作者：丁芝祥 陈阳 秦贤杰 姚微微人晶状体上皮细胞
摘要：目的研究miRNA-184（miR-184）在转化生长因子β_2（transforming growth factor β_2,TGF-β_2）诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达及意义。方法应用不同浓度（0μg·L~（-1）、1μg·L~（-1）、5μg·L~（-1）、10μg·L~（-1）、15μg·L~（-1））TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化,细胞免疫荧光和Western blot方法观察转分化相关分子波形蛋白（Vimentin）、钙黏附蛋白E（E-Cadherin）的表达;应用qRT-PCR检测miR-184在不同浓度（0μg·L~（-1）、1μg·L~（-1）、5μg·L~（-1）、10μg·L~（-1）、15μg·L~（-1））TGF-β_2、不同作用时间（0 h、6 h、12 h、24 h、48 h）TGF-β_2（10μg·L~（-1））诱导人晶状体上皮细胞转分化中的表达变化。结果随着TGF-β_2浓度的增加,细胞胞浆中Vimentin荧光强度增强;E-Cadherin蛋白表达逐渐减少,各组细胞间E-Cadherin表达量差异有统计学意义（F=87.617,P〈0.01）;Vimentin蛋白表达逐渐增加,各组细胞间Vimentin表达量差异有统计学意义（F=68.923,P〈0.01）。随着TGF-β_2浓度的增加,细胞中miR-184相对表达量增多,在10μg·L~（-1） TGF-β_2诱导组达到峰值;随着TGF-β_2诱导时间的延长,细胞中miR-184相对表达量增加,在24 h表达达到峰值。结论 TGF-β_2诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化时细胞内miR-184表达增加,并与诱导浓度和时间有关,为进一步研究miR-184在人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化中的作用及机制提供实验基础。
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