作者：李贵龙 王靖 刘昌胜骨修复生物医学工程蛋白质蛋白质复性原核表达
摘要：骨形态发生蛋白-2（BMP-2）是重要的骨诱导生长因子，是提高骨修复材料活性和临床骨修复效果的有效手段和关键物质。由于BMP-2在体内含量低，依靠从动物体内提取难以满足临床需求。本文研究满足临床需求的BMP-2的制备方法，并评价其生物活性。采用密码子优化方法，并通过进一步更换其中部分核苷酸编码，得到优化的hBMP-2基因的DNA序列，制备大肠杆菌rhBMP-2菌株，通过发酵及工艺优化，获得BMP包涵体，经分离纯化与复性，制备出高纯度的rhBMP-2。测定C2C12细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性来表征单倍体和二倍体BMP-2的成骨活性，发现二倍体rhBMP-2的成骨活性明显高于单倍体rhBMP-2，并且随着BMP-2浓度增加，碱性磷酸酶活性上升。体内动物异位成骨实验发现rhBMP-2肌带植入小鼠体内3周后，取出的异位骨颗粒鲜艳饱满，骨结构完整；HE切片和Masson三色切片都显示出良好的异位成骨效果。此方法制备的rhBMP-2具有良好的诱导成骨分化能力，可用于骨组织修复，满足临床需要。
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