作者:王敏; 罗光华; 张友浦; 黄波; 于洋; 刘宏...载脂蛋白m信使rna受体表达
摘要:目的探讨载脂蛋白M(apoM)对1–磷酸鞘氨醇受体–1(S1P1)表达的影响。方法体外实验:采用载有人apoM基因序列(实验组)和不携带apoM基因序列(对照组)的慢病毒分别感染人脐静脉内皮融合细胞(EA.hy926细胞),获得稳定表达的细胞株后提取细胞总RNA和总蛋白,采用RT-PCR技术检测apoMmRNA的过表达情况,并采用RT-PCR和WesternBlot法检测S1P1受体的表达情况。体内实验:随机选取8~10周,体质量约25g的健康apoM基因野生型(apoM+/+,实验组)和apoM基因敲除型(apoM–/–,对照组)C57BL/6小鼠各8只,处死小鼠后取其主动脉提取肝脏RNA,逆转录成cDNA后采用RTPCR法检测apoM和S1P1mRNA的表达情况。分别比较体内和体外实验中实验组和对照组apoMmRNA和S1P1蛋白及mRNA的表达情况。结果(1)实验组EA.hy926细胞的S1P1mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组细胞(P<0.05);(2)实验组apoM+/+小鼠主动脉S1P1mRNA和蛋白表达水平也明显高于对照组apoM–/–小鼠(P<0.05)。结论ApoM能够增加体内和体外S1P1mRNA及蛋白表达水平。
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