作者：王德选 叶晓华 余灵芳 林洪洲 庄捷秋 杨...wnk3jnk肾脏凋亡
摘要：目的：观察WNK_3激酶高表达对白介素-1β（IL-1β）诱导人胚肾细胞（HEK293细胞）凋亡的作用。方法：HEK293细胞分为3组：Vector＋NS组、Vector＋IL-1β组和WNK_3＋IL-1β组。Vector＋NS组、Vector＋IL-1β组转染对照Vector,WNK_3＋IL-1β组转染WNK_3。药物干预时,Vector＋NS组加入等量0.9%氯化钠溶液,Vector＋IL-1β组、WNK_3＋IL-1β组加入10 ng/m L IL-1β。分别于培养0、12、24、36和48 h时,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性。孵育0、18、36 h时应用Western blot法检测Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-9、cleaved Caspase-9等凋亡蛋白。在IL-1β干预0、30、60 min时采用Western blot法检测JNK通路蛋白。结果：Vector＋IL-1β组在给药后细胞活性逐渐下降,在48 h达到最低值,WNK_3＋IL-1β组下降幅度较缓和,与同时间点Vector＋IL-1β组比较细胞活性回升,在48 h时差异有统计学意义（P〈0.01）。IL-1β孵育后cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9表达量增加。与36 h的Vector＋IL-1β组比较,WNK_3＋IL-1β组的cleaved Caspase-3显著减少,2组的cleaved Caspase-9在18 h及36 h时差异亦存在统计学意义（P〈0.05）。WNK_3转染后p-JNK的表达水平较未转染WNK_3组的上升幅度降低（P〈0.05）。结论：IL-1β诱导HEK293细胞活性下降,而转染WNK_3质粒可以有效逆转部分细胞活性。WNK_3激酶通过减少JNK的磷酸化抑制Caspase途径的活化,减少细胞凋亡,起到在不利条件下保护肾脏细胞的作用。
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