时间：2023-05-30 10:27:55
开篇：写作不仅是一种记录，更是一种创造，它让我们能够捕捉那些稍纵即逝的灵感，将它们永久地定格在纸上。下面是小编精心整理的12篇核酸检测情况，希望这些内容能成为您创作过程中的良师益友，陪伴您不断探索和进步。
还有半个月不到就是春运了，由于此时大部分在外打工的人会返乡，所以回家要不要核酸检测成了大家最为关注度的，毕竟核酸报告通常8个小时才出结果，下面下边就以贵州为例，一起看看春节回贵州遵义需要做核酸吗。
2022春节回贵州遵义需要做核酸吗
看地方规定。
春节回贵州遵义需要做核酸吗是人们经常提到的。不过就以的规定来看所经省市均不是疫情中高风险地区的来黔返黔人员，在测温正常且做好个人防护的情况下，可以有序通行，无需提供核酸检测证明。14天内有中高风险地区旅居史的来黔返黔人员需提供7日内核酸检测阴性证明；无相关证明的，应立即接受核酸检测或14天隔离医学观察。
春节回贵州需要什么手续
中国内地的疫情走向总体来说归于平稳，但还是不能懈怠，出于常态化疫情防控指导方针的需要，众人外出的时候经常有一个疑问：贵州外出、或进入贵州要什么手续，就相关规定看中高风险区的要提供方核酸检测报告。如果是入境返黔人员，在省外首站地集中隔离满14天的，要继续进行7天居家隔离，并在第7天进行1次核酸检测，检测结果为阴性的，在测温正常且做好个人防护的情况下，可以有序通行;如果在首站地集中隔离未满14天的，须在我省集中隔离补足14天，并在第14天进行核酸检测,阴性者转为居家隔离观察7天，在居家隔离第7天核酸检测阴性的，在测温正常且做好个人防护的情况下，可以有序通行
春节回贵州遵义要注意什么
春节回贵州遵义要注意什么是大家时下常问的，就目前情况看除了返乡的时候做好监测，广大群众应密切关注国内中高风险地区调整情况，如果与公布的确诊病例或无症状感染者行程轨迹有交集的，须立即主动到所在社区报备，按照当地社会防控部门的要求，接受社区健康管理，执行相关防控措施要求，在做好个人防护的情况下到就近核酸检测机构进行检测。
（来源：文章屋网 ）
2022过年回南京有什么要求是大家最为关注的，毕竟随着2022年的到来，很多人都的准备回家的事情，不过由于近期疫情反反复复，很对多地方对进出人口的管控都加强了，下面小编就和大家共同看看春节去南京需要隔离或是核酸吗
2022过年回南京有什么要求
春节能回南京老家过年不过具体的要看你所在地区的规定。
因为近期疫情反复大家纷纷担心自己又将于春节无关，不过就南京的规定看是可以回来过年的，不过所有来自或途经国内疫情中高风险地区及所在地，或有本土确诊病例所在地来南京人员，应在抵达南京后尽快且不得超过12小时向所在社区报告，需持有48小时内核酸检测阴性证明，主动配合做好信息登记、后续根据在南京停留时间按要求配合做好核酸检测。
春节去南京需要隔离或是核酸吗
看疫情的控制情况。
春节前后南京还能不能正常返乡是大家时下最为好奇的，不过目前还不清楚南京在春节期间是否可以自由进出，但根据以往的数据，低风险地区的人是可以的。根据有关规定，低风险地区人员进出南京不受限制，无需集中隔离14天，无需持有核酸检测阴性证明。中高风险地区人员需要集中隔离或家庭隔离才能到达南京，核酸检测至关重要。
春节回南京过年要准备什么
核酸检测报告肯定是不能少的，毕竟就规定看外省返乡人员都要核酸检测报告，中高风险地区来南京需要配合核酸检测等疫情防控措施。低风险地区持有苏康码绿码，无需核酸检测。对入境人员实施14+14健康管理措施，即14天集中隔离医学观察期满符合解除隔离条件的，继续严格实施14天居家隔离医学观察。
（来源：文章屋网 ）
[关键词] 血液中心；核酸标本；运输与保存；冰源
[中图分类号] R446.11 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）07-128-03
The method and effect analysis of cold chain transportation of
nucleic acid sieve
YAO Junqing YE Huifen
Dongguan Blood Center， Dongguan 523000， China
[Abstract] Objective To investigate the ways and effects of blood sample cold chain transportation preservation in the blood center. Methods According to the requirements of Blood Stations Technology Operation Procedures （2015 edition）， the holding time of the samples in the transport cases （the time of samples transport temperature holding between 2 to 10℃） were tested by different preservation methods， simulated the condition of transportation by vehicles. The samples were divided into three groups. The first group were used one piece of cold source plate at the bottom of the transport cases .The second groups were used three pieces of cold source plate， one piece were placed at the bottom， and the others were placed at two sides selected randomly. The third groups were used five pieces， one placed at the bottom， and the others were placed at each side. Results To simulate the condition in vehicles with air condition to regulate the temperature of a laboratory to 23-27℃， humidity to 30%-70%，the holding time in the first， the second and the third groups were （0.16±0.02）h、（6.16±0.37）h and （13.78±0.71）h， respectively. There was significant difference between the two groups （F=2197.474， P
[Key words] Blood center； Nucleic acid samples； Transportation and preservation； Cold source.
目前我血站输血相关传染性疾病的血液筛查普遍采用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法，该方法的灵敏度和特异性虽然在不断地改进和提高，但由于方法学本身的局限性，感染者“窗口期”献血、病毒变异、隐匿性感染及其他因素仍然可能引起输血后HBV、HCV和HIV等病原微生物感染[1]。核酸扩增检测技术（nucleic acid amplification technologies，NAT）可以缩短病毒特异抗原和抗体免疫测定的“窗口期”[2-3]，是提高血液安全的有效措施[4-7]。但是核酸检测与ELISA相比在检测过程的各个环节上均有其特殊之处，这些环节若缺乏严格的质量控制，会导致血液核酸检测结果不准确。
根据《血站技术操作规程（2015版）》中标本运输的规定，核酸标本的运输温度要求为2～10℃[8]，核酸标本的保存温度和时间会对标本的检测结果产生一定的影响[9]。为了保证核酸标本的质量，满足核酸检测的要求，本研究探讨了东莞市中心血站的核酸标本运输与保存的效果，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本运输箱
采用深圳市淳德科技有限公司生产的专用标本运输箱，型号：LX-25A，外尺寸：400mm×310mm ×360mm，内尺寸：340mm×250mm×300mm。
1.2 冷源板
采用深圳市淳德科技有限公司生产的冷链专用4℃冷源板（又名冰盒），规格：263mm×183mm×23mm，预先放置于-30℃低温冰箱冷冻保存10～24h，保证内部完全结冰，使用前在室温下解冻1～3min。
1.3 核酸标本
采用BD Vacutainer一次性使用真空静脉血样采集容器采集标本，而本研究采用本站已经超过国家要求保留时间，需要销毁的核酸标本，标本按照要求，保存在标本专用冰箱里，保存温度在2～8℃。标本血容量符合采血管标注的采集量，即5mL，无严重溶血、脂血、黄疸、凝血、渗漏、稀释。标签条形码清晰，无血渍、无划痕，粘贴符合要求，标本血浆和红细胞被分离胶隔离。
1.4 温度记录仪
选择Elitech RC-5 U盘温度记录仪（江苏精创电气股份有限公司），温度检测范围-30℃～+70℃；精度±0.5℃。RC-5 U盘温度记录仪在使用之前经过华南国家计量测试中心广东省计量科学研究院计量校准。校准合格后使用。该温度记录仪设定每1min自动记录一次温度。
1.5 温度监测方法
第1组：标本运输箱底部放置一块4℃冷源板；第2组：标本运输箱底部放置一块冷源板，四周随机选取两面各放一块冷源板，共三块冷源板；第3组：标本箱底部放一块冷源板，四周各放一块冷源板，共五块冷源板。
冷源板放进标本箱后，监测标本箱内温度，直到标本箱内温度低于10℃，放入核酸标本50支，标本和冷源之间用隔离网垫隔开，开始监测箱内温度变化。
Elitech RC-5 U盘温度记录仪设定每1min自动记录一次温度，直到标本箱内温度超过10℃，三组方法各监测10次，读取记录标本箱温度在2～10℃的保温时间，最后导出数据整理结果。
1.6 环境要求
模拟运输标本的血液运输车环境，调节室内温度和湿度，保持室温在23～27℃，湿度在30%～70%。
1.7 统计学方法
选择SPSS17.0软件进行分析，计量数据选择（）表示，三组整体对比采用方差分析，两组比较采用t检验，P
2 结果
2.1 核酸标本检查
RNA易受外界h境的影响，标本保存过程中不能发生溶血等现象，观察放在三组标本运输箱中的核酸标本外观，上清液清亮无重度溶血，重度脂血，黄疸，稀释等，符合接收要求。
2.2 三组标本运输箱的保温时间比较
第1、2、3组标本运输箱保温时间（即箱内温度在2～10℃范围内的时间），第3组和第2组明显长于第1组，结果见表1。
3 讨论
随着我国对采供血工作的重视，社会对输血安全的关注程度越来越高，各种相关法律、法规与标准相继出台，这对血站的管理提出了更高的要求[10]。冷链是一套用于血液和检测标本储存和运输的系统，冷链管理要为血液质量和标本检测结果有效性提供保障，其中核酸标本的运输和保存直接影响标本质量和检测结果，是冷链管理的一个关键控制点。
由于核酸检测对象的特殊性，即检测的靶核酸DNA、RNA不稳定、极易降解，在核酸检测中，标本的采集、运输和保存对检验结果有决定性的影响[11]，核酸检测结果的可靠性有赖于采集足量的样本和正确的运输。有研究表明[12]，标本在室温放置一段时间后，病毒的检出率较存放于4℃环境时，有一定比例的下降，所以一般要求样本在4℃保存条件下6h内进行检测，然而现行常规采血流程使血站各采血点的标本在当天晚上才能送达实验室，从采集到检测，中间相隔11～12h，其中运输时间约为2～3h，难以满足上述要求，在此情况下，为保证标本质量，运输和保存的冷链非常重要。
本研究显示，第1组标本运输箱保温时间为（0.16±0.02）h，没有达到运输时间2～3h的要求，所以我们不能采取放置一块冰源的方法来运输核酸标本；第2、3组标本运输箱保温时间分别为（6.16±0.37）h和（13.78±0.71）h，两两比较差异均有统计学意义（P
核酸标本的运输与保存对于检测结果的可靠性具有重要的意义，不过我国很多血站很少采用全程的温度监控设备来自动进行温度记录，温度监控记录和核酸标本交接记录大多为人工填写，血站对于核酸标本的运输缺少有效的监督和管理机制，冷链上并没有形成完善、真实的一体化管理。因此，在核酸标本的运输与保存冷链管理对策中，要根据《血站核酸检测实验室质量控制指南》和自身的采血流程制定一系列措施。标本在采血现场保存在血液专用保存冰箱内，温度控制在2～6℃范围内，采集后的标本在4h内实施离心，分离红细胞和血浆；参考国内外经验，利用移动式温度监控设备进行连续自动全程监控[13]；同时尽量缩短运输时间，合理规划路线，做好标本交接工作，并记录时间和温度等原始数据。
本次模拟测试使用专用标本运输箱和4℃冷源板来运输和保存标本，是因其性能稳定、密封性较好，既能保证标本运输和保存的温度要求，又能满足防水、防破损、防外泄、易于消毒处理等生物安全要求，值得在血站推广应用[14]。当然，由于国家没有统一要求，全国各地血站的具体情况不同，大家使用的运输箱和冷源各不相同，也曾有报道应用自行研制的标本运输箱能满足核酸标本运输的要求，而且取得很好的保温效果[15]，因此各地血站可以根据自身的采血模式、当地气候和环境以及标本运输和保存的实际需求制定适合自己的标本冷链管理。总之，核酸标本的保存和运输要求非常严格，正确的标本保存对于检测结果准确性意义重大，为此笔者认为要对冷链管理进行不断改进，确保核酸标本的质量，从而为临床用血提供安全保障。
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[关键词] 统筹法；病毒检验；时间；应用
[中图分类号] R446 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）24-168-02
Application of overall planning method in the virus in inspection
FAN Rongjun1 ZHUANG Yan2 LIU Zhongfang1 ZHOU Lina2 LI Xiaopeng1
LIANG Shuang1 WANG Yu1
1.Harbin Center for Disease Control and Prevention，Harbin 150056，China；2.Changchun Economic and Technological Development Zone Hongbo Biotechnology Equipment Sales Department，Changchun 130021，China
[Abstract] The increase in the workload of virus screening in routine medical checkup and unpredicted outbreak urges an effective planning method for sufficient utilization of the limited manpower and lab resources，plus reasonable experimental time allocation to get accurate test reports within the shortest turnaround time，especially when centralized training for more qualified medical technologist cannot be provided.In this study，the author's ideas and experiences on the co-ordination method in virus screening are discussed.
[Key words] Critical path method（CPM）；Virus examination；Time；Application
统筹法是科学的工作方法，华罗庚将其定义为用数学原理安排工作进程的方法[1]，可以提高工作效率，通过重组，打乱，优化等手段改变原本的固有办事格式，优化办事效率的一种办事方法，基本思想是“统筹兼顾”“求快、好、省”， 即完成任务速度快、效果好、资源省，目的是要合理安排工序，要进一步缩短工时。
近年来，随着H7N9禽流感、手足口病、甲型H1N1流感的出现，病毒性疾病监测的检测工作量与日俱增，出现成倍增长的趋势，但是许多检验科室人员配备受到许多因素的限制，无法实现与工作量相对应的增长。因此，我们需要运用科学的统筹实验理念，由有限的人员来完成不断增加的检验工作，保证检验结果的及时、快速、准确，为临床治疗、流行病学分析、疫情结果报告等工作提供实验室数据支持。现介绍本团队在完成几项呼吸道病毒性疾病检测工作中所总结出的“统筹法”与广大同仁探讨。
1 一般统筹法
如分子生物学检测方法的统筹。常用分子生物学检测方法分为RT-PCR和Real-time PCR两种检测方法。现以一台核酸提取仪工作1次即可完成的12份流感样品的核酸提取为例。
1.1 RT-PCR检测工作
如果按实验先后顺序依次进行，全过程为：实验准备工作（15min）、核酸提取（50min）、PCR体系配制分装（20min）、PCR加样（5min）、PCR（210min）、制备电泳胶并干胶（40min）、
配制并分染料（10min）、电泳加样（5min）、电泳（30min）、结果观察记录（5min），实验完毕。总用时为390min。
如果采用统筹的方法，在核酸提取的过程中进行PCR体系配制分装，在PCR的过程中制备电泳胶并干胶，临近PCR工作结束前配制并分染料，则实验总用时为320min，可节省70min。
1.2 Real-time PCR检测工作
如果按实验先后顺序依次进行，具体时间分配如表1所示。全过程为：实验准备工作（15min），核酸提取（50min），Real-time PCR体系配制分装（20min），Real-time PCR加样（5min），Real-time PCR（110min），结果观察记录（5min），实验完毕。总用时为205min。
如果采用统筹的方法，在核酸提取的过程中进行Real-time PCR体系配制分装，则实验总用时为185min，共节省20min。
2 短时间服务于长时间的统筹
如大量样本的核酸提取方法的统筹。现以两台最大单次提取12份样品的核酸提取仪工作1次无法完成的36份和40份流感样品的核酸提取为例。
2.1 36份样品的核酸提取
如果1台核酸提取仪工作2次，另一台核酸提取仪工作1次采用统筹方法最短工作过程是：（1）第一台核酸提取仪加样及样品裂解同时开展提取前准备工作、摆放实验耗材（15min），提取12份核酸的同时开展第二台核酸提取仪提取前准备工作、加样及样品裂解（50min），利用两台仪器同时提取的时间和第一台核酸提取仪工作后的核酸收集、仪器清理工作时间准备第三批样的核酸提取仪提取前准备工作、加
表1 核酸提取各项工作所需时间清单
工序清单 工序计划时间（min）
提取前准备工作 10
加样及样品裂解 15
摆放实验耗材 5
提取12份核酸 50
提取8份核酸 40
提取6份核酸 30
提取4份核酸 28
核酸收集 5
仪器清理工作 5
样及样品裂解（10min），摆放第三批样的实验耗材（5min）；（2）提取第三批样的同时开展第二台核酸提取仪核酸收集、仪器清理工作（50min），最后为第三批样的核酸收集（5min），可以开展后续实验。总用时为135min。
如果采用统筹的方法，将样品分为12份、12份、6份、6份四批提取，（1）过程同上，（2）过程变为提取第三批样的同时开展第二台核酸提取仪核酸收集、仪器清理工作和第四批样的核酸提取仪提取前准备工作、加样及样品裂解、摆放第四批样的实验耗材（30min）；（3）只进行提取第四批样时开展第三批样核酸收集、仪器清理工作（15min），最后为第四批样的核酸收集（5min），可以开展后续实验。总用时为130min，又节省5min。
2.2 40份样品的核酸提取
根据上述四批次实验方法，如分成12份、12份、8份、8份四批提取，则（1）过程同上，（2）过程时间变为40min；（3）过程时间为15min，最后为第四批样的核酸收集（5min），可以开展后续实验。总用时为140min。
如分成12份、12份、12份、4份四批提取，则（1）过程同上，（2）过程变为提取第三批样时开展第四批样的核酸提取工作（50min），第三批样的核酸收集（5min），可以开展后续实验。总用时为135min，又节省5min。
3 空闲时间的合理利用统筹
如血清学与分子生物学交叉实验的统筹。现以麻疹检测和Real-time PCR方法检测12份禽流感样为例，具体时间分配如表2和表3所示。
表2 麻疹检测各项工作所需时间清单
工序清单 工序计划时间（min）
提取前准备工作 30
加样及样品稀释 30
样品吸附酶标板 60
洗板加酶 10
酶吸附反应 60
洗板加显色液 10
显色反应 30
酶标检测记录 5
合计 235
如果我们采用统筹的方法，进行麻疹检测提取前准备工作平衡试剂、升温水域锅的同时可进行禽流感检测实验准备工作（30min），麻疹样品稀释的同时可进行禽流感检测体系配制分装（30min），样品吸附酶标板的同时可进行PCR加样（60min），然后是洗板加酶（10min），酶吸附反应（60min），此
表3 禽流感检测各项工作所需时间清单
工序清单 工序计划时间（min）
实验准备工作 15
核酸提取 50
体系配制分装 20
PCR加样 5
Real-time PCR 110
结果观察记录 5
合计 205
时禽流感检测Real-time PCR过程已结束，但为节省时间应先洗板加显色液（10min），显色反应的同时禽流感检测结果观察记录（30min），酶标检测记录（30min），实验结束。总用时为235min，节省205min。
4 讨论
统筹方法（俗称“优选法”），其基本原理是通过网络图的形式对整个系统全面规划，并按先后顺序、轻重缓急进行协调，通过分析和计算，找出关键工序或关键路线，通过不断优化，使系统对资源（人力、物力、财力等）进行合理安排，有效利用，达到以最少的时间和资源消耗来完成整个系统的预定计划目标，取得最好的管理效益[2]，统筹法思想的核心是要找关键路线，在保证关键路线这一主要前提下，统筹考虑其他工序的资源配置和安排，更快更好地完成任务。事实上，这种合理的计划思想或多或少在我们的日常工作与生活中都有所体现。随着经验的积累，我们都在自觉与不自觉地采用一种合理优化的安排来完成某件事情[3]，统筹法运用的管理科学上在大的方面已为全球经济发展做出了积极的贡献[4]。统筹，是正确的思维方式，是规律的准确把握，是科学的工作方法，是高超的领导艺术[5]，统筹法推广是中国管理科学化的一个里程碑[6]。
近年来，先后发生了手足口疫情、甲型H1N1流感疫情、禽流感H7N9疫情等重大公共卫生事件，同时麻疹消除工作也备受关注，加之日常监测工作，使病毒检验工作量翻倍增长，但人员的增速确远不及工作量的增加，这就要求我们检验人员，尤其是基层实验室更要寻找有效的节约操作时间、提高工作效率的科学的检验方法。统筹法正是我们管理检验任务的最科学、最合理的工作方法，是我们能否有效利用现有资源圆满完成各种检验任务、服务于人民健康、防止疫情扩大或终止谣言的关键所在。
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摘要：基于817 DNA酶的催化切割特性和类辣根过氧化物酶DNA酶的氧化还原反应催化特性，发展了一种新型核酸酶催化放大传感体系，并用于Pb2+的比色检测。考察了K+浓度，pH值及反应时间对检测体系的影响。ABTS吸光度变化与Pb2+浓度在5.0～100 nmolL范围内呈良好的线性关系，检出限为3.0 nmolL。此外，因Pb2+酶的特异性，本方法对Pb2+具有良好的选择性。
关键词：DNA酶； 比色检测； 催化放大； 生物传感； 铅离子
1引言
当前，重金属污染仍然是一个全球性问题，特别是在发展中国家，已对人体健康造成了重大伤害[1]。我国规定：饮用水中Pb2+含量不得高于50 _SymbolmA@_gL。目前，Pb2+的检测方法主要有双硫腙比色法、原子荧光法[2]、原子吸收光谱法[3]、气相色谱法、离子交换色谱法、阳极溶出伏安法、微分电位溶出法和极谱法等仪器分析方法[4]。这些方法一般操作复杂、仪器价格较高、且灵敏度有待提高。近年来，许多研究者致力于发展Pb2+检测新方法，如基于生物分子及纳米材料的生物传感方法等[5]。然而这些方法或多或少的存在一些缺陷，使之广泛应用受到了限制。
核酸、核酸酶探针易于合成，性质稳定，使用方便，已得到广泛的研究和应用[6]。对于核酸探针，具有代表性的如核酸适配体（Aptamer）[7]， 发夹结构的分子信标[8]， 以及其它基于DNA构象变化的DNA生物探针[9]。核酸酶是通过体外选择（In vitroselection）得到的一类新型功能核酸[10]。不同的DNA酶可以催化不同的化学反应，包括DNA或RNA的切割连接反应、磷酸化、氨基磷酸酯键的切割等。与蛋白酶相比，DNA酶具有高稳定性，在生物化学和药物领域具有广阔的应用前景。许多DNA酶催化活性需要依赖于特定金属离子的辅助，从而为应用于特定金属离子的检测提供了可能。利用这种特性的生物传感检测已有报道[11～13]。此外，另一种让人感兴趣的DNA酶是由G四股螺旋超分子结构结合血红素（Hemin）而成[14]。它具有过氧化物酶的催化活性，能够催化氧化双氧水介导的底物体系，如鲁米诺，ABTS（2，2联氮二（3乙基苯并噻唑6磺酸））和TMB （3，3′，5，5′四甲基联苯二胺）。表现出化学发光、紫外吸收以及颜色改变等信号的变化，具有优越的分析应用意义[15]。
本研究将具有不同功能特性的核酸序列组合到一起，发展了一种核酸酶催化放大比色传感平台，并用于Pb2+的比色检测。实验原理如图1所示，将富G核酸序列封闭于发夹结构探针中，当存在Pb2+时，发夹结构探针被切断，释放富G核酸序列，与Hemin结合形成DNA酶，引发显色反应。通过吸收信号的响应即可达到检测Pb2+的目的。
其中探针部分包含17E的底物链序列和构成催化DNA酶的富G序列。探针被设计为发夹结构，以实现对Pb2+的特异性显色。显色体系中所用的Pb2+DNA酶序列为经典的“817”脱氧核酶结构[11]，在Pb2+存在下显示出很高的催化切割活性。底物链是一个DNA与RNA嵌合体，剪切位点有一个腺嘌岭核酸核苷（rA），其余碱基全部为脱氧核糖核苷酸。当不存在Pb2+时，也就是DNA酶不切割的情况下，探针的‘Loopstem’发夹结构非常稳定，富G序列由于杂对被封闭，所以不能形成G四链体Hemin复合结构，即不能催化底物发生氧化还原显色反应。当存在Pb2+时，DNA酶切断了发夹结构探针的Loop部分，Loopstem发夹结构被破坏，只有几个碱基配对的双链茎部不能稳定存在，因此释放出富G序列与Hemin结合，形成具有很强过氧化物酶活性的DNA酶，催化ABTSH2O2发生显色反应，反应液的紫外吸收值的变化与Pb2+的浓度相关（图2）。从图2c可见，当不加入Pb2+时，体系仍有很高的吸收，说明17E会与发夹探针的Loop部分杂交，导致探针的Loopstem发夹结构不稳定或被破坏[16]，从而释放出富G序列与Hemin结合，形成G四链体复合结构，催化底物进行显色反应，增加检测体系的背景信号。所以，本实验加入Anti17E互补结合17E，以降低检测体系的背景信号。
3.2.2溶液pH值的影响在形成G四链体过程中，层间的G碱基之间是通过氢键的作用连接在一起的。由于 pH值影响氢键形成，实验中考察了溶液pH值对检测体系的影响。如图4所示，在溶液pH为6.0～7.0时，体系的紫外吸收变化不大。当溶液pH>7后，随着pH值升高，体系的信号响应逐渐降低。当pH=8.0时，本体系的紫外吸收变化几乎为零。所以在本实验体系中，溶液酸度选择为pH=7.0。
3.2.3酶切速率的考察在Pb2+存在下，底物被催化切割的速率加快[13]，从而释放出富G序列，形成G四链体结构。从图5可见，当反应时间达到30 min后，体系的紫外吸收变化达到稳定。表明在Pb2+存在下，酶催化底物的切割反应速率非常快；在没有酶和Pb2+的自发水解条件下，切割反应速率非常慢。为了保证酶催化切割反应的充分进行，且可忽略底物的自发水解对检测的影响，在Pb2+检测实验中反应时间选择30 min。
服务区六个到位做好疫情防控工作
一是班次调整到位。目前我区把员工分为两班，以14天为一个周期，进行交替驻区。驻区期间员工严禁出区，非在岗人员禁止进入服务区，特殊情况需报主任审批。全员离岗、返岗实行主任审批手续。在家休息的员工返岗之前做好核酸检测，持检测报告返区上岗。对在家人员，每天要求上报三次体温和行程轨迹，严格遵守居家要求。
二是核酸检测到位。联系**铭和医院每周两次为员开展核酸检测，既避免了员工去医院检测风险，也提高了员工核酸检测的时间和效率。
三是个人防护到位。一线人员严格落实“四个一”防护措施，口罩、手套、面罩、消毒液发放到每位员工，在岗期间全程佩带。库管在接收货特时，查看送货人员的两码一温，索要核酸检测报告，有冷链食品时，先消毒，后接收，索要相关消防及防疫证明。所有人员体温岗前必测，岗中必测、岗后必测，休息在家人员早中晚必测，切实提高个人防护意识。
四是外来人员管理到位。外来人员非必要不接待。确需接待的到访人员，需做好外来人员信息登记、体温监测等相关资料，并佩戴好防护口罩。特别是边门管控。在西区便门安排保安专人值守，做好出入便门人员的“两码一温一口罩”查验和内外部车辆管控工作，并及时真实记录台账。
五是督查到位。视频督查：安排专人每日对服务区综合口入口等点位防疫工作进行早中晚不低于三次视频督查，建立专门台账，发现防疫不力者严肃考核。现场督查：每日服务区班组督查队24小时对服务区各点位现场督查防疫工作。
六是员工关爱到位。在做好一线员工防护的同时，切实保障一线员工生活，一是让厨房及时调整饮食，为员工包饺子、馄饨，做一些地方小吃，改善员工驻区伙食，二是调整宿舍，保障员工住宿安排。三是备足日常食品、商品，满足员工生活供应需求。
【关键词】三维细胞培养；流感病毒；监测
【中图分类号】R372 【文献标识码】A 【文章编号】1004―7484（2013）09―0118―01
2009年5月，新甲型H1N1病毒造成世界范围内的大流行，2013年春季在中国长三角地区流行甲型H7N9流感病毒，加强对流感病毒监测对于疫情分析、流行趋势研判、疫苗研制等方面有着极其重要的意义。目前国内在流感病毒监测方面主要采用核酸检测和单层贴壁细胞培养技术。由于标本采集的问题及细胞在体外环境下生长逐渐丧失了原有的性状[1]，在很多情况下，所取到的研究结果和实际结果不符合。传统单层细胞培养得率过低是大量病毒监测工作中难以突破的的瓶颈。我们建立了三维细胞培养技术方法在流感病毒的网络监测中得到较好的应用。
1 材料与方法
1.1 样本采集：上海市黄浦区流感网络监测定点医院（第二人民医院）流感监测点于2013年1-2月冬春季采集的类流感病例鼻咽拭子合计76份。
1.2 核酸抽提：取鼻咽拭子病毒采样液140微升，使用QIACUBE?核酸抽提仪，试剂使用QIAamp? Viral RNA Mini Kit（250）试剂盒提取病毒RNA。
1.3 流感病毒核酸检测：Real-Time RT- PCR检测使用上海之江生物技术有限公司甲型流感病毒核酸检测试剂盒（A型/B型流感核酸检测试剂盒、H1、H3、H1N1（2009pdm）型核酸检测试剂盒），PCR扩增仪使用国产上海宏石SLAN荧光定量PCR扩增仪。反应条件如下：45 ℃ 10 min逆转录，95 ℃ 15 min变性，95 ℃ 15s，60℃ 1min FAM通道检测荧光，40个循环。
1.4三维细胞培养
1.4.1培养仪：采用Hamilton?公司的BioLevitator?三维细胞培养仪。
1.4.2细胞来源：75mL细胞培养瓶复苏的狗肾细胞（MDCK），消化后得到悬浮细胞。将悬浮细胞接种到GEM微载体上，在培养设备上运行接种程序。当细胞生长覆盖率达到80%以上时，加入两倍量的新的GEM微载体。继续培养，在培养过程中根据需要更换新的培养基。当细胞生长覆盖率达到80%以上时，将培养管内溶液分装到三个新的培养管中。向三管中分别加入两倍于原体积的新培养基和两倍于原数量的GEM微载体。在培养设备上运行接种程序。
1.4.3细胞生长：当细胞生长覆盖率达到80%以上时，取出培养管，用磁铁吸住GEM微载体，移去培养基。用3-Dissolution试剂将GEM微载体溶解，用磁铁吸去磁性颗粒，得到细胞。转移细胞溶液至新的50mL管中，将细胞清洗、悬浮后细胞分装并计数。细胞样品可以用于下游的检测或其它应用。
1.4.4接种病毒
1.4.4.1接种中毒：当细胞生长覆盖率达到要求后，开始进行病毒感染实验。采用上述9份季节性流感病毒H3核酸检测阳性标本分A、B组进行染毒试验。A组为贴壁细胞培养的细胞，B组为三维细胞培养的细胞。置37?C， 7.5% CO2浓度培养，每天观察，当有90%的细胞出现CPE后，进行收毒。
1.4.4.2收毒后的病毒液可以用移液管吸入离心管，在1，000-2，000转下离心10mins，以此除去细胞碎片，将离心后的上清夜转移，弃底部沉淀，该上清液进行病毒滴度测定。
1.4.5 三维细胞培养细胞的观察与计数
1.4.5.1取50μL培养液（cells on GEM?）至96孔板中的一个孔内。加入100μL Hoechst 33342溶液到该孔内。室温下放置15-20分钟。用显微镜在紫外和DAPI滤光片下观察。
1.4.5.2细胞计数用CubeMagnet将剩余的400μL细胞样品中的生长在GEM上的细胞吸附到底部。用移液器将培养基移除。加入1mL PBS到样品中。在CubeMagnet帮助下，移除PBS缓冲液。加入200μL 3-Dissolution到样品中。37?C孵育10-15分钟，用显微镜观察直到GEM被完全溶解。将盖玻片平铺在血细胞计数器上。加入50μL Trypan Blue和50μL细胞样品到微离心管中。盖上盖子混匀。取10μL细胞/Trypan Blue混合物到盖玻片下面。用血细胞计数器对活/死细胞进行计数。
1.5 MDCK单层细胞培养：参照中国国家流感中心实验室流感病毒监测方案操作方法。[2]
1.6 血凝试验方法：参照中国国家流感中心实验室流感病毒监测方案操作方法。[2]
1.7 结果的统计与分析使用统计学软件stata 7.0。
2 结果
2.1 标本直接核酸检测结果：经RT-PCR筛查甲型流感核酸阳性标本9份，阳性率为11.8%（9/76）。其中H3分型阳性6例，未分型（包含H1、H3、H1N1（2009pdm））共3例。CT值分别为29.2，31.2，32.1，33.2，35.2，37.5 。
2.2细胞生长效率比较：75mL细胞瓶狗肾细胞（MDCK）工作容量为10mL，细胞总数为2*106个。传统贴壁细胞培养传代一次可以得到9瓶25mL细胞瓶的狗肾细胞用于病毒培养，其工作容量约为18毫升单位细胞数2.5*105个/mL，得到的细胞总数约为4.5*106个。利用三维细胞培养技术计数培养后可以得到4瓶40mL细胞悬液。用细胞计数板5次，结果见表一。 计算公式：总细胞数=单格细胞计数*104*160/ml。
2.3 接种中毒后血凝效价比较：用9份甲型流感病毒病毒核酸阳性标本，采样液染毒后血凝效价测定结果见表二，A组为单层细胞贴壁培养中毒，B组为三维细胞培养后中毒实验。
以上结果用几何均数配对T检验统计分析，结果P > |t| = 0.5943，显示三维培养传代细胞的染毒实验滴度与贴壁细胞培养的细胞中毒后血凝试验效价结果无显著性差异。
2.4 甲型流感病毒细胞培养后核酸检测结果比较：将9例经直接检测甲型流感核酸阳性标本分别接种三维培养和贴壁培养的MDCK细胞，CO2培养，观察中毒后，重新抽核酸进行核酸分型检测，均为H3型季节性流感。结果见表三。A组为单层细胞贴壁培养中毒液检测，B组为三维细胞培养后中毒液检测。
以上结果用配对T检验统计分析，结果P > |t| = 0.3956，贴壁细胞培养和三维细胞培养结果无显著性差异；细胞培养后病毒大量增殖，使得核酸分型检测结果更明确。
3 讨论
流感病毒的监测包括核酸检测和细胞培养两方面。细胞培养是对流感病毒对细胞的敏感性，抗原性分析的必须方法，也可以通过细胞中毒实验使得某些直接核酸检测结果不明确的标本得以明确病毒核酸的分类，通过较少病毒载量的标本在细胞中增殖也是对一些不明分类的流感病毒深入研究的基础。
三维细胞培养技术在细胞培养上更贴近于自然状态，细胞生物活性较高。[3]利用该技术得到细胞对已病毒培养更为高效。三维细胞培养技术可以在病毒培养中得到极大的发展。对于三维结构下细胞生物活性较高状态的细胞染毒实验可能大大提高流感病毒染毒效果。得益于三维培养技术的革新，使得该技术能够培养在传统培养板上难以培养的细胞；细胞生长状态更加接近于体内状态，利于细胞的极化与功能化[4]；省去消化、离心等操作，简化细胞培养流程；可以在短时间内获得大量细胞；细胞的一致性可以得到保障；微载体透光性好，没有自发荧光，不必与细胞分离就可以进行后续观测；细胞培养表面大，可以获得高密度细胞；微载体材质与结构适合细胞生长，表面提供各种蛋白包被可满足特殊细胞培养的需求；微载体内嵌磁性颗粒，便于外加磁力进行操控；大大减少耗材用量，降低耗材成本，并且有利于环保；减少研究者在细胞培养上花费的精力。
本次研究中，三维细胞培养方法不仅比普通单层细胞培养有更多的细胞收获，而且在病毒敏感性，血凝效价实验等各方面与单层细胞培养方法无显著性差异。
三维细胞培养技术在流感病毒培养中得以较好的应用，该技术在细胞传代、细胞复苏、细胞冻存等细胞技术都已经较为成熟。特别是细胞传代的应用，细胞培养技术与新材料新方法结合的全新思路解决和突破了传统贴壁细胞培养技术细胞传代细胞得率过低的技术瓶颈，对于我们实验室高通量的流感病毒监测、培养具有十分重要的意义。
参考文献：
[1] 胡康洪， 姚颖.三维细胞培养技术的研究与应用， 医学分子生物学杂志， 2008， 5（2）：185-188
[2] 全国流感监测方案（2010版）
[3] ALVIA，STUPACK D G，Cell survival in a three-dimensional matrix[J].Methods Enzymol，2007，426：85-101.
[4] 盛治国， 郭家彬， 彭双清. 体外细胞三维培养技术在药理毒理学研究中的应用， 中国药理学与毒理学杂志， 2007. 21 （5）
马上就要到1月份了，往年这时大家都是很开心的期盼着回家过年，但是今年却因为疫情在剧部地区的二次爆发，令大家忧心忡忡，也正因为这样春节从非中高风险区回赤峰要向社区报告吗成了大家最关注的，一起看看吧。
2022春节从非中高风险区回赤峰要向社区报告吗
就目前看是不需要的，但是具体的还是以小区的规定为准。
春节从非中高风险区回赤峰要向社区报告吗是当下很多返回赤峰的人都有的疑问，一般来说是不用的，不过需要提供48h核酸检测告如果无法提供，就要配合“一场两站”核酸采样点进行采样检测，并向属地疫情防控指挥部门报备，在12小时内完成核酸检测，检测结果为阴性后，方可有序流动。
今年还能不能回赤峰过年
就目前看是能过回赤峰过年的，不过就规定看计划来（返）赤峰人员特别是来自中高风险等级地区应提前了解赤峰疫情防控要求并主动配合。返乡途中要做好个人防护，乘坐火车、飞机等公共交通工具时要全程佩戴好口罩；在车上要讲究个人卫生，打喷嚏时要捂住口鼻，如果发现体温偏高的情况要及时上报。回家后，对衣物行李进行消毒，回赤峰后尽量避免去室内人多的密闭空间，减少走亲访友和人数较多的聚集。
春节回赤峰过年有什么规定
春节回赤峰肯定是要提供核酸报告的。
目前来看如果是低风险地区的人，是可以回赤峰的。春节还有一个多月，要看控制情况。最近国内传播较多，局部分布和小规模聚集特征并存。受影响，赤峰也在采取严格的防控措施。就目前赤峰的防疫规定而言，赤峰人在购票前需要核实相关防疫政策。
（来源：文章屋网 ）
天津作为外来人员排名较前的城市，每天的人口流动都大的不行，更别说春节前扣来往人员更是数不胜数，但由于时下情况特殊很多地方再次出现了确诊患者，大家纷纷想着春节期间天津对返津人员有限制吗，一起看看吧。
2022春节期间天津对返津人员有限制吗
春节期间天津对返津人员有限制，毕竟时下情况特殊。就最新规定来看近期来津返津人员应加强自我防护，从涉及疫地区回津应主动向社区、工作单位等报备。低风险地区提供健康码和疫苗接种码就可以了，但是吧中高风险区的不仅实施48小时内核酸阴性证明核验制度，还要实施离开暴露地后14天居家隔离(同住人员共同隔离，不符合居家隔离条件实施集中隔离)抵津后第1、3(隔离满18小时)、7、14日进行核酸检测,检测结果为阴性解除管理。隔离管理周期结束时未满抵津14天者，实施抵津后14天医学观察。
春节外地人能不能随意进出天津
就当前看是可以的，毕竟以最新的规定来看低风险地区返津人员持天津健康码绿码，在体温正常且做好个人防护措施的前提下，可以正常通行。但是中高风险区的抵津前14天内，具有中高风险地区旅居史，实施48小时内核酸检测阴性证明核验制度。
春节去天津要准备什么证明
春节去天津要准备什么证明是大家都有的疑问，就了解如果低风险区出示天津健康码就可以了不放心的可以再加一个48h的核酸证明，但是中高风险区的最好不要出行，要不然抵津后14天集中隔离，具有中高风险地区所在县（市、区、旗）旅居史人员实施抵津后14天居家隔离，其他人员实施14天医学观察。
（来源：文章屋网 ）
福建5岁女童毛毛（化名）因输血感染艾滋病事件，引起社会广泛关注。该女童是国内报告年龄最小的艾滋感染者。毛毛出生时就患有先天性心脏病，曾花费几十万元进行手术治疗。
福建省卫计委医政处处长杨闽红说，患儿在医院手术治疗期间，曾先后输注过8位献血者的血液。经查证，确认其中一位陈姓献血者目前检测HIV抗体为阳性。该献血者曾于2010年3月31日无偿献血，当时血液检测结果合格，此后未再献血，在本次调查前并不知晓自己已感染HIV。综合考虑患儿父母HIV抗体检查阴性的结果，调查组专家认为，毛毛因输注“窗口期”血液而感染HIV的可能性极大。
图为患病期间，毛毛只能抱着玩具小熊玩耍，她渴望能和其他小朋友一起玩耍。
2015年年初，福州5岁女童毛毛，疑似因2010年在医院输血感染艾滋病病毒。1月10日，福建省卫计委公布最终调查结果，毛毛当年先后输入过8名献血者的血液，其中一位原HIV抗体检测阴性的陈姓献血者，本次检测HIV抗体为阳性。该名献血者曾于2010年3月31日参加无偿献血，当时血液检测结果合格，其血液除注输给毛毛外，还注输给其他两个人。
福建省卫计委表示，在对当年福建医科大学附属协和医院对毛毛进行的输血治疗，以及福建省血液中心的采血、检测、制备过程的调查中，调查组均未发现违规行为。
如果违规行为并不存在，为什么没能检测出血液中的艾滋病毒？对此，福建省卫计委称，女童输血感染艾滋病可能系“窗口期”感染，国家卫计委新闻发言人毛群安也表示，根据目前的调查结果，该女童在“窗口期”感染的可能性较大。
到底什么是“窗口期”？它会在多大程度上影响医疗用血的安全？除此之外还有哪些因素威胁医疗用血的安全？
难以避免的“窗口期”
受技术所限，从人体感染艾滋病病毒到能够检测出病毒，最新技术也需要11天。
“不管在国内还是在国外，‘窗口期’是必定存在的，也是目前的技术手段无法消除的。”北京红十字血液中心质量监督办公室主任孙莉有些无奈地对《中国经济周刊》记者说。
孙莉介绍，血液检测惯用的酶免技术手段，是一种基于免疫学的抗体检测。
人体在感染细菌、病毒后，受到刺激的机体都会产生一种相应的抗体，以对抗特定的细菌或病毒，而酶免检测所检测的对象正是抗体。但是抗体的产生与病毒进入人体之间是有时间间隔的，并非人体接触病毒的同时就会产生抗体，这也意味着在此期间，如果采用酶免检测，会因检测不到抗体，从而认定血液中并不存在特定的病毒，而这一时期也就是所谓的“窗口期”。
不同病毒“窗口期”的长短也不尽相同，孙莉介绍，艾滋病毒“窗口期”平均为22天，而乙肝病毒与甲肝病毒“窗口期”可分别达到45天与70天。
在无法消除“窗口期”的情况下，只能通过革新检测技术不断缩短“窗口期”。毛群安在1月12日召开的新闻会上也表示，按照全国卫生计生工作会议上的工作安排，2015年年内要基本实现全国范围内血站核酸检测覆盖。 福建省卫计委医政处处长杨闽红说，患儿在医院手术治疗期间，曾先后输注过8位献血者的血液。经查证，确认其中一位陈姓献血者目前检测HIV抗体为阳性。该
献血者曾于2010年3月31日无偿献血，当时血液检测结果合格，此后未再献血，在本次调查前并不知晓自己已感染HIV。综合考虑患儿父母HIV抗体检查阴性的结果，调查组专家认为，毛毛因输注“窗口期”血液而感染 HIV 的可能性极大。
核酸检测不同于酶免检测之处，在于检测标志物的变化，核酸检测的检测对象为病毒的遗传物质。以艾滋病毒为例，它是RNA病毒，遗传物质为RNA，在进入人体后，艾滋病毒会以不断复制的方式进行繁殖，而从人体感染艾滋病毒，到核酸检测可以检测到病毒的RNA，同样要经历一段时间，这也就形成了核酸检测的“窗口期”。只不过相比于酶免检测，“窗口期”的时间被缩短了，在使用核酸检测后，对艾滋病毒的检出可以提前到11天左右。
其实在2010年3月，卫生部便下发了《2010年血站核酸检测试点工作实施方案（试行）》文件，包括北京、上海、广州、山东在内12个省市的省级血液中心，以及3家中心血站，共15所采供血机构被列入国内首批血液筛查核酸检测试点单位。而北京市则是从2013年7月1日开始，北京红十字血液中心以外的3家区县血站也实现了核酸检测。
孙莉表示，虽然没有统计过具体的数据，但自采用核酸检测后，检测到的不合格的血液确实增多了。
而在加入核酸检测的同时，原来的检测方法得到了保留，孙莉向记者介绍，两种检测方法所针对的标志物不同，因此只是根据不同阶段检测不同的标志物，并非“非此即彼”的关系。
严格的血液检测
广州血液中心：近年来报废的血液多因转氨酶偏高（占七成左右），其次为乙肝、丙肝、梅毒，每年检出艾滋病毒感染在50例左右。
孙莉表示，其实在整个采供血的流程中，纯技术的环节就是检测，除去无法避免的“窗口期”外，不再有其他的技术盲区。
其实在每一位无偿献血者进入献血车后，为保证血液安全而进行的检测与筛选就已经开始。 图为患病期间，毛毛只能抱着玩具小熊玩耍，她渴望能和其他小朋友一起玩耍。
孙莉向记者介绍，献血前对献血者的检测并没有统一要求，但是必须对血红蛋白进行检测，血红蛋白不合格的人是无法进行献血的。此外，各个血站会依据情况增加转氨酶、ABO血型等检测内容，因为人员不能长时间滞留在街头献血车，这些检测多采用纸条法的快筛，确保可以在短时间内完成。
除通过检测进行初步筛选外，在献血现场还会以问卷的形式对献血者进行健康情况的征询，孙莉表示，其实无偿献血需要献血者具有一定的社会责任感，而这一环节正是帮助献血者进行自我排查，绝大多数献血者是健康的，一般人也不会在自己身体状况不良好的情况下主动选择献血。
除了现场征询，采血点都在醒目位置标识出了回告电话，孙莉向记者介绍，如果一个献血者本身有高危行为，但因为和朋友一起来献血，在现场碍于面子没有进行告知，或者献血者在完成献血后出现了经血传染病的症状，他都可以通过回告电话与血站联系，血站再依据情况对血液进行处置。
只有在现场检测与征询环节都完成后才会进行采血，血液的保存期一般是35天，而采集完成的血液至少要在血站滞留三天，第一天血液会被送回血站，第二天在取出部分样本进行检测的同时完成对血液的加工，第三天则会依据检测结果对血液进行包装打签，之后血液就可以进入成品库准备发放给医疗机构。
据介绍，目前国家共要求血站对所采血液进行7项检测，包括ABO血型、RH血型、转氨酶，以及4项经血传染病：乙肝、丙肝、艾滋病与梅毒。孙莉表示，目前国家规定对这4种经血传染病进行检测，但其实检测技术是随着对疾病认知的加深而不断发展的，像丙肝与艾滋病的检测也并非是早期做血筛时就有的项目。原卫生部曾分别于1993年与1995年下文，强制要求输血前进行丙肝与艾滋病检测。
由于国家规定对血液进行检测的责任在于血站，因此医疗机构在拿到所需血液后不会再进行检测。医院主要是在输血前对患者的血液情况进行检测，进行交叉配血等工作。而每一袋医疗用血的包装上都有一个编码，通过它追踪到血液的源头。
孙莉向记者介绍，北京红十字血液中心每年所采血液在经过检测后，不合格需要报废的占2%左右。广州血液中心主任付涌水在此前接受《广州日报》采访时曾表示，近年来报废的血液多因转氨酶偏高（占七成左右），其次为乙肝、丙肝、梅毒，而每年检出艾滋病毒感染在50例左右。孙莉表示，每年北京血液中心采集到的血液来自3万人次，2014年采集到了46万单位（每单位为200mL）的血，同理如果考虑到广州每年的献血人次与总量，50例这个数字其实很低。
血资源紧缺下的“黑市”风险
血头私设血站采血、不具备采供血资质的医疗机构私自采供血，为医疗用血安全带来隐患。
自1998年《中华人民共和国献血法》实施以来，我国逐渐实现了由义务献血到无偿献血的过渡。但是近年来，各地频现“血荒”，据统计，我国人口献血率仅为0.87%，低于世界发达国家的4.54%和中等收入国家的1.01%。
以医疗资源集中的北京为例，2010年北京的用血需求量增长了10%，而采血量仅上升了2.9%。有媒体统计，全国70个大中城市中，出现过“血荒”的已达47个，占总数的67%。
孙莉向记者介绍，目前北京的供血只能说是基本满足需求，血站会首先满足急救需求，其次是妇女儿童，然后才是择期手术。对于血液的来源，孙莉表示，80%的血液来自街头的采血车，剩下的20%则来自互助献血、团体献血与外地调剂，而这些形式的献血工作主要在血液短缺的季节，如冬季，或特别炎热的夏季，才会展开。
孙莉介绍，国家对于无偿献血以外的采血形式也有限制，比如互助献血所占的比例就不能超过5%。所谓互助献血，就是在血液短缺的情况下，用血病人自行寻找血源到血站献血，并凭献血证为患者换取等量指定血型用血。
尽管互助献血明确规定，为确保血液质量和献血者及受血者的安全，医院及患者和亲属应确保献血者为自愿无偿献血，并禁止雇用他人献血，但据媒体报道，在现实中，由患者付费给血头，再由血头找人到血站献血，或私设血站采血的情况时有发生。而一些不具备采供血资质的医疗机构私自开展采供血行为也为医疗用血安全带来了隐患。
【关键词】流行性感冒；流行病学；病原学；监测
流行性感冒（简称流感）是由甲、乙、丙3型流感病毒引起的急性呼吸道传染病。由于流感病毒特别是甲型流感病毒的血凝素和神经氨酸酶等抗原的不断变异，以至目前全世界还未能有效的控制该病，人群对变异株普遍易感，控制难度大，所以容易迅速导致世界性的流感大流行，病死率较高[1]。流感早已被列为21世纪我国重点防治的传染病之一[2]。在三型流感病毒中，甲型（A）和乙型（B）流感病毒对人类威胁较大[3]。流感的流行程度取决于流感病毒的毒力、人群的免疫水平、从季节性流感病毒感染获得的交叉保护作用以及宿主的个体因素等[4]。长期、连续地开展流感监测是及时掌握流感流行趋势及规律，发现病毒变异株，优势株的重要手段，是指导流感防治工作的科学依据[5]。现将2010年流感流行病学以及病原学监测情况做如下分析。
1 材料与方法
1.1 研究内容：对我区2010年流感监测数据进行分析，较全面的揭示我区流感流行特征。
1.2 资料的收集
1.2.1 数据来源
全部数据均来源于“中国流感监测信息系统”中的报告的流感样病例（ILI）和流感样本病原学检测结果。
1.2.2 监测点
我区流感监测哨点医院的监测诊室包括阿拉善中心医院、巴彦卓尔市医院、包头市中心医院、包头医学院第一附属医院、赤峰市第一医院、鄂尔多斯市中心医院、二连浩特市医院、和林格尔县人民医院、呼和浩特市第一医院、呼和浩特市回民区卫生防疫站、呼伦贝尔市人民医院、满洲里市第一医院、内蒙古医学院第一附院、内蒙古医院、妇幼保健院、通辽市医院、乌海市人民医院、乌兰察布市中心医院、锡林郭勒盟医院、兴安盟人民医院共20家。
1.3 研究对象
1.3.1 流感样病例（ILI）[6]：即发热（体温≥38℃），伴咳嗽或咽痛之一者。流感样病例并不是疾病的诊断名称，确切的说是一个检测病例，是为了从流感样病例的发病变化情况来分析流感的发病趋势，相对流感，流感样病例在疾病判断上易于实际工作操作，无需实验室诊断依据[7]。
1.3.2 流感样病例监测标本[6]：发病3天内且没有服用过抗病毒药物的具有流感样症状的患者的咽试子或者漱口液。
1.4 研究方法[6]
1.4.1 流感样病例（ILI）报告：哨点医院监测诊室的医务人员，按照流感样病例的定义，每天按科室登记各年龄组的流感样病例数和门急诊病例就诊总数，由哨点医院主管科室每日收集、汇总后，于每周一将本院各监测诊室数据录入到“中国流感监测信息系统”。
1.4.2 病原学检测方法：哨点医院监测诊室的医务人员采集发病3天内且没有服用过抗病毒药物的具有流感样症状的患者的咽试子或者漱口液3～4ml送流感实验室进行病毒的分离培养和鉴定。采集和检测方法参照《全国流感监测方案》和《全国流感监测技术指南》[6]。
1.4.3 统计方法
对哨点医院报告的流感样病例数据以及采集样本的流感病毒核酸检测结果采用Excel、Spss进行汇总分析。
2 结果
2.1 流行病学监测结果
流感样病例就诊百分比（ILI%）：指某一时间段ILI数与监测诊室就诊人数的百分比，目前许多国家均以此作为反映流感流行趋势的指标。
2.1.1 流感样病例的时间分布
2010年流感样病例（ILI）共26446例，ILI%均值为1.985%，以周为单位，各周ILI%波动在0.754%-6.446%之间，本年度ILI%仅出现1个高峰，最高峰出现在第7周，数值为6.446%，最低峰出现在第41周，数值为0.754%。2010年我区流感流行季节（1-3月、10-12月）[6]的ILI%为2.256%，非流行季节为（4-9月）[6]的ILI%为1.748%，流行季节与非流行季ILI%的差异有统计学意义（c2=439.941，P
2.1.2 流感样病例的年龄分布
内蒙古地区2010年0岁～，5岁～，15岁～，25岁～，60岁～各年龄组流感样病例年龄构成比分别为54.28%，21.12%，6.26%，14.24%，4.09%，各年龄组构成比差异有统计学意义（c2=27300.912，P
2.1.3 流感样病例的地区分布
内蒙古地区分为东部中部西部三个地区，2010年，内蒙古东部地区ILI为7963例，ILI%为1.254%，中部地区ILI为16385例，ILI%为2.803%，西部地区ILI为2098例，ILI%为1.866%， 2010年内蒙古东中西部地区ILI%相互差异有统计学意义（c2=3733.211，P
2.2 病原学监测结果
2.2.1 时间分布
2010年流感病毒核酸周阳性检出率介于0-31.447%之间，本年度流感病毒核酸阳性检出率呈明显的冬春季双峰分布，最高峰值位于第46周（31.447%），第二高峰值位于第3周（23.871%），最低峰位于第24、25、27、29、30、31、32、33、34、35、37、38、39、40周，数值为0。2010年我区流感流行季节（1-3月、10-12月）的流感病毒核酸阳性率为18.680%，非流行季节为（4-9月）的流感病毒核酸阳性率为5.390%，两者流感病毒核酸阳性率差异有统计学意义（c2=133.305，P
2.2.2 性别分布
2010年内蒙古地区共采集咽拭子标本3926份，阳性546份，阴性3380份，男性阳性292份，男性阴性1917份，男性阳性率为13.219%，女性阳性254份，女性阴性1463份，女性阳性率为14.793%，男女两性流感病毒核酸阳性率差异无统计学意义（c2=2.001，P>0.05）。
表二 2010年实验室检测性别分布
2.2.3 年龄分布
2010年，内蒙古地区各年龄组流感病毒核酸检测阳性构成比0岁～为32.784%，5岁～为32.051%，15岁～为9.890%，25岁～为22.711%，60岁～为2.564%，各年龄组流感病毒核酸阳性检出构成比差异有统计学意义（c2=246.461，P
2.2.4 流感病毒亚型分布
流感季节类型[8] ：指某一时间（季节）范围内，所分离的流感毒株中，同一型或亚型流感毒株所占比例达到75%以上的为优势毒株，该期间的流感季节类型即为该优势毒株的流行季节；若多型（亚型）流感毒株同时流行，且分别占有相当比例，则该季节类型为混合型。从流感季节类型的变化可以看出病毒的型别分布特征。2010年共检测3926份样本，阳性546例，阳性率为13.907%，本年度为混合型（B型35.348%、H3N2型32.418%、H1N1型15.934%、A（H1N1）pdm09型5.311%），本年度出现一例混合型样本，为B型与A（H3N2）混合；
2.2.5 流感病毒变化趋势
2010年B型流感病毒主要出现于冬春季节，在1-4月份占全年的绝大多数，在5月份开始下降并消失，到本年11月份又开始上升一直延续到下一年。H3亚型流感病毒主要出现在本年度的冬季，并且构成比在10月-12月份居各亚型之首。季H1亚型流感病毒主要出现在5、6、11、12月。A（H1N1）pdm09主要出现在1月份。
2.2.6 流感病毒各亚型的地区分布
2010年东部地区B型流感病毒共检出45例，占本年度B型流感病毒的23.438%；中部地区B型流感病毒共检出106例，占本年度B型流感病毒的55.208%；西部地区B型流感病毒共检出41例，占本年度B型流感病毒的21.354%，各地区B型流感病毒核酸阳性检出构成比差异有统计学意义（c2=62.203，P
[关键词]血液；癌胚抗原信使核糖核酸；消化系统肿瘤；Ar行转移
[中图分类号] R57
[文献标识码]A
[文章编号] 1673-755512007]02-21-02
明确肿瘤有无转移对治疗决策的制订、预后评估等具有重要的指导意义。至今对肿瘤早期转移、微转移、血行转移等的诊断仍没有令人满意的方法。研究提示，癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA)指标在诊断肿瘤微转移方面具有较高的价值。检测血液中CEAmRNA指标，对诊断消化系统肿瘤血行转移有较大帮助。报道如下。
1对象与方法
1．1对象所选对象均为我院确诊的住院病人，其中，①消化系统恶性肿瘤患者(恶性肿瘤组)41人，包括胃癌11人、结肠癌10人、肝癌10人、胰腺癌10人，男21人，女20人，年龄34岁-73岁；②非肿瘤性消化系统疾病患者(非肿瘤对照组)32人，包括胃炎8人、结肠炎8人、肝硬化8人、胰腺炎8人，男16人，女16人，年龄34岁-73岁。
1．2方法采集静脉血液(抗凝)为检测标本，分离、提取有核细胞，生理盐水洗涤有核细胞2次，以备检测CEAmRNA。标本如不能及时检测，应尽快分离、提取有核细胞封存于―70℃。检测CEAmRNA应用逆转录―套式―聚合酶链反应技术(RT-NP-PCR)，检测试剂盒为上海复星实业有限公司的商品试剂盒。操作经RNA模板提取、逆转录合成eDNA、套式PCR扩增、扩增产物琼脂糖凝胶电泳、溴化乙啶染色、紫外检测等步骤，以出现与试剂盒提供的阳性对照同齐的核酸电泳亮带为CEAmRNA阳性结果。详见试剂盒操作说明书。应用卡方检验进行统计学分析，以P
2结果
各组血液标本检测CEAmRNA的结果：见表1。
组间阳性结果的差别具有极显著性(P
3讨论
消化系统恶性肿瘤是临床最常见的恶性肿瘤之一，许多临床就诊的消化系统恶性肿瘤患者已经发生不同情况的肿瘤转移。明确有无肿瘤转移，对临床治疗决策的制订、治疗效果的判断、病情预后的评估等是具有重要的、决定性意义的因素。然而，虽经不懈研究探索，至今对肿瘤早期转移、微转移、血行转移等的诊断仍没有令人满意的方法。研究提示，CEAmENA在肿瘤细胞及某几种特定细胞中有高水平的表达，正常体细胞与非肿瘤炎性细胞几乎不表达CEAmRNA[1-7]；CEAmRNA指标在诊断恶性肿瘤、肿瘤微灶、微瘤细胞转移等方面具有较高的价值；检测血液中CEAmRNA指标对诊断与监测消化系统肿瘤血行转移也有较大帮助，在血液中检测到CEAmRNA阳性结果则提示有肿瘤细胞血液转移。实验结果显示；血液检测CEAmRNA阳性结果在消化系统肿瘤组与对照组之间的差别具有极显著性(P