靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖1的DNA适配体筛选

作者：翟景勤; 窦晓倩; 王文宇; 付洁; 王宇光; ...适配体selex技术流式细胞术

摘要：目的 筛选获得特异性结合磷脂酰肌醇蛋白聚糖1 （GPC1） 的单链DNA适配体.方法： 合成全长81 nt, 中间含39个随机序列的单链寡核苷酸 （ssDNA） 文库, 运用指数富集配基系统进化 （SELEX） 技术筛选获得GPC1适配体;酶联免疫吸附分析法 （ELISA） 实验确定候选适配体与GPC1蛋白的亲和力, 流式细胞术确定候选适配体与2种GPC1高表达细胞系 （胰腺癌Panc-1细胞和工具细胞Luc-ZR-75-1GPC1） 的结合特异性.结果： 经过10轮SELEX筛选获得#9适配体, ELISA分析其亲和力为44±0.69 nmol/L, 流式细胞术结果表明其与胰腺癌Panc-1细胞和Luc-ZR-75-1GPC1细胞的阳性结合率分别为44.69%和51.44%.结论： 筛选获得与GPC1蛋白有较高亲和力、 与表达GPC1细胞系特异结合的ssDNA适配体.

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