小鼠视网膜神经节细胞的纯化培养

作者：黄萍 张纯 王薇 张绍敏 ColinJ.Barnstabl...视网膜神经节细胞细胞培养的小鼠

摘要：目的建立小鼠视网膜神经节细胞的体外纯化培养方法。方法实验研究。采用Thy-1．2单克隆抗体免疫吸附法，将8～12只生后4～6d的C57BL／6小鼠视网膜消化后，制成视网膜神经细胞混合悬液，应用胶质细胞特异性抗体CDllb室温孵育后，去除混悬液中的胶质细胞，应用特异性抗体Thy．1．2吸附混合悬液中的视网膜神经节细胞，接种于预先应用多聚赖氨酸包被过的24孔培养板中，置于1cm×1cm的载玻片上。在温度37℃、体积分数5％的CO2培养箱中培养。观察视网膜神经节细胞的数目和轴突生长情况。结果细胞接种后24h即完全贴壁，视网膜神经节细胞的纯化率达90％以上，细胞生长良好，部分细胞伸出突起，随时问延长轴索逐渐延长，有些轴索的长度可达胞体的5倍以上，呈竹节状，近末端逐渐膨大。2周后可见到死亡细胞，3周时仍有少量存活细胞，但死亡的细胞占多数。结论采用Thy-1．2单克隆抗体免疫吸附法可成功纯化培养小鼠的视网膜神经节细胞。（中华腹科杂志，2011，47：129-133）

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