 10μg/mL、PAP 15μg/mL；分别以上述不同含药浓度培养基吹打混匀各瓶P3细胞，进行传代，使药物干预组软骨细胞进入P4代。按实验要求调整细胞浓度，分别接种软骨细胞于底面积25cm2培养瓶（细胞浓度5×105/mL）、6孔培养板（置入盖玻片）（细胞浓度5×105/mL）、96孔培养板（细胞浓度4×105/mL）， 于37℃、5%CO2饱和湿度孵育箱中孵育，其中PAP分组参考剂量来源于前期实验［3］。
2.2 各代软骨细胞MTT比色试验 将不同代次大鼠软骨细胞以5×104/mL浓度接种于96孔培养板中，常规培养24小时后用含体积分数为5%FBS的αMEM培养，并分别加入PAP，使PAP终浓度为5、10、15μg/mL，加药后分别继续培养48小时 ，加入MTT溶液呈色。选择490nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各个孔光吸收值。
2.3 各代软骨细胞周期分析及增殖指数检测 将培养的待测各代软骨细胞分别置5mL试管中，用PBS或生理盐水洗2次，制成单细胞悬液，无水乙醇固定细胞，加入PBS调整细胞浓度为5×105～5×106个细胞加入1mL DNA荧光染料（PI），室温下避光染色15分钟，以流式细胞仪(Becton Dickinson FACScan，美国)分析各代软骨细胞周期及检测增殖指数。
2.4 各代软骨细胞免疫细胞化法检测各组软骨细胞PCNA表达 将不同代次软骨细胞接种于6孔板，孔内均预置一块盖玻片，常规培养48小时后取出盖玻片，用免疫组织化学二步法检测PCNA表达情况，结果分析：采用HPIAS21000高清晰度图像处理系统进行图像分析，测定PCNA阳性信号的面积密度( Sv =PCNA阳性信号面积和/窗口面积×窗口数)。
2.5 统计学方法 以上检测均随机取多个样本，每个样本多次重复。应用SPSS11.0统计软件进行分析。进行Oneway ANOVA检验和Pearson相关分析，定量资料实验结果以均数±标准差表示，P
3 结果
3.1 各组软骨细胞MTT比色结果 MTT比色分析显示：随着软骨细胞传代培养，从P2代细胞至P4代软骨细胞在传代培养过程中细胞能量代谢呈下降趋势，逐代相比OD值有显著差异（P
图1 各组软骨细胞在不同观察时间点的增殖情况(OD值)（略）
3.2 各组软骨细胞细胞增殖指数结果 流式细胞术实验结果显示：随着软骨细胞传代培养，从P2代细胞至P4代细胞，细胞增殖指数呈下降趋势，分别为20.9%、16.8%、12.6%，PAP干预后的P4各组细胞增殖指数高于P4细胞，分别为19.7%、21.4%、19.4%，其中PAP 10μg/mL组促进软骨细胞增殖的作用最高，见图2。
图2 各组软骨细胞细胞周期PI值（略）
3.3 各组软骨细胞PCNA检测结果 免疫细胞化学法检测各组软骨细胞PCNA表达显示：随着软骨细胞传代培养，从P2代细胞至P4代软骨细胞在传代培养过程中的阳性表达呈下降趋势，逐代相比其阳性表达有显著差异（P
图3 各组软骨细胞PCNA表达（略）
A：P2(×400)，B：P3(×400)，C：P4(×600)，D：PAP 10μg/mL(×400)
图4 各组软骨细胞PCNA阳性表达面积密度比值（略）
4 讨论
鹿茸具有很强的壮肾阳、益精血、强筋骨的作用，是重要的滋补强壮中药。从药理上分析，鹿茸内含有丰富的多糖类、氨基酸类、脂肪酸类物质以及多种生长因子及其它营养成分，可以为软骨细胞的生长提供充足的营养条件。鹿茸是一种特殊的骨组织，在春季生发季节以1～2cm/d的速度生长，故推测鹿茸中可能存在生长因子促进骨质和表皮层的增殖。目前王本祥研究室应用凝胶过滤和离子交换层析等技术，从梅花鹿茸中分离纯化出一种多肽，经高效液相色谱和N-末端氨基酸分析鉴定为单一多肽，氨基酸组成分析证明，PAP是由68个氨基酸残基组成，分子量为7 200［4］。此多肽主要含有缬氨酸、丙氨酸、赖氨酸和甘氨酸，没有半胱氨酸。实验证明PAP具有很强的促进骨、软骨细胞增殖的作用［5-6］。实验所见软骨细胞在体外传代培养过程中细胞增殖能力呈下降趋势，本实验从MTT比色分析细胞能量代谢，流式细胞术考察其增殖期细胞含量，免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原表达等方面看到从P2代细胞至P4代细胞，软骨细胞增殖能力明显下降，如何以生长因子刺激促进软骨细胞的增殖能力对于将软骨细胞作为种子细胞用于软骨组织工程具有积极意义。生长因子对靶细胞的调控与其剂量密切相关，因此，确定能产生最佳调控软骨细胞增殖的PAP剂量至关重要。本文在预实验的基础上用MTT比色试验所筛选的不同剂量的PAP能不同程度地促进软骨细胞的能量代谢。说明PAP能促进软骨细胞增殖，而且以10μg/mL浓度为最佳。PCNA是一种仅在增殖细胞中合成或表达的核内多肽，其表达和合成与细胞周期有关。主要表达增殖细胞的S期、G1期、G2初期，因此成为检测细胞增殖活性最为有效的标志之一。本实验免疫组化结果证实，PAP以10μg/mL浓度时软骨细胞表达致密的棕褐色颗粒最多，其他组则较少，说明PAP可通过促进PCNA表达来调控DNA复制。细胞周期与细胞中DNA含量密切相关，DNA含量随着细胞周期各期而发生变化。当细胞受到某些因素刺激时，可使DNA含量发生变化，从而引起细胞周期发生改变。细胞增殖指数是S期与G2期DNA含量之和与S期、G2及G1期DNA含量之和的比，它是反映细胞增殖的重要指标之一。本实验FCM结果显示，PAP能显著提高软骨细胞增殖指数，且以10μg/mL浓度时最明显。综上所述，PAP不仅具有显著的生物活性，可以促进软骨细胞的增殖，而且还能阻止软骨细胞在连续体外培养过程中的增殖衰老趋势，本实验可以为优化组织工程中的种子细胞提供一定理论和实验依据，有关PAP抗软骨细胞传代老化的实验有待进一步探讨。
参考文献
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［2］ 陈晓东，林建华.大鼠软骨细胞分离培养与鉴定［J］.福建中医学院学报， 2006，16(6)，27-29.
［3］ 林建华，修忠标.鹿茸多肽对骨髓基质干细胞体外增殖的影响［J］.中华实验外科杂志，2005，22(7):821-828.
［4］ Zhang ZQ，Zhang Y，Wang BX，et al.Purification and Partial Characterization Of Anti-inflammatary Peptide from Pilose Antler of Cervus Nippon temminck［J］.Acta Pharmaceutica Sinica ，1992，27(5):321-324.
1、人参和鹿茸
人参和鹿茸片搭配在一起泡茶喝效果特别好，人参和鹿茸片都是具有滋补功效的中药材，它们搭配在一起泡茶喝会让滋补功效更加出色，人参能补中益气，鹿茸片则能补益精血，它们一起泡茶喝，对人体气血亏虚或体质虚弱都有明显缓解作用。
2、人参和枸杞
人参和枸杞也是泡茶喝的理想搭档，它们搭配在一起泡茶喝，不但能让人体吸收丰富营养还能增强人体免疫力，人生中的人参皂苷和枸杞中的枸杞多糖被人体吸收以后都能促进免疫细胞再生，增强人体免疫功能，出现免疫力低下是集食用人参和枸杞泡茶喝就能让情况有所好转。
3、人参当归和黄芪
人参还可以和当归与黄芪等中药材搭配在一起泡茶喝，当归能补益气血，提高人体造血功能，而黄芪则能缓解人体中气不足，人生又是一种能大补元气的中药材，它们搭配在一起泡水喝能有效缓解人类体虚，能增强人体素质提高人体健康水平。
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1、鹿茸：雄鹿的嫩角没有长成硬骨时，带茸毛，叫做鹿茸。是一种贵重的中药，用作滋补强壮剂，对虚弱、神经衰弱等有疗效；
2、鹿胎盘：动物之极品，鹿一生充满活力，无明显的体态衰老现象，这一切皆归功于其胎盘中的生命原动力。同时鹿胎中还含有鹿胎蛋白、氨基酸、维生素、矿物质及人体必需的微量元素。加速新陈代谢，清除体内毒素沉积，使人体保持年轻状态，有明显的美容养颜，延缓衰老的作用；
3、鹿骨：补钙护钙二合一，骨骼健康添营养，鹿骨含有人体骨骼形成所需全部营养物质，是天然活性钙的重要来源，且含
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