作者：任丽伟 魏培 杨晓菲 杨璐 邓春艳 齐晖 李...诱导多能干细胞胰岛素分泌细胞糖尿病
摘要：目的：利用3步法诱导方案,使小鼠诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSCs）分化为胰岛素分泌细胞（insulin-producing cells,IPCs）,观察诱导效率和成熟度,并观察其对糖尿病小鼠治疗效果。方法：本实验室通过piggy Bac转座子将C57/C雄性小鼠来源胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts,MEFs）构建为小鼠iPSCs,利用3步法诱导方案分化为IPCs,观察细胞分化过程中的形态变化;RT-PCR和免疫荧光检测其胰岛β细胞发育相关基因和蛋白的表达;流式细胞术分析分化效率;葡萄糖刺激实验检测胰岛素和C肽分泌水平。将IPCs移植入C57/C雄性糖尿病小鼠模型左肾包膜下,监测血糖和血清中胰岛素含量28 d,观察逆转高糖血症的效果。结果：建立的3步诱导方案可以将小鼠i PSCs诱导分化为IPCs,其表达胰岛β细胞的标志性基因（Pdx1、Ngn3、Pax6和Ins2）和蛋白（Pdx1、Nkx6.1和胰岛素）,在葡萄糖刺激下可分泌胰岛素和C肽。流式细胞术结果表明诱导分化的效率达28%。移植后3 d糖尿病小鼠血糖即降低至接近正常水平,血清胰岛素含量明显升高,对葡萄糖的调控能力明显增强。病理学观察IPCs细胞移植28 d后仍存活。结论：建立的3步诱导法可将i PSCs高效定向诱导分化为IPCs,明显缩短了诱导分化的时间,移植至近交系同性别小鼠体内可逆转糖尿病的高糖血症。
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