作者：赵鹏 陈俊卯 曹文斌 杨光华 虞向阳 刘春...结肠肿瘤细胞运动
摘要：目的：探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α对肿瘤相关钙信号转导蛋白（TROP）-2表达的影响及其对细胞侵袭和迁移能力的影响。方法以0、10、20、30、50、100、200μg/L的TNF-α处理人结肠癌HCT-116细胞，采用噻唑蓝（MTT）实验检测细胞存活率。采用Western blot检测TROP-2的表达量。采用划痕实验和Transwell实验检测20μg/L TNF-α处理前后细胞侵袭和迁移能力。借助脂质体Lipofectamine？2000转染TROP-2 siRNA，实时荧光定量PCR和Western blot验证转染后TROP-2的mRNA和蛋白水平。划痕实验和Transwell实验再次检测TNF-α对转染TROP-2 siRNA细胞的侵袭和迁移能力的影响。结果0、10、20、30、50μg/L的TNF-α处理24 h和48 h时细胞存活率差异无统计学意义。100、200μg/L与0μg/L比较，细胞存活率下降（P＜0.05）。与TNF-α浓度为0μg/L比较，10、20、30、50μg/L时TROP-2的表达量均升高，20μg/L时TROP-2的表达量最高（P＜0.05）；而TNF-α浓度为100、200μg/L时TROP-2的表达量下降（P＜0.05）。划痕实验和Transwell实验中,TNF-α组24 h时的细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均较对照组增加（P＜0.05）。转染TROP-2 siRNA后siRNA组中TROP-2的mRNA和蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组（P＜0.05）。此外，siRNA组24 h时的细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均较正常对照组下降（P＜0.05）。结论低浓度炎症因子TNF-α可能通过上调TROP-2的表达来促进结肠癌HCT-116细胞的侵袭和迁移。
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