作者:马小刚 杨晓光 任敬 赵峥肺癌a549细胞侵袭迁移
摘要:目的 利用针对Lipocalin-2的小干扰RNA(siRNA),观察Lipocalin-2基因沉默对人肺癌A549细胞MMP-9表达及侵袭、迁移能力的影响。方法 采用Real-time PCR和Western blot检测Lipocalin-2在3种肺癌细胞株(A549、NCI-H661、NCI-H446)及正常人支气管上皮细胞(HBE)的表达情况。设计并构建靶向Lipocalin-2的siRNA转染A549细胞,采用Real-time PCR和Western blot检测转染效率及Lipocalin-2基因沉默对MMP-9 mRNA和蛋白表达的影响。Transwell小室检测细胞侵袭能力。细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 Lipocalin-2 mRNA和蛋白在肺癌A549、NCI-H661、NCI-H446细胞株中的表达水平均显著高于HBE细胞,差异有统计学意义(P〈0.05)。siRNA-Lipocalin-2转染组Lipocalin-2 mRNA和蛋白表达水平与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);siRNA-Lipocalin-2转染组MMP-9 mRNA和蛋白表达水平与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);siRNA-Lipocalin-2转染组穿膜细胞数、平均迁移距离与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 Lipocalin-2基因沉默通过下调MMP-9表达降低了人肺癌A549细胞的侵袭和迁移能力。
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